何志剛+伍遠(yuǎn)安+王金龍+李傳武+李邵明+唐湘北

摘要：以進(jìn)口魚粉和豆粕為飼料蛋白源，研究了6種蛋白水平（分別為27%、30%、33%、36%、39%和42%）的等能飼料對芙蓉鯉鯽幼魚增重和腸道、肝臟消化酶活性的影響。結(jié)果表明，飼料蛋白水平的增加，顯著地提高了魚體增重率、特定生長率、飼料效率、肥滿度（P<0.05），并降低了餌料系數(shù)和臟體比，還顯著地提高了腸道組織蛋白酶、食糜蛋白酶和GOT及GPT活性（P<0.05）。隨著飼料中蛋白水平的上升，肝臟蛋白酶和食糜、腸道組織、肝臟淀粉酶活性無顯著性差異（P>0.05）。

關(guān)鍵詞：芙蓉鯉鯽；飼料蛋白水平；增重；消化酶活性

中圖分類號：S965 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2014）01-0153-04

Effect of Dietary Protein Levels on Growth Performance and Digestive Enzyme Activities of Furong Crucian Carp （Furong Carp×Red Crucian Carp）Juvenile

HE Zhi-gang1，WU Yuan-an1，WANG Jin-long1，LI Chuan-wu1，LI Shao-ming1，TANG Xiang-bei2

（1.Fisheries Research Institute of Hunan Province， Changsha 410153， China；

2.Hunan Provincial Bureau of Animal Husbandry and Fisheries， Changsha 410006， China）

Abstract： Effects of dietary protein levels on growth and digestive enzyme activities of Furong crucian carp juvenile were investigated by feeding 6 isocaloric diets， with fishmeal and soybean meal as the major dietary protein source in pellet feeds. The trial feed protein contents were 27%， 30%， 33%， 36%， 39% and 42%， respectively. The results showed that the increased dietary protein levels significantly increased the growth gain rates， specific growth rate and condition factor， and significantly decreased feed conversion rates and viscerosomatic index， whereas significantly increased protease activity of intestine tissue and chyme， GOT and GPT activity of hepatopancreas（P<0.05）. However， there was no significant difference （P>0.05） in protease activity of hepatopancreas， amylase activity of intestine tissue and chyme with increasing dietary protein treatments.

Key words： Furong crucian carp（Furong carp♀×Red crucian carp♂）； dietary protein level； growth； digestive enzyme activity

收稿日期：2013-03-29

基金項目：國家大宗淡水魚類產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項目（CARS-46-41）；中央財政農(nóng)業(yè)推廣專項資金（2011）

作者簡介：何志剛（1982-），男，湖南南縣人，助理研究員，主要從事水生動物營養(yǎng)與飼料研究，（電話）13674887251（電子信箱）oceanhzg@163.com；

通訊作者，伍遠(yuǎn)安，研究員，（電子信箱）wya74859259@sina.com。

芙蓉鯉鯽（Furong crucian carp）是由湖南省水產(chǎn)科學(xué)研究所運(yùn)用鯉魚品種間雜交、鯉鯽種間雜交和系統(tǒng)選育相結(jié)合育種技術(shù)，經(jīng)20年的研究培育而成，具有生長快、肉質(zhì)好、抗逆性強(qiáng)、性腺敗育等優(yōu)良特性[1，2]。目前，有關(guān)芙蓉鯉鯽營養(yǎng)與飼料方面的研究尚未見報道，芙蓉鯉鯽飼料的粗蛋白含量也沒有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，一般參考混養(yǎng)魚料或鯽魚料。飼料蛋白對水生動物正常生長和健康至關(guān)重要，飼料蛋白也是養(yǎng)殖成本中最重要的組成部分。本研究通過配制不同蛋白含量的飼料，考察了飼料蛋白對芙蓉鯉鯽幼魚增重和腸道消化酶活性的影響，以期為規(guī)?；B(yǎng)殖芙蓉鯉鯽的人工飼料開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)用魚

芙蓉鯉鯽幼魚取自湖南漁緣生物科技有限公司，平均重量1.88 g，分為6個處理組，每處理組設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)隨機(jī)選取體質(zhì)健壯、外表無傷的魚80尾，共1 440尾。芙蓉鯉鯽幼魚飼養(yǎng)于18口流水循環(huán)的水泥池中（1.5 m×0.8 m×0.5 m）；每天投喂2次（9：00，16：30），投餌率3%～4%；試驗(yàn)期間水溫為26～32 ℃，溶解氧在6 mg/L以上，pH 6.9～7.9。養(yǎng)殖周期從2012年7月21日～9月20日，為期60 d。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計

以魚粉和豆粕為主要飼料蛋白源，且豆粕含量固定為28%，設(shè)計了6種飼料，蛋白含量分別為27%、30%、33%、36%、39%和42%。各處理組飼料的脂肪含量保持基本一致水平，各原料粉碎過60目篩，以F（Ⅱ）-26型雙螺桿擠條機(jī)加工成硬顆粒飼料（1.5 mm×2.0 mm），曬干至飼料水分含量為10%左右，用塑料袋包裝，保存于-20℃冰柜中備用。飼料原料組成和營養(yǎng)成分含量（表1）。

1.3 測定指標(biāo)與方法

1.3.1 生長指標(biāo)的測定 試驗(yàn)結(jié)束后稱魚總重，并于每池取魚9尾，分別稱魚個體重、內(nèi)臟重、肝臟重，測量體重、體長。增重率=（末均重-初均重）（g）/初均重（g）×100%；飼料系數(shù)=總投飼量（g）/（末重-初重）（g）；成活率=試驗(yàn)?zāi)~尾數(shù)/試驗(yàn)初魚尾數(shù)×100%。

1.3.2 樣品的采集 飼喂后2 h，每池取魚9尾在冰盤上解剖，迅速分離出肝臟、前腸（腸道全長的前1/3部分）和前腸內(nèi)容物，并用預(yù)冷去離子水沖洗腸道內(nèi)壁，用濾紙吸去組織樣品表面水分，3尾并為一個樣品，裝袋密封，放置于-20 ℃中保存，在3 d內(nèi)測定前腸組織及內(nèi)容物中蛋白酶和淀粉酶活性及肝臟GOT、GPT活性。

1.3.3 生化指標(biāo)與酶活性的測定 原料及飼料樣品均在105 ℃烘干至恒重后，求得干物質(zhì)含量，然后進(jìn)行生化測定。采用全自動定氮儀測定粗蛋白含量（N×6.25）；采用索氏抽提法，以乙醚為抽提劑測定粗脂肪含量；將樣品在電爐上碳化后，在馬福爐中（550 ℃）灼燒12 h后測得樣品灰分含量[3]；蛋白酶活性采用福林-酚法測定[4]；淀粉酶的活性測定采用淀粉-碘顯色法測定淀粉酶活性[4]；谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）和谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）的活性測定參考文獻(xiàn)[5]的方法。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANONA）和多重比較（LSD法），P<0.05時差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料蛋白水平對芙蓉鯉鯽幼魚增重的影響

飼料蛋白水平對芙蓉鯉鯽幼魚生長性能的影響見表2。由表2可知，當(dāng)飼料蛋白水平為27%～36%時，隨著飼料蛋白水平的增加，芙蓉鯉鯽幼魚增重率和飼料效率呈上升趨勢，飼料系數(shù)呈下降趨勢；當(dāng)飼料蛋白水平為36%～42%時，隨著飼料蛋白水平的增加，芙蓉鯉鯽幼魚增重率和飼料效率下降，飼料系數(shù)上升。當(dāng)飼料蛋白水平為36%時，芙蓉鯉鯽幼魚有最高的增重率，最低的飼料系數(shù)。

2.2 飼料蛋白水平對芙蓉鯉鯽幼魚腸道、腸道內(nèi)容物和肝臟消化酶的影響

飼料蛋白水平對芙蓉鯉鯽幼魚腸道、腸道內(nèi)容物和肝臟中蛋白酶活性的影響見表3。由表3可知，隨著飼料蛋白水平由27%增加到33%，芙蓉鯉鯽幼魚前腸組織和內(nèi)容物的蛋白酶活性也隨之升高；當(dāng)飼料蛋白含量達(dá)36%時，前腸組織和內(nèi)容物蛋白酶活力均顯著升高（P<0.05），并達(dá)到最大值，分別為399.78 U/g和1 194.82 U/g。隨著飼料蛋白水平提高，前腸內(nèi)容物蛋白酶活力穩(wěn)定在較高水平上，而前腸組織蛋白酶活力則呈下降趨勢。各試驗(yàn)組肝臟蛋白酶活性無顯著差異（P>0.05）。

由表4可知，各試驗(yàn)組前腸、腸道內(nèi)容物和肝臟中淀粉酶活性無顯著變化（P>0.05）。前腸淀粉酶活性隨著飼料蛋白水平的增加而呈現(xiàn)升高趨勢，但差異不顯著（P>0.05）；腸道內(nèi)容物淀粉酶活性隨著飼料蛋白水平的增加而呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，但差異不顯著（P>0.05）。

2.3 飼料蛋白水平對芙蓉鯉鯽幼魚肝臟GOT、GPT活性的影響

飼料蛋白水平對芙蓉鯉鯽幼魚肝臟GOT和GPT活性的影響見表5。在肝臟GOT活性方面，隨著飼料蛋白水平由27%增加到36%，肝臟中GOT活性隨之增加，且當(dāng)飼料蛋白水平達(dá)36%后，GOT活性顯著升高（P<0.05），達(dá)到最大值為224.23 U/mg，之后GOT活性保持基本一致。而GPT活性隨著飼料中蛋白水平的增加呈先升高后降低的趨勢，在飼料蛋白水平達(dá)33%時GPT活性達(dá)到最大值171.11 U/mg，差異顯著（P<0.05）。

3 討論

3.1 不同飼料蛋白水平對芙蓉鯉鯽幼魚生長效果的影響

研究表明，魚類生長與飼料蛋白水平之間的關(guān)系符合二次曲線模型，即低飼料蛋白水平時，魚類生長隨飼料蛋白水平的上升而加快，但是超過魚類的最適需求量后則隨著飼料蛋白水平的增加而降低[6]。本研究中，當(dāng)飼料中粗蛋白為36%時芙蓉鯉鯽幼魚生長最快，飼料蛋白水平的不足限制了魚類快速生長，但當(dāng)?shù)鞍姿匠^魚類所需時，蛋白過高增加代謝負(fù)擔(dān)，因而生長性能往往表現(xiàn)出一定程度下降，在幼魚中表現(xiàn)更為明顯。這一研究結(jié)果與中華倒刺鲃[7]和洞庭青鯽[8]等雜食性鯉科魚類的報道基本一致。雖然同是雜食性魚類，但對蛋白質(zhì)的最佳需要量也有很大差異，這種差異主要是由于魚類的種類、年齡、規(guī)格大小、水質(zhì)條件、配制飼料原料的質(zhì)量等不同而引起[9]。

隨著飼料蛋白含量的增加，餌料系數(shù)下降，當(dāng)?shù)鞍姿竭_(dá)到魚體生長最佳蛋白質(zhì)需要量后，餌料系數(shù)開始上升。這一結(jié)論與楊品紅等[8]對洞庭青鯽的研究結(jié)論大體一致。但邵慶均等[9]對寶石鱸的研究報道表明，餌料系數(shù)隨著飼料粗蛋白含量的上升而不斷下降，但組間差異不顯著。

3.2 不同飼料蛋白水平對芙蓉鯉鯽幼魚腸道消化酶活性的影響

魚類攝食后，飼料的營養(yǎng)成分構(gòu)成消化酶的作用底物，會影響到消化酶的分泌和活力。對黑鯛[10]、草魚[11]和黃鱔[12]等的研究表明，飼料蛋白質(zhì)水平會對魚類腸道蛋白消化酶活性產(chǎn)生重要影響，通常在一定范圍內(nèi)，蛋白酶活性與飼料蛋白質(zhì)含量呈正相關(guān)，說明飼料中的蛋白質(zhì)可以誘導(dǎo)魚體內(nèi)蛋白酶的分泌[13]。以紅魚粉為飼料蛋白源，配制成蛋白含量在31.04%～50.33% 5種梯度含量的飼料投喂翹嘴紅鲌，腸道蛋白酶活性隨著飼料蛋白水平提高而顯著增加（P<0.05）[14]；飼料中蛋白水平由40%升高到46%時，牙鲆腸道蛋白酶活性顯著增加，之后隨飼料蛋白水平上升保持基本穩(wěn)定[15]。邵慶均等[16]報道寶石鱸胃蛋白酶和腸蛋白酶活性隨飼料中蛋白水平的增加而增加。本研究中，隨飼料中蛋白水平由27%增加到33%，芙蓉鯉鯽幼魚腸道消化酶活性升高，當(dāng)飼料蛋白水平高于36%時，隨著飼料蛋白水平的增加，腸道消化酶活性略有下降，腸道內(nèi)容物淀粉的活性穩(wěn)定在較高水平，與上述報道基本一致。隨著飼料蛋白水平在適當(dāng)范圍內(nèi)的增加，魚體腸道蛋白酶活性增加，提高對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，從而改善生長性能。而過高的飼料蛋白水平增加了腸道的消化負(fù)擔(dān)，可能會對消化酶的分泌產(chǎn)生負(fù)反饋調(diào)節(jié)，這與蛋白質(zhì)過剩的程度和魚種類有關(guān)。本研究中，飼料中蛋白水平的增加對芙蓉鯉鯽幼魚腸道、腸道內(nèi)容物和肝臟淀粉酶活性無顯著影響，但都保持較高的淀粉酶活性。邵慶均等[16]研究表明飼料不同蛋白水平對胃和腸道中淀粉酶活性影響差異不顯著，本試驗(yàn)結(jié)果與此報道基本一致。

3.3 不同飼料蛋白水平對芙蓉鯉鯽幼魚肝臟GOT和GPT活性的影響

肝臟是鯽魚營養(yǎng)物質(zhì)消化的主要腺體，也是氨基酸代謝的主要場所，肝細(xì)胞含有豐富的參與氨基酸代謝的酶類，能催化氨基酸的轉(zhuǎn)氨基、脫氨基、脫羧基以及個別氨基酸特異的代謝過程，合成一些非必需氨基酸和含氮化合物。在肝細(xì)胞轉(zhuǎn)氨酶中，以GPT和GOT活性最強(qiáng)，分布最廣，在動物機(jī)體蛋白質(zhì)代謝中起重要作用[17]。在本研究中，GOT和GPT活性在一定蛋白水平范圍內(nèi)隨著蛋白水平的增加呈上升的趨勢，該結(jié)果與王蕾蕾[18]的研究一致。這表明隨著飼料蛋白水平在適當(dāng)范圍內(nèi)的增加，肝臟GOT和GPT活性隨之增加，促進(jìn)了氨基酸的代謝，提高了機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)和氨基酸利用率。

4 結(jié)論

飼料蛋白水平在36%左右時，芙蓉鯉鯽幼魚表現(xiàn)出最佳的增重率，并保持最低的飼料系數(shù)。隨著飼料蛋白水平的上升，腸道組織蛋白酶和腸道食糜蛋白酶的活性增加，芙蓉鯉鯽幼魚對飼料蛋白水平的增加具有比較好的適應(yīng)性；飼料蛋白水平對腸道、食糜和肝臟中的淀粉酶均無顯著影響，芙蓉鯉鯽幼魚的腸道和食糜均具有比較高的淀粉酶活性。

參考文獻(xiàn)：

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[18] 王蕾蕾. 黑鯛幼魚適宜蛋白需要量的研究[D].杭州：浙江大學(xué)，2007.

3.3 不同飼料蛋白水平對芙蓉鯉鯽幼魚肝臟GOT和GPT活性的影響

肝臟是鯽魚營養(yǎng)物質(zhì)消化的主要腺體，也是氨基酸代謝的主要場所，肝細(xì)胞含有豐富的參與氨基酸代謝的酶類，能催化氨基酸的轉(zhuǎn)氨基、脫氨基、脫羧基以及個別氨基酸特異的代謝過程，合成一些非必需氨基酸和含氮化合物。在肝細(xì)胞轉(zhuǎn)氨酶中，以GPT和GOT活性最強(qiáng)，分布最廣，在動物機(jī)體蛋白質(zhì)代謝中起重要作用[17]。在本研究中，GOT和GPT活性在一定蛋白水平范圍內(nèi)隨著蛋白水平的增加呈上升的趨勢，該結(jié)果與王蕾蕾[18]的研究一致。這表明隨著飼料蛋白水平在適當(dāng)范圍內(nèi)的增加，肝臟GOT和GPT活性隨之增加，促進(jìn)了氨基酸的代謝，提高了機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)和氨基酸利用率。

4 結(jié)論

飼料蛋白水平在36%左右時，芙蓉鯉鯽幼魚表現(xiàn)出最佳的增重率，并保持最低的飼料系數(shù)。隨著飼料蛋白水平的上升，腸道組織蛋白酶和腸道食糜蛋白酶的活性增加，芙蓉鯉鯽幼魚對飼料蛋白水平的增加具有比較好的適應(yīng)性；飼料蛋白水平對腸道、食糜和肝臟中的淀粉酶均無顯著影響，芙蓉鯉鯽幼魚的腸道和食糜均具有比較高的淀粉酶活性。

參考文獻(xiàn)：

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[18] 王蕾蕾. 黑鯛幼魚適宜蛋白需要量的研究[D].杭州：浙江大學(xué)，2007.

3.3 不同飼料蛋白水平對芙蓉鯉鯽幼魚肝臟GOT和GPT活性的影響

肝臟是鯽魚營養(yǎng)物質(zhì)消化的主要腺體，也是氨基酸代謝的主要場所，肝細(xì)胞含有豐富的參與氨基酸代謝的酶類，能催化氨基酸的轉(zhuǎn)氨基、脫氨基、脫羧基以及個別氨基酸特異的代謝過程，合成一些非必需氨基酸和含氮化合物。在肝細(xì)胞轉(zhuǎn)氨酶中，以GPT和GOT活性最強(qiáng)，分布最廣，在動物機(jī)體蛋白質(zhì)代謝中起重要作用[17]。在本研究中，GOT和GPT活性在一定蛋白水平范圍內(nèi)隨著蛋白水平的增加呈上升的趨勢，該結(jié)果與王蕾蕾[18]的研究一致。這表明隨著飼料蛋白水平在適當(dāng)范圍內(nèi)的增加，肝臟GOT和GPT活性隨之增加，促進(jìn)了氨基酸的代謝，提高了機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)和氨基酸利用率。

4 結(jié)論

飼料蛋白水平在36%左右時，芙蓉鯉鯽幼魚表現(xiàn)出最佳的增重率，并保持最低的飼料系數(shù)。隨著飼料蛋白水平的上升，腸道組織蛋白酶和腸道食糜蛋白酶的活性增加，芙蓉鯉鯽幼魚對飼料蛋白水平的增加具有比較好的適應(yīng)性；飼料蛋白水平對腸道、食糜和肝臟中的淀粉酶均無顯著影響，芙蓉鯉鯽幼魚的腸道和食糜均具有比較高的淀粉酶活性。

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