黃偉強　池圣亮

[摘要] 目的 探討乳腺癌組織中Survivin的表達及其與患者病理學特征和預后的關(guān)系。 方法 采用免疫組化S-P法檢測70例女性乳腺疾病蠟塊標本（乳腺良性增生26例和乳腺癌44例）和15例正常女性乳腺組織中Survivin的表達，并探討乳腺癌組織中Survivin的表達與患者年齡、組織學分級、臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等病理學特征和預后的關(guān)系。 結(jié)果 Survivin在正常乳腺、乳腺良性增生及乳腺癌組織中陽性率分別為0（0/15）、26.92%（7/26）和70.45%（31/44），呈逐漸上升趨勢（χ2=27.25，P < 0.01）。乳腺癌組織中Survivin的表達與患者的臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（χ2=6.73、7.74，P < 0.01）。Survivin蛋白陽性表達組的3年生存率明顯低于Survivin蛋白陰性表達組（χ2=5.81，P < 0.05）。 結(jié)論 Survivin表達在乳腺癌發(fā)生和發(fā)展不同階段呈進行性上升趨勢，且Survivin的表達與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預后密切相關(guān)，在乳腺癌細胞的侵襲、發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移等活動中可起促進作用。

[關(guān)鍵詞] 乳腺癌；免疫組化；Survivin；病理學特征

[中圖分類號] R737.9 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）05-080-03

乳腺癌是中老年女性常見的惡性腫瘤之一，近年來，其發(fā)病率和死亡率呈逐漸上升和年輕化的趨勢。乳腺癌的發(fā)病機制尚不完全明確，研究已證實其發(fā)病是一個多基因、多步驟和多階段的病理演進過程，其中癌基因的激活和抑癌基因的失活是其中主要的病理機制[1]。Survivin是凋亡抑制蛋白（IAP）家族的新成員，是迄今已知作用最強的細胞凋亡抑制蛋白[2]。Survivin主要表達于人和鼠的胚胎發(fā)育組織中及多數(shù)人類癌組織中，在正常人體組織中不表達或表達較弱[3]。近年來Survivin的抗細胞凋亡作用及其在癌組織中的作用越來越引起臨床的重視[4]。本研究觀察了乳腺癌組織中Survivin蛋白的表達，并探討其與患者的病理學特征和預后的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院2008年1月～2013年8月女性乳腺疾病蠟塊標本70例。納入患者均有完整臨床資料且經(jīng)術(shù)后病理檢查證實，其中乳腺良性增生26例，乳腺癌44例；年齡28～82歲，平均（56.4±6.7）歲。乳腺癌按TNM分期法進行分期，Ⅰ級12例、Ⅱ級15例、Ⅲ級17例，術(shù)前未行放化療或免疫治療。另取15例正常女性乳腺組織作為對照組。

1.2 免疫組化染色

采用S-P法進行檢測。石蠟包埋標本，連續(xù)4 μm切片，采用高溫抗原修復，正常血清阻斷15 min，傾去血清滴加Survivin一抗工作液4℃過夜，其余按試劑盒說明書進行操作。采用DAB顯色，蘇木精復染，脫水至透明，封片。分別采用正常扁桃腺組織和PBS緩沖液作陽性或陰性對照。兔抗人Survivin抗體和免疫組化S-P試劑盒購買自北京中杉金橋生物公司。

1.3 結(jié)果判定[5]

Survivin蛋白陽性是指細胞漿或細胞膜上出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒。細胞無明顯的著色或著色細胞的比例≤10%為陰性；著色細胞的比例>10%為陽性。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件，計數(shù)資料結(jié)果以相對數(shù)表示，采用χ2檢驗，P < 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 Survivin在正常乳腺、乳腺良性增生及乳腺癌組織中表達差異

Survivin在正常乳腺、乳腺良性增生及乳腺癌組織中陽性率分別為0（0/15）、26.92%（7/26）和70.45%（31/44），呈明顯上升趨勢（χ2=27.25，P < 0.01）。見封三圖5。

2.2 乳腺癌組織中Survivin表達與病理特征關(guān)系

乳腺癌組織中Survivin表達與患者的臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（χ2=6.73、7.74，P < 0.01），與患者的年齡和組織學分級無明顯關(guān)系（χ2=0.86、1.32，P > 0.05）。見表1。

2.3 乳腺癌組織中Survivin表達與預后的關(guān)系

Survivin蛋白陽性表達組的3年生存率明顯低于Survivin蛋白陰性表達組（χ2=5.81，P < 0.05）。見表2。

表2 乳腺癌組織中Survivin表達與3年生存率的關(guān)系[n（%）]

注：與Survivin表達陰性組比較，*P < 0.05

3 討論

凋亡抑制蛋白（IAP）家族是一類細胞結(jié)構(gòu)和功能相似的凋亡抑制蛋白因子，在細胞凋亡中起明顯的負性調(diào)控作用。Survivin基因定位于人體染色體17q25，是IAP家族唯一同時具有細胞凋亡與細胞周期調(diào)控作用的分子[6，7]。Survivin分子中含有一個凋亡抑制蛋白重復序列，能與Caspase-3及-7發(fā)生特異性結(jié)合，從而抑制Caspase-3及-7由酶原轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘拿?，從而抑制Caspase-3及-7引起的細胞凋亡，導致細胞永生化或癌變[8]。Survivin表達只存在于G2/M期，可對抗G2/M期細胞凋亡的誘導，從而允許變異細胞通過有絲分裂異常增殖，導致細胞發(fā)生癌變[9]。Survivin基因具有獨特的基因和蛋白分子結(jié)構(gòu)，主要在胚胎組織和腫瘤組織中表達，而在正常分化組織中不表達或表達較弱[10]。

近年來有關(guān)Survivin基因在乳腺癌組織中的表達及其與臨床病理特征的關(guān)系國內(nèi)外進行了深入廣泛的研究探討，已證實Survivin基因與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展和預后的關(guān)系十分密切，參與其發(fā)生、發(fā)展及浸潤和轉(zhuǎn)移等病理過程[11，12]。劉春富等[13]研究發(fā)現(xiàn)Survivin陽性率在正常乳腺組織、癌旁組織和乳腺癌組織中分別是0、4%和68%，提示Survivin基因在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)Survivin在正常乳腺、乳腺良性增生及乳腺癌組織中的陽性表達率呈明顯上升趨勢，表明Survivin表達在乳腺癌發(fā)生和發(fā)展不同階段呈進行性上升趨勢，驗證了乳腺癌發(fā)生過程中多步驟、漸進性的特點。魏曉麗等[14]研究發(fā)現(xiàn)Survivin表達與乳腺癌患者的臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可作為判斷乳腺癌發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移等病理學特征的一個指標。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)乳腺癌組織中Survivin的表達與臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理特征密切相關(guān)，而與年齡和組織學分級等臨床病理特征無明顯關(guān)系，提示Survivin在乳腺癌的浸潤、發(fā)展和轉(zhuǎn)移等活動中起明顯的促進作用。毛杰等[15]研究發(fā)現(xiàn)Survivin基因的抗凋亡特性在乳腺癌發(fā)病中起極其重要作用，可作為乳腺癌預后判斷的敏感指標。本研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)Survivin蛋白陽性表達組的3年生存率明顯低于Survivin蛋白陰性表達組，提示Survivin基因可作為乳腺癌預后判斷的指標，與其患者的預后密切相關(guān)。

總之，Survivin表達在乳腺癌發(fā)生和發(fā)展不同階段呈進行性上升趨勢，且其表達與臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等病理特征和預后密切相關(guān)，在乳腺癌細胞的侵襲、發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移等活動中可起促進作用。

[參考文獻]

[1] 趙文韜，王嚴慶. Survivin的研究現(xiàn)狀[J]. 國外醫(yī)學：臨床生物化學與檢驗學分冊，2004，25（1）：11-16.

[2] 魯祥石，劉彥龍，王滌，等. 凋亡抑制蛋白Livin和Survivin在乳腺癌中的表達及意義[J]. 中國癌癥雜志，2007，17（7）：542-545.

[3] 王亞利，王中衛(wèi)，王西京，等. Livin、Survivin在乳腺癌中的表達及其與Caspase-3和臨床病理的相關(guān)性[J]. 西安交通大學報，2009，30（9）：466-469.

[4] 華立新，黃桂林，李豫江. Survivin在乳腺癌中的表達及臨床意義[J]. 國際外科學雜志，2008，35（5）：311-314.

[5] Ye CP，Qiu CZ，Huang ZX，et al. Relationship between survivin expression and recurrence， and prognosis in hepatocellular carcinoma[J]. World J Gastroenterol，2007， 13（46）：6264-6268.

[6] 楊升，盧輝山. 凋亡抑制基因Survivin與肺癌的關(guān)系[J]. 腫瘤研究與臨床雜志，2008，20（9）：641-643.

[7] Ai Z，Yin L，Zhou X，et al. Inhibition o f survivin reduces cell proliferation and induces apoptosis in human endome-trial cancer[J]. Cancer，2006，107（4）：746.

[8] Span PN，Sweep FC，Wiegerinck ET，et al. Survivin is an independent prognostic marker for risk stratification of breast cancer patients[J]. Clin Chem，2004，50（11）：1986-1993.

[9] Zaffaroni N，Pennati M，Daidone MG. Survivin as a target for new anticancer interventions[J]. J Cell Mol Med，2005，9（2）：360-373.

[10] Fangusaro JR，Caldas H，Jiang Y. Survivin： an inhibitor of apoptosis in pediatric cancer[J]. Pediatr Blood Cancer，2006，47（1）：4.

[11] 吳偉. 乳腺癌組織芯片中Survivin的表達及其與臨床病理特征和預后的關(guān)系[J]. 中國醫(yī)師雜志，2010，12（2）：197-199.

[12] 楊曉文，崔明. 生存素在乳腺癌組織中的表達及其臨床特征分析[J]. 重慶醫(yī)學，2007，36（20）：2049-2051.

[13] 劉春富，董琦，紀艷超，等. 乳腺癌組織中Survivin表達及其與預后的關(guān)系[J]. 臨床與實驗病理學雜志，2009， 25（3）：267-269.

[14] 魏曉麗，張玉，劉敏麗，等. 乳腺癌組織中Survivin、Ki67的表達變化及意義[J]. 山東醫(yī)藥，2013，53（3）：12-14.

[15] 毛杰，海健，舒衡平，等. 凋亡抑制基因Survivin在乳腺癌中的表達及其意義[J]. 中國醫(yī)師雜志，2005，7（7）：971-972.

（收稿日期：2013-09-22）