李 斌

(黑龍江省黑河市藥品檢驗(yàn)所，黑龍江黑河164300)

生脈飲(人參方)為《中國(guó)藥典2010年版一部》收錄的品種，由紅參、五味子、麥冬組成，有益氣復(fù)脈、養(yǎng)陰生津的功效，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)只有鑒別、檢查項(xiàng)，無(wú)含量測(cè)定項(xiàng)［1］。為確保生脈飲藥品質(zhì)量，我們對(duì)生脈飲(人參方)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制進(jìn)行摸索，采用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定制劑中五味子醇甲的含量，方法如下。

1 儀器與試藥

日本LC－2010AHT高效液相色譜儀，甲醇為色譜純，五味子醇甲對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供(批號(hào):110857－200709)，五批生脈飲(人參方)分別由北京同仁堂藥廠提供批號(hào)為:20120322、20120324、20120326、20120921、20120923，生脈飲(人參方)五味子陰性由黑河三精藥廠制備(除五味子不加，處方其他藥按工藝生產(chǎn))。

2 方法與結(jié)果

2.1 波長(zhǎng)選擇:取五味子醇甲對(duì)照品溶液，在紫外區(qū)200～400 nm進(jìn)行掃描，確定最大吸收波長(zhǎng)為250.1 nm。

2.2 色譜條件及專(zhuān)屬性:色譜柱為AgilentC18(250 mm×4.6 nm);流動(dòng)相為甲醇 － 水(58:42);流速 1.0 mL/min;柱溫 30 ℃;檢測(cè)波長(zhǎng) 250 nm［2］。

2.3 五味子醇甲對(duì)照品溶液制備:精密稱(chēng)取五味子醇甲對(duì)照品12.18 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，精密吸取3.0 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得作為對(duì)照品溶液。(制成每1 mL含0.073 mg的溶液)，即得。見(jiàn)圖1。

2.4 供試品溶液制備:精密量取裝量差異項(xiàng)下的本品25 mL，用乙酸乙酯振搖提取5次，30 mL/次，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状歼m量使溶解，轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45 μm)濾過(guò)，作為供試品溶液。見(jiàn)圖2。

2.5 五味子陰性溶液制備:以相同的處方比例，按生脈飲(人參方)制備工藝制備不含五味子藥材的陰性樣品，精密吸取此樣品25 mL，按供試品溶液的制備方法制備不含五味子的陰性溶液。見(jiàn)圖3。

2.6 線性關(guān)系考察:精密吸取五味子醇甲對(duì)照品溶液1、5、10、15、20、25 μL 在上述色譜條件下重復(fù)進(jìn)樣 2 次，測(cè)定峰面積值，以峰面積平均值和濃度進(jìn)行回歸處理，得回歸方程為:Y=1948084X+5295.66，r=1.0000。線性范圍在 0.073 ～1.825 μg 呈良好的線性關(guān)系。專(zhuān)屬性:

圖1 五味子醇甲對(duì)照品溶液色譜圖

圖2 供試品溶液色譜圖

圖3 五味子陰性溶液色

2.7 系統(tǒng)適應(yīng)性:精密吸取五味子醇甲對(duì)照品溶液10 μL，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定結(jié)果RSD為0.8%。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn):取批號(hào)為20120322供試品溶液，每隔4 h進(jìn)樣10 μL，測(cè)定五味子醇甲峰面積值，共測(cè)定6次，測(cè)定結(jié)果 RSD 為0.9%

2.9 精密度(重復(fù)性)試驗(yàn):取批號(hào)為20120322供試品溶液進(jìn)行6次平行試驗(yàn)，測(cè)定五味子醇甲的含量，每次進(jìn)樣量10 μL，測(cè)定結(jié)果平均值每毫升含五味子醇甲為0.022 mg(RSD 為 0.9%)。

2.10 準(zhǔn)確度試驗(yàn):采用加樣回收法，精密稱(chēng)取進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)的生脈飲(人參方)批號(hào)為20120322樣品10 mL，精密量取3 mL五味子醇甲對(duì)照品溶液加入，按供試品制備法制備，按五味子醇甲含量測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.11 樣品含量測(cè)定:取各供試品溶液，按上述色譜分離條件，進(jìn)樣10 μL，測(cè)定五味子醇甲峰面積，計(jì)算含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

3 小結(jié)與討論

生脈飲(人參方)中五味子為處方中臣藥，有收斂固色、益氣生津、補(bǔ)腎寧心的功效，臨床多用于抗肝損傷、抗氧化、增強(qiáng)代謝、中樞鎮(zhèn)靜等，主要成分為五味子中木脂素(五味子醇甲、五味子乙素等)［3］，選擇五味子醇甲進(jìn)行對(duì)處方中五味子含量評(píng)價(jià)，是因?yàn)槟衔逦蹲又形逦蹲哟技缀糠浅５?，所以選擇五味子醇甲作為含量評(píng)價(jià)，可以防止投料時(shí)南北五味子混用。對(duì)五味子中五味子醇甲進(jìn)行了含量測(cè)定，可以控制生脈飲(人參方)的質(zhì)量。

表2 樣品測(cè)定結(jié)果 (n=2)

本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法測(cè)定有效成分五味子醇甲的含量，本法能達(dá)到有效分離各組分的目的，具有靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、分離效果好、陰性無(wú)干擾等優(yōu)點(diǎn)，試驗(yàn)證明五個(gè)批號(hào)生脈飲(人參方)中五味子醇甲含量均值為0.023 mg/mL，根據(jù)制劑含量方法學(xué)驗(yàn)證中范圍規(guī)定為平均值的80%，推算生脈飲(人參方)中五味子醇甲含量應(yīng)不低于0.018 mg/mL。

［1］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典一部［S］.北京:中國(guó)科技出版社，2010:653.

［2］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典一部［S］.北京:中國(guó)科技出版社，2010:760.

［3］ 肖培根.新編中藥志第二卷［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2002:123.