蔣朱秀，江勁，李敏靜，陳利芳

卡介苗多糖核酸穴位注射對(duì)支氣管哮喘患者T細(xì)胞亞群及哮喘控制測(cè)試評(píng)分的影響

蔣朱秀，江勁，李敏靜，陳利芳

目的評(píng)價(jià)卡介苗多糖核酸穴位注射對(duì)支氣管哮喘患者T細(xì)胞亞群及哮喘控制測(cè)試評(píng)分的影響。方法將40例支氣管哮喘患者分為觀察組和對(duì)照組，各20例，觀察組以卡介苗多糖核酸穴位注射，取雙側(cè)足三里和定喘穴，每穴注射0.5 ml；對(duì)照組行肌肉注射，每次2 ml，兩組均隔天治療1次，14次為1個(gè)療程，連續(xù)治療3個(gè)療程。于治療前后對(duì)患者行哮喘控制測(cè)試問(wèn)卷（ACT）評(píng)分以及T細(xì)胞亞群檢測(cè)。結(jié)果兩組治療后ACT評(píng)分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05）；治療后觀察組患者的CD4+下降、CD8+升高，與對(duì)照組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均＜0.05），CD4+CD8+比值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05）。結(jié)論夏季卡介苗多糖核酸穴位注射足三里、定喘穴治療支氣管哮喘，可以有效提高哮喘患者的ACT評(píng)分，改善機(jī)體免疫功能，從而有效減少冬季哮喘的發(fā)作。

卡介苗多糖核酸；穴位注射；支氣管哮喘；T細(xì)胞亞群；哮喘控制測(cè)試問(wèn)卷

支氣管哮喘是一種與T淋巴細(xì)胞功能失調(diào)有關(guān)的氣道慢性炎癥性疾病。哮喘肺組織中T淋巴細(xì)胞呈活化狀態(tài)，且與氣道高反應(yīng)有關(guān)。T淋巴細(xì)胞是啟動(dòng)、維持和擴(kuò)大氣道炎癥的直接因素，并參與哮喘急性發(fā)作時(shí)的主要病理生理變化。CD4+T細(xì)胞根據(jù)其分泌的細(xì)胞因子可分為T(mén)hl和Th2兩個(gè)功能亞群，目前研究認(rèn)為T(mén)hl/Th2型淋巴細(xì)胞數(shù)量及功能失衡與支氣管哮喘發(fā)病密切相關(guān)[1]?？ń槊缍嗵呛怂幔˙CG-PSN）作為非特異性免疫調(diào)節(jié)劑，采用肌肉注射來(lái)防治支氣管哮喘已在臨床應(yīng)用多年。筆者在夏季采用BCG-PSN穴位注射治療支氣管哮喘患者，觀察其對(duì)患者免疫功能及冬春季發(fā)病情況的影響?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)支氣管哮喘診斷及分期標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)[2]；病情處于非急性發(fā)作期，年齡14～70歲，自愿加入本研究并簽署知情同意書(shū)。排除合并嚴(yán)重心、肝、腎相關(guān)的內(nèi)科疾病或嚴(yán)重免疫相關(guān)性疾病；精神障礙、嚴(yán)重皮膚病和凝血功能異常者。

1.2 一般資料收集2013年7—9月浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院、浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第三醫(yī)院呼吸科與針灸科門(mén)診的支氣管哮喘患者40例，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對(duì)照組，各20例。觀察組男8例，女12例；年齡15～70歲，平均（50.3±16.1）歲；病程3～25年，平均（11.7±9.9）年。對(duì)照組男10例，女10例；年齡16～68歲，平均（53.6±11.7）歲；病程4～23年，平均（9.55±6.69）年。兩組患者一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05）。

1.3 方法所有患者在哮喘肺急性發(fā)作期給予布地奈德福莫特羅（阿斯利康公司生產(chǎn)）160/4.5 g，2次/d，每次1吸，作為基礎(chǔ)用藥，一旦有急性加重，必要時(shí)允許患者使用2受體激動(dòng)劑（沙丁胺醇?xì)忪F劑，每噴100 g，2噴/次，3次/d或4次/d）緩解癥狀，也可以根據(jù)醫(yī)囑選擇藥物，記錄所用藥物名稱(chēng)，用法，服用時(shí)間。若患者癥狀仍不能緩解需入院治療者，長(zhǎng)期使用糖皮質(zhì)激素進(jìn)行治療者與入院治療可能影響結(jié)果者，將該病例剔除。

觀察組穴位注射雙側(cè)足三里穴和定喘穴，腧穴定位標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)[3]。具體操作方法：患者坐位，先準(zhǔn)確定位，并在雙側(cè)足三里和定喘穴處進(jìn)行常規(guī)消毒，一次性注射器抽取BCG-PSN注射液2 ml（浙江萬(wàn)馬藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，規(guī)格：0.35mg/支，國(guó)藥準(zhǔn)字S33020001），分別在上述穴位進(jìn)行穴位注射，每穴0.5ml，操作時(shí)快速刺入皮下，行捻轉(zhuǎn)提插手法促使患者得氣，進(jìn)針深度根據(jù)患者體型胖瘦在5～10 mm，患者產(chǎn)生酸脹感后緩慢推注藥液0.5 ml。隔天治療1次，14次為1個(gè)療程，共3個(gè)療程。

對(duì)照組一次性注射器抽取BCG-PSN注射液2ml，進(jìn)行常規(guī)肌肉注射。隔天治療1次，14次為1個(gè)療程，共3個(gè)療程。

1.4 觀察指標(biāo)哮喘控制測(cè)試問(wèn)卷（ACT）評(píng)分參照文獻(xiàn)[4]進(jìn)行，治療前及在接受治療的當(dāng)年12月份對(duì)兩組患者進(jìn)行ACT評(píng)分。T細(xì)胞亞群的測(cè)定：清晨空腹抽取2ml靜脈血抗凝，分離血清，置－20℃冰箱保存待測(cè)，采用全血直標(biāo)法流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)T細(xì)胞亞群，分析CD4+、CD8+細(xì)胞百分率，并計(jì)算CD4+/ CD8+值。試劑盒購(gòu)自蘇州卡爾文生物科技有限公司。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，采用2檢驗(yàn)。＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后ACT評(píng)分比較

2.2 兩組患者治療前后外周血T細(xì)胞亞群比較治療前觀察組和對(duì)照組CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比值差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（≤0.606，＞0.05）；治療后兩組患者均出現(xiàn)CD4+下降、CD8+升高及CD4+/CD8+比值下降，與治療前比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（≥3.151，＜0.05），治療后觀察組患者的CD4+下降、CD8+升高，與對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（=2.311、2.641，＜0.05），CD4+CD8+比值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（=3.423，＜0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 不良反應(yīng)試驗(yàn)過(guò)程中觀察組和對(duì)照組各1例在BCG-PSN局部注射處存在輕微發(fā)紅、腫脹，但均在24 h內(nèi)消退；局部注射后有時(shí)會(huì)有少量出血，經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間按壓后可以止血；未見(jiàn)暈針患者；部分患者自覺(jué)注射過(guò)程中有疼痛感，但可以忍受；無(wú)嚴(yán)重不良反應(yīng)發(fā)生。

3 討論

外周血中T細(xì)胞亞群及比值是反映機(jī)體免疫調(diào)節(jié)平衡狀況的重要指標(biāo)，也是疾病嚴(yán)重程度和預(yù)后的重要標(biāo)志之一[5]。T細(xì)胞在機(jī)體細(xì)胞免疫應(yīng)答中起重要調(diào)節(jié)作用，依據(jù)表型和功能特性分為不同的類(lèi)型及亞群，各亞群淋巴細(xì)胞的表型、生物學(xué)特征及其在免疫應(yīng)答中所起的作用各不相同。CD4+T細(xì)胞具有輔助T、B淋巴細(xì)胞發(fā)生應(yīng)答的功能；CD8+T細(xì)胞對(duì)非已抗原誘發(fā)的免疫應(yīng)答具有抑制作用。T淋巴細(xì)胞亞群紊亂，輔助T細(xì)胞（CD4+）水平明顯降低，抑制T細(xì)胞（CD8+）水平明顯升高，CD4+/CD8+比值失調(diào)，最終導(dǎo)致IgE升高和氣道高反應(yīng)性而誘導(dǎo)哮喘發(fā)作[6]。另外CD4+/CD8+比值一定程度上可直接了解機(jī)體細(xì)胞免疫功能情況，

所以檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群可以更深刻的了解機(jī)體免疫功能。本研究顯示，經(jīng)卡介苗多糖核酸穴位注射后患者的CD4+下降，CD8+升高，CD4+/CD8+比值下降，且觀察組優(yōu)于對(duì)照組，從而推測(cè)其作用機(jī)制可能通過(guò)免疫調(diào)節(jié)增強(qiáng)哮喘患者Th1細(xì)胞功能，抑制其亢進(jìn)的Th2反應(yīng)，從而一定程度上調(diào)整Thl/Th2細(xì)胞失衡，改善機(jī)體免疫功能，減少哮喘發(fā)作次數(shù)、減輕哮喘發(fā)作程度，控制哮喘的發(fā)生。

表1 兩組患者治療前后ACT評(píng)分比較

表2 兩組治療前后CD4+、CD8+及CD4+CD8+比值的比較

BCG-PSN是卡介苗制劑中的一種，是卡介苗菌體成分提取物。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，BCG-PSN有很強(qiáng)的非特異性免疫刺激作用，能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生TH1類(lèi)型免疫反應(yīng)，表現(xiàn)為促進(jìn)TH細(xì)胞向TH1型細(xì)胞分化，并且活化TH1細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及單核細(xì)胞，顯著增加細(xì)胞因子干擾素-（IFN-）、白細(xì)胞介素12（IL-12）等的分泌，阻斷IgE的合成，促使肺泡灌洗液中IL-4、IL-5等TH2型細(xì)胞因子的水平降低，降低氣道高反應(yīng)[7]。臨床研究也發(fā)現(xiàn)卡介苗制劑能有效調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，對(duì)支氣管哮喘患者采用卡介苗治療，可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生TH1類(lèi)免疫反應(yīng)，從而降低氣道高反應(yīng)[8]。

支氣管哮喘祖國(guó)醫(yī)學(xué)稱(chēng)之為“哮證”、“喘證”。肺為氣之主，腎為氣之根。發(fā)病機(jī)理不外乎肺、脾、腎虛損；脾為生痰之源，肺為貯痰之器；內(nèi)有伏痰，復(fù)感外邪所致。冬病夏治，選擇三伏天刺激穴位易激發(fā)經(jīng)氣，加上選用有增強(qiáng)免疫功能的BCG-PSN穴位注射，在藥物和穴位的雙重刺激下更能發(fā)揮調(diào)節(jié)陰陽(yáng)、補(bǔ)腎納氣、宣肺平喘、健脾化痰的綜合效能。本研究證實(shí)，在夏季開(kāi)展BCG-PSN穴位注射治療支氣管哮喘，可以明顯減少冬季節(jié)的哮喘發(fā)作次數(shù)，提高哮喘控制水平，改善哮喘患者生活質(zhì)量。

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10.3969/j.issn.1671-0800.2014.12.021

R562.2+5

A

1671-0800(2014)12-1499-03

蔡宛如名老中醫(yī)傳承工作室建設(shè)經(jīng)費(fèi)資助項(xiàng)目（GZS2012012）；浙江省中醫(yī)藥管理局適宜技術(shù)項(xiàng)目（2010zs002）

310005 杭州，浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院（蔣朱秀、江勁、李敏靜）；浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第三醫(yī)院（陳利芳)

蔣朱秀，Email：5792673@qq.com