宋飛，趙嘉林

丁酰膽堿酯酶U/K多態(tài)性在中國人群中晚發(fā)型阿爾茨海默病中的研究

宋飛，趙嘉林

目的探討丁酰膽堿酯酶多態(tài)（BCHE U/K）與APOE 4在晚發(fā)型阿爾茨海默病（LOAD）發(fā)病風(fēng)險中的作用。方法在443例中國人群樣本中探討B(tài)CHE和APOE這兩個基因的多態(tài)性及與LOAD發(fā)病的關(guān)系。結(jié)果根據(jù)APOE 4分層后，在不攜帶APOE 4者中具有BCHEU/K基因型和K等位基因與LOAD發(fā)病風(fēng)險相關(guān)。結(jié)論BCHE基因U/K多態(tài)性在中國LOAD人群中是一個可能的APOE 4依賴性風(fēng)險因子。

阿爾茨海默病；丁酰膽堿酯酶；載脂蛋白E類；基因分型；多態(tài)性

阿爾茨海默?。ˋD）是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，分早發(fā)型和晚發(fā)型兩種，晚發(fā)型AD（LOAD）的發(fā)病機制與關(guān)聯(lián)基因均不明確。丁酰膽堿酯酶（BCHE）是一種乙酰膽堿水解酶，參與形成淀粉樣蛋白[1]。有研究表明，載脂蛋白E（APOE）4

等位基因已被確定為LOAD風(fēng)險基因，但它并非引發(fā)AD的充要條件[2]。為了研究中國人群中BCHE U/K多態(tài)是否與LOAD相關(guān)，與APOE 4相互作用是否會對LOAD的發(fā)生產(chǎn)生可能的增效作用，本研究對BCHE和APOE兩個基因多態(tài)性的基因分型進行分析，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2006年1月至2009年12月四家醫(yī)院（北京醫(yī)院、北京老年醫(yī)院、北京友誼醫(yī)院、寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院）收治的LOAD患者443例，分為試驗組和對照組。試驗組253例，其中男117例，女136例；年齡65～97歲，平均（77.1±6.40）歲。對照組190例，其中男98例，女92例；年齡65～93歲，平均（74.4±6.23）歲。兩組一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義（＞0.05）。

1.2 基因分型標(biāo)準(zhǔn)法提取外周血白細(xì)胞基因組DNA，20l PCR體系使用BCHE引物，F(xiàn)：5’-ACA GGA AAT ATT GAT GAA GCA GAA-3’；R：5’-TGG TGT ACA GTG TTT CAA TAT TTA A-3’；反應(yīng)程序為94℃，5min，40循環(huán)（94℃30s，53℃40s，72℃30s）72℃，10min。APOE與BCHEPCR產(chǎn)物分型參考文獻(xiàn)[3]。

1.3 統(tǒng)計方法使用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行分析，確定LOAD試驗組與對照組的基因型和等位基因頻率，BCHE基因U/K多態(tài)與AD的相關(guān)性通過2檢驗計算值。用邏輯回歸分析檢驗APOE和BCHE多態(tài)互作對AD風(fēng)險的影響。＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

3 討論

近年來，越來越多的關(guān)于BCHE生物功能和遺傳研究的證據(jù)提示該基因可能跟AD的發(fā)病有關(guān)。BCHE基因中包括不同單核苷酸多態(tài)性（SNP），如最常見的U/K多態(tài)是一個位于1 615位（GCA改變?yōu)锳CA）的單核苷酸多態(tài)性，導(dǎo)致539位丙氨酸到蘇氨酸的改變，這個SNP會導(dǎo)致血漿中BCHE濃度減少30%。到目前為止，BCHEU/K多態(tài)和AD的關(guān)聯(lián)性已經(jīng)在不同的人群中（包括歐洲高加索，美洲高加索，東亞等地）進行了10余次研究，但結(jié)果之間相互矛盾。BCHEU/K多態(tài)LOAD的關(guān)聯(lián)分析之前在中國一個小規(guī)模人群樣本中（38例試驗和40例對照）進行過一次[4]，但與本研究結(jié)論不同，由于小樣本所導(dǎo)致的假陰性結(jié)果可能是這種不同結(jié)論產(chǎn)生的原因。目前關(guān)于BCHEU/K多態(tài)與LOAD發(fā)病的關(guān)系仍然沒有明確的結(jié)論。

本研究表明，BCHE基因中U/K多態(tài)性可能是中國人群中LOAD的一個風(fēng)險基因。BCHE基因型和等位基因頻率在試驗組與對照組中差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均＜0.05），表明這個基因多態(tài)性很可能同中國人群中的LOAD相關(guān)聯(lián)。本研究還發(fā)現(xiàn)，BCHE基因K等位基因和APOE 4等位基因的相互作用對LOAD的風(fēng)險有關(guān)（=0.002）。根據(jù)有無攜帶APOE 4等位基因分組，同K等位基因相關(guān)導(dǎo)致風(fēng)險顯著性增加的只存在于APOE 4非攜帶者中。這種結(jié)果表明，在中國LOAD人群中，BCHE基因的U/K多態(tài)性是一個APOE 4依賴性風(fēng)險因素。

表1 BCHE U/K多態(tài)在LOAD試驗組與對照組中的基因型與等位基因頻率例（%）

表2 BCHE U/K多態(tài)在APOE 4攜帶與非攜帶者中的基因型與等位基因頻率分布例(%)

致謝：感謝國家人口計生委科研所王晶、周思睿、王彬彬等提供實驗幫助。

[1] Ne e ?oku ra A. Butyrylcholinesterase:Structure and Physiological Importance[J].Turkish Journal of Biochemistry,2003,28(2):54-61.

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[4] Bi S, Zhang Y, Wu J, et al. Associationbetween low-density lipoprotein receptorrelatedprotein gene, butyrylcholinesterasegene and Alzheimer' s disease in Chinese[J].Chin Med Sci J,2001,16(2):71-75.

10.3969/j.issn.1671-0800.2014.04.013

R741

A

1671-0800(2014)04-0397-02

2014-02-10

（本文編輯：孫海兒）

315040寧波，寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院

宋飛，Email:iamsongfei@ 163.com