王 菲 陶林靜

（南陽市中心醫(yī)院，河南 南陽 473000）

兩種細菌鑒定法在臨床血液檢驗中的應用效果分析

王 菲 陶林靜

（南陽市中心醫(yī)院，河南 南陽 473000）

目的 對直接藥敏試驗法與常規(guī)藥敏試驗法在臨床血液檢驗中的應用效果進行分析。方法 選取從2012年8月至2014年8月200例檢查患者的陽性血液標本（200份），分別采取直接藥敏試驗與常規(guī)藥敏試驗，對比兩種試驗方法的符合率。結果 通過BACTEC9240系統(tǒng)檢測200份血液樣品，其中160份陽性樣品。直接法檢出革蘭陰性球菌與革蘭陽性桿菌符合率分別為85.00%與95.12%，對比常規(guī)法無明顯差異（P＞0.05）。結論 直接藥敏試驗與常規(guī)藥敏試驗均具有較高的符合率，但是直接藥敏試驗時間短、操作方便，有利于血液細菌感染檢測。

常規(guī)藥敏試驗；直接藥敏試驗；血液；細菌

在臨床中，菌血癥與敗血癥對患者生命造成嚴重威脅，病死率較高[1,2]。因此，臨床診治重點為準確的菌種鑒定與藥敏試驗。最近幾年以來，濫用抗生素造成不同病菌敏感性與耐藥性產(chǎn)生變異，選取正確細菌鑒定方法，能使診斷準確率得以提升，進而提高臨床療效。藥敏試驗主要的利用血液樣本中細菌檢測抗菌藥物敏感度，進而鑒定細菌類型，方便快捷。本文主要對直接藥敏試驗法與常規(guī)藥敏試驗法在臨床血液檢驗中的應用效果進行分析，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取從2012年8月至2014年8月收治的200例發(fā)熱且全身感染患者，均在發(fā)熱早期采集血液標本，僅采集1次，即30 mL，共200份，血液樣本冷藏保存，及時送檢。樣本采集需注意對象是否曾接受治療或者服用藥物，是否存在凝血功能障礙，有無血液系統(tǒng)疾病。

1.2 方法

1.2.1 直接藥敏試驗：將樣本直接放到BACTEC9240系統(tǒng)中，并進行檢測與培養(yǎng)。檢測出陽性樣本時，使用消毒注射器快速抽取陽性樣本10 mL，將陽性樣本放到無菌試管內(nèi)，細菌分離，1600 r/min離心，6 min后收集上層清液，2900 r/min離心，13 min后去除上清液，使用PBS進行洗滌，沉淀兩次以后重懸。取懸液20 μL涂片，應用革蘭染色，顯微鏡下倒放觀察。一旦革蘭陽性菌產(chǎn)生鏈狀情況，第1次藥敏試驗使用MH+6%羊血。在得出試驗結果以后，選取酶，將菌液濃度調(diào)節(jié)至6.0×105cfu/L，并將其接種至NC21綜合板上，然后采取細菌鑒定與藥敏試驗。普通菌種，MH平板中大概接種1滴～3滴的懸液，并且應用無菌試紙涂抹均勻，貼于藥敏紙片，根據(jù)2005 NCCLSI標準判斷耐藥性以及敏感度。

1.2.2 常規(guī)藥敏試驗：將所采集的陽性血液樣本分別放置于血平板、巧克力平板以及麥康凱平板接種，于36 ℃下經(jīng)16～22 h。使用6.0% CO2孵育，將菌落涂于板上，采取革蘭染色。在得到檢測結果以后，選取酶，最后根據(jù)Walkaway40系統(tǒng)鑒定藥敏試驗。

1.3 統(tǒng)計學分析：數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析使用SPSS 13.0 軟件，計量資料采取t檢驗，±標準差表示，計數(shù)資料采取χ2檢驗，百分數(shù)表示，P＜0.05，其差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

通過BACTEC9240系統(tǒng)檢測200份血液樣品，其中160份陽性樣品。直接法檢出革蘭陰性球菌與革蘭陽性桿菌符合率分別為85.00%與95.12%，對比常規(guī)法無明顯差異，P＞0.05，其差異無統(tǒng)計學意義。兩種方法菌種檢測符合率對比見表1。

表1 兩種方法菌種檢測符合率對比（例）

3 討 論

最近幾年以來，由于細菌耐藥性逐漸增加，菌血癥以及敗血癥等疾病逐漸上升，血液相關疾病患者病死率明顯提高[3,4]。有效且快速檢測方法，能及時對患者進行確診，確保用藥合理性。在臨床中，血液檢驗內(nèi)的細菌鑒定通常采取藥敏試驗，不僅對藥敏試驗有著嚴格的要求，同時創(chuàng)造試驗條件難度大。目前，抗生素濃度梯度法、全自動培養(yǎng)檢測儀、紙片擴散法以及稀釋法在臨床藥敏試驗檢驗中得到廣泛應用。本組研究，檢測主要應用BACTEC9240系統(tǒng)，這一系統(tǒng)屬于全自動血液培養(yǎng)系統(tǒng)，通過熒光探測對密封培養(yǎng)瓶中由于微生物代謝所造成的CO2或者是O2濃度改變進行持續(xù)測定，并且檢測微生物的實際增殖狀況，在細菌其他標本中的真菌、分支桿菌以及感染等自動培養(yǎng)系統(tǒng)與血液檢測中得到普遍應用。在采取BACTEC9240系統(tǒng)進行檢測以后，通過血液培養(yǎng)的陽性標本中所采取的兩種試驗方法在細菌鑒定結果可以發(fā)現(xiàn)，對于革蘭陰性桿菌以及革蘭陽性球菌的鑒定符合率比較高，同時發(fā)現(xiàn)腸桿菌鑒定符合率是其中最高的。這個系統(tǒng)不僅對于革蘭陰性桿菌以及革蘭陽性球菌的鑒定或者是檢測較為適合，對于腸桿菌也同樣適合，研究結果顯示，通過BACTEC9240系統(tǒng)檢測200份血液樣品，其中160份陽性樣品。直接法檢出革蘭陰性球菌與革蘭陽性桿菌符合率分別為85.00%與95.12%，對比常規(guī)法無明顯差異（P＞0.05），這說明這一系統(tǒng)可以替代常規(guī)藥敏試驗。總而言之，直接藥敏試驗與常規(guī)藥敏試驗均具有較高的符合率，但是直接藥敏試驗時間短、操作方便，有利于血液細菌感染檢測，在各級醫(yī)療單位均可運用。

[1] 莊華君,金映川,楊旭.API 20E、VITEK-32在臨床細菌鑒定中的應用[J].中國衛(wèi)生工程學,2011,3(4):198-200.

[2] 陳歡歡,文怡,劉根焰,等.血培養(yǎng)陽性標本直接細菌鑒定和藥敏中應用分離膠試管的方法探討[J].實用臨床醫(yī)藥雜志,2011,3 (15):143-145.

[3] 楊丹.臨床血液檢驗中兩種不同細菌鑒定法的臨床分析[J].中國醫(yī)藥指南,2014,3(19):122-124.

[4] 趙東明.直接藥敏試驗與常規(guī)藥敏試驗在臨床血液細菌鑒定與檢驗中的應用效果比較[J].中國醫(yī)藥指南,2013,9(26):13-16.

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