王嘉，曲秀娟，張敬東，溫倜，羅穎，劉云鵬

（中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，沈陽110001）

·論著·

腸癌患者外周血T淋巴細胞亞群數(shù)量及臨床意義

王嘉，曲秀娟，張敬東，溫倜，羅穎，劉云鵬

（中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，沈陽110001）

目的檢測結(jié)直腸癌患者外周血淋巴細胞各亞群絕對值及比率以評估腸癌患者的免疫狀態(tài)，并進一步分析其與腸癌患者臨床特征的關系。方法收集167例腫瘤內(nèi)科初次就診的腸癌患者外周血，其中112例為根治術(shù)后患者，44例為晚期一線腸癌患者。同時收集166例體檢中心健康人群的外周血，應用流式細胞術(shù)進行淋巴細胞亞群的檢測。應用t檢驗及χ2檢驗進行統(tǒng)計分析。結(jié)果腸癌患者外周血CD4+T細胞絕對值較正常人顯著下降；晚期腸癌患者CD4+T及CD8+T細胞絕對值較正常人顯著下降，且相對根治術(shù)后患者，CD8+T細胞有下降趨勢。此外，＜49歲的晚期患者CD4+T細胞下降更明顯。結(jié)論術(shù)后和晚期結(jié)直腸癌患者均存在免疫功能下降，為進一步了解腸癌患者的免疫狀態(tài)和免疫治療提供依據(jù)。

腸癌；T細胞亞群；臨床意義

免疫系統(tǒng)具有重要的抗腫瘤作用，而免疫抑制可促進腫瘤發(fā)生、發(fā)展。機體抗腫瘤作用以T淋巴細胞介導的細胞免疫為主。T淋巴細胞主要包括CD3+CD4+和CD3+CD8+T細胞?？鼓[瘤作用的實現(xiàn)依賴于這些細胞功能的正常發(fā)揮［1，2］。目前，對人外周血淋巴細胞的檢測已經(jīng)用于衡量腫瘤患者的免疫狀態(tài)，既往報道顯示惡性腫瘤患者機體免疫狀態(tài)常表現(xiàn)為CD3+T細胞、CD4+T細胞下降，CD4+/CD8+比值下降或倒置［3～4］。但各亞群在腸癌患者中的表達規(guī)律仍無統(tǒng)一的結(jié)論。因此，本研究擬以健康人群為對照，探討術(shù)后、晚期腸癌患者T淋巴細胞亞群的數(shù)量及其與臨床特征之間的關系，本研究結(jié)果將為臨床治療及腸癌免疫研究提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

納入2012年3月1日至2013年9月1日中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院腫瘤內(nèi)科初次就診的167例結(jié)直腸癌患者（均經(jīng)術(shù)后或腸鏡病理確診）。其中男84例，女82例。年齡21～80歲，中位年齡49歲。112例患者均為根治術(shù)后1～3個月入我科；44例為晚期一線結(jié)直腸癌患者，其中未手術(shù)19例，術(shù)后進展12例，姑息術(shù)后24例。健康對照組為166名在中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院體檢中心進行體檢的健康人群，體檢結(jié)果均提示為健康者，無慢性肝腎疾病，無風濕科疾病等。

1.2 檢測方法

抽取167例結(jié)直腸癌患者及166名健康者外周血，應用流式細胞儀技術(shù)，測定外周血液中CD4+T細胞，CD8+T細胞及CD4+/CD8+，CD3+T細胞絕對值及比率等。體力評分按照卡式（KPS）評分法。

1.3 統(tǒng)計學分析

2 結(jié)果

2.1 結(jié)直腸癌患者外周血T細胞亞群與健康人群對照比較

術(shù)后結(jié)直腸癌患者外周血CD3+T細胞和CD4+T細胞分別為1 168.66±306.34/μL和683.02±247.61/μ L，顯著低于健康對照組1 476.94±467.27/μL和800.48±279.39/μL，CD8+T細胞也有降低的趨勢；晚期腸癌患者外周血CD3+T細胞為1 144.22±418.17/μ L，CD4+T細胞為668.64±246.27/μL，CD8+T細胞為463.02±266.68/μL，均顯著低于健康對照組1 476.94± 467.27/μL，800.48±279.39/μL，607.20±273.32/μL。CD4+/CD8+比值無顯著性差異。上述結(jié)果提示腸癌患者存在普遍的免疫能力降低，見表1。

表1 腸癌患者與健康對照人群中T細胞亞群值的對比Tab.1 T cell subgroup value in colorectal cancer patients and healthy controls

2.2 術(shù)后結(jié)直腸癌患者外周血淋巴細胞亞群與晚期結(jié)直腸癌患者對比

無論術(shù)后還是晚期的患者都存在T細胞免疫狀態(tài)的顯著下降，但是兩者之間是否有差異尚不清楚。我們對術(shù)后和晚期患者的T細胞亞群數(shù)值情況也進行了比較分析，結(jié)果顯示，CD4+T細胞為684.24±247.91/μL對比690.24±236.94/μL，無顯著性差異。CD8+T細胞為448.42±306.26/μL對比466.47± 264.13/μL，晚期患者有下降趨勢。CD4+/CD8+分別為1.49±0.74對比1.77±0.86，晚期腸癌患者顯著升高，差別有統(tǒng)計學意義。上述結(jié)果提示晚期腸癌患者的免疫狀態(tài)進一步降低，見表2。

表2 晚期結(jié)直腸癌與術(shù)后結(jié)直腸癌患者外周血淋巴細胞亞群對比Tab.2 T cell subgroup value in postoperative colorectal cancer patients and advanced colorectal cancer patients

2.3 術(shù)后結(jié)直腸癌患者外周血淋巴細胞亞群與其自身臨床特征的關系

術(shù)后腸癌患者中，按照性別、體力評分、年齡、分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況分別進行分組，比較外周血T淋巴細胞亞群數(shù)值的差異。結(jié)果提示T淋巴細胞亞群中CD4+T細胞，CD8+T細胞，CD4+/CD8+及CD3+T細胞數(shù)值與上述臨床特征無顯著性相關，見表3。

2.4 晚期結(jié)直腸癌患者外周血淋巴細胞亞群與其自身臨床特征的關系

晚期腸癌患者中，按照性別、體力評分、年齡、是否做過手術(shù)及是否肝轉(zhuǎn)移等情況分別進行分組，其中CD4+T細胞按照年齡進行分組，＜49歲組為494.12±204.46/μL，49歲以上組為749.28±274.60/μL，49歲以下組顯著降低；CD8+T細胞按照是否經(jīng)歷過手術(shù)進行分組，分別為378.79±169.76/μL對比412.74±294.01/μL，在未經(jīng)歷過手術(shù)患者中顯著降低，見表4。

表3 術(shù)后結(jié)直腸癌臨床特征與T淋巴細胞亞群數(shù)量的關系Tab.3 Relationship between the clinical features of postoperative colorectal cancer and T cell subgroup value

表4 晚期結(jié)直腸癌臨床特征與T淋巴細胞亞群數(shù)量的關系Tab.4 Relationship between the clinical features of advanced colorectal cancer and T cell subgroup value

3 討論

在機體抗腫瘤免疫效應中，細胞免疫起著重要的作用。而細胞免疫又以T淋巴細胞亞群起主導作用。檢測外周血T淋巴細胞亞群目前是觀察免疫水平的重要方法之一。T淋巴細胞亞群中CD4+T細胞及CD8+T細胞在抗腫瘤效應中起作用［4～6］。

CD3+T細胞的數(shù)量代表了機體總的細胞免疫狀態(tài)，CD4+T細胞為輔助性T細胞，輔助機體完成抗腫瘤免疫，CD8+T細胞既往認為是抑制性T細胞，而目前普遍認為是細胞毒性T細胞。CD4+/CD8+比值保持動態(tài)平衡，以維持機體細胞的免疫功能穩(wěn)定。既往報道各種惡性腫瘤外周血CD4+T細胞計數(shù)在各種惡性腫瘤中下降，CD8+T細胞與健康對照組無顯著差異或者較健康對照組升高。本研究也證實術(shù)后結(jié)直腸癌患者外周血中CD4+T、CD3+T細胞較健康對照組顯著下降，CD8+T細胞無顯著變化。主要原因可能是許多類型的腫瘤都能產(chǎn)生轉(zhuǎn)化生長因子2β（TGF2β）在體外能強烈抑制CD4+T細胞應答和活性細胞毒性T細胞的產(chǎn)生［7］。CD4+T細胞的減少符合腫瘤的免疫逃避機制，腫瘤細胞通過Fas/Fas L途徑改變宿主的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫抑制［8］。既往多數(shù)報道CD8+T細胞在惡性腫瘤中無明顯變化或者升高，而本研究中晚期結(jié)直腸癌患者外周血CD4+T及CD8+T細胞均較健康對照組顯著下降。且對比早期患者CD4+/CD8+數(shù)值顯著升高，提示CD8+T細胞在晚期患者中有進一步下降趨勢，需要進一步通過擴大樣本量得到證實。CD8+T細胞顯著下降原因可能在于多項研究證實腫瘤組織中CD8+T細胞的浸潤參與了控制腫瘤生長及轉(zhuǎn)移的作用［9］，晚期肝轉(zhuǎn)移腸癌組織中CD8+T細胞的浸潤明顯減少，晚期的腸癌患者外周血有較低的CD8+T細胞比率［10，11］。因此，本研究表明結(jié)直腸癌患者機體的細胞免疫功能較健康對照明顯降低，晚期腸癌患者的細胞免疫紊亂進一步加重。提示消化道腫瘤患者在進行化療時，殺傷腫瘤細胞與保護機體免疫功能具有同等重要意義。

本研究中納入根治術(shù)后1～2個月的腸癌患者112例，研究其外周血CD4+T、CD8+T、CD4+/CD8+及CD3+T數(shù)值與分期、性別、年齡、體力評分及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等無顯著相關。納入55例晚期一線結(jié)直腸癌患者，其外周血中CD4+T細胞在59歲以下患者中顯著降低，2組中男女比例，是否手術(shù)，體力評分等因素分布均衡。既往有動物實驗報道年齡與T淋巴細胞數(shù)值相關，CD4+T細胞在年長小鼠中升高［12］。而本研究結(jié)果中CD4在年輕患者中顯著下降，不除外本身年齡差別起作用，也可能提示晚期腸癌中年齡小于59歲患者免疫功能抑制更為強烈。以往相關報道較少。同時如前所述，晚期腸癌患者CD4+T細胞及CD8+T細胞均較健康對照顯著下降，晚期患者中未手術(shù)者CD8+T細胞顯著降低。提示晚期腸癌患者的免疫失調(diào)進一步加重。

本研究證實了術(shù)后和晚期結(jié)直腸癌患者外周血CD4+T細胞均顯著下降，而晚期結(jié)直腸癌患者更伴有CD8+T細胞的顯著下降。本研究結(jié)果為進一步了解腸癌患者的免疫狀態(tài)提供數(shù)據(jù)，也為結(jié)直腸癌患者的輔助免疫治療提供進一步的科學依據(jù)。

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（編輯 裘孝琦）

The Peripheral Blood Lymphocyte Subsetsin Colorectal Cancer Patients and Its Clinical Significance

WANGJia，QU Xiu-juan，ZHANGJing-dong，WENTi，LUOYing，LIUYun-peng
（Department of Internal Oncology，The First Hospital，China Medical University，Shenyang 110001，China）

ObjectiveTo evaluate the immune status of colorectal cancerpatients through detecting the absolute value of lymphocyte subsets in the peripheral blood，and further analysis the relationship between the immune status variation and the patients’clinical features.MethodsPeripheral blood of167 patients thatbeing treated in the FirstAffiliated HospitalofChina MedicalUniversity were collected，including 112 cases with postoperative bowelcancerand 44 cases offirstline advanced bowelcancer.A totalof167 healthy individuals admitted to medicalcenters were also recruited as control.Flow cytometry was used to detectthe lymphocyte subgroups.ResultsCD4+T in the peripheralblood ofcolorectalcancerpatientswassignificantly decreased comparing with the normalcontrols.CD4+T and CD8+Tin the peripheralblood ofadvanced colorectalcancerpatients were significantly decreased compared with the normal controls.There was no significantly difference of the absolute value of CD4+T cells between advanced colorectal cancer patients and postoperative cancer patients.CD8+T cells have a downward trend.In addition，those advanced colorectal cancer patients with age less than 49 patients showed more obvious decreased CD4+T cells.ConclusionThere are drawbacks of immune function in colorectalcancerpatients，which can be applied as supporting data forauxiliary immunotherapy.

colorectal cancer；lymphocyte subsets；clinical significance

R73

A

0248-4646（2014）04-0289-04

國家自然科學基金（31300743）

王嘉（1984-），女，醫(yī)師，本科.

劉云鵬，E-mail：cmuliuyunpeng@hotmail.com

2014-01-14

網(wǎng)絡出版時間：