李 歡 ,李建貴,梁家偉,錢立龍,張俊才,楊根芳,張東亞
(1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 林業(yè)研究所,新疆 烏魯木齊 830052;2.新疆林業(yè)科學(xué)院,新疆 烏魯木齊 830000)
阿克蘇富士蘋果Malus pumilaMill.由新疆阿克蘇紅旗坡農(nóng)場于1986年引進(jìn)自日本果樹試驗(yàn)場盛岡支場,是從‘國光’與‘元帥’雜交的后代培育出的新品種,產(chǎn)地具有得天獨(dú)厚的光熱資源,使得蘋果果實(shí)個(gè)大、含糖量高、香氣濃郁、酥脆多汁,尤其是形成了獨(dú)具特色的“冰糖心”蘋果而享譽(yù)中外。近年來,有許多學(xué)者對(duì)阿克蘇富士蘋果進(jìn)行過大量的研究,主要集中在果實(shí)外觀品質(zhì)如果形、著色以及肥效、產(chǎn)量等問題上,但有關(guān)不同激素對(duì)阿克蘇富士蘋果糖分含量等內(nèi)在品質(zhì)的研究則相對(duì)較少。有研究表明,成熟果實(shí)中積累了大量的糖[1],而生長素、外源赤霉素、脫落酸及細(xì)胞分裂素等激素類物質(zhì)能夠在一定程度上促進(jìn)肉質(zhì)果實(shí)內(nèi)部糖分的積累[2],對(duì)植物種子萌發(fā)[3]、植株?duì)I養(yǎng)生長及開花結(jié)實(shí)[4]都有一定的促進(jìn)作用。這些糖是果實(shí)品質(zhì)成分和風(fēng)味物質(zhì)(如色素、維生素和芳香物質(zhì)等)合成的基礎(chǔ)原料,成為影響果實(shí)品質(zhì)的重要因子[5]。然而甜味常被作為判定蘋果內(nèi)在品質(zhì)的重要指標(biāo)之一,其甜度值的大小又取決于果實(shí)內(nèi)糖的種類和含量的多少,糖的種類和含量是果實(shí)品質(zhì)形成的關(guān)鍵因素,也是決定果實(shí)商品優(yōu)劣的重要指標(biāo)[6]。因此,研究果實(shí)內(nèi)各糖組分的含量及比例顯得尤為重要。文中針對(duì)該問題展開研究,旨在闡明不同激素對(duì)阿克蘇富士蘋果糖分積累量及與果實(shí)品質(zhì)的關(guān)系,為進(jìn)一步研究阿克蘇蘋果“冰糖心”、優(yōu)化蘋果果實(shí)品質(zhì)提供基礎(chǔ)。
試驗(yàn)于2013年在阿克蘇地區(qū)紅旗坡農(nóng)場進(jìn)行。阿克蘇位于新疆中部,北鄰天山山脈,南接塔里木盆地。紅旗坡農(nóng)場位于阿克蘇市北部,北緯 41°17′,東經(jīng) 80°18′,海拔 1 104 m。農(nóng)場常年種植蘋果、香梨、葡萄、核桃等果樹,其中蘋果種植面積近萬公頃。試驗(yàn)地為典型溫帶干旱型氣候區(qū),晝夜溫差較大,有效積溫高,降水相對(duì)稀少且蒸發(fā)量大,日照充足,氣候相對(duì)干燥。無霜期218 d,年均太陽總輻射量約575 kJ/cm2,年日照時(shí)數(shù)為2 836 h,年均氣溫12 ℃,年平均降雨量80.8 mm,年蒸發(fā)量2 305 mm。
試驗(yàn)材料為2003年建園的長富2號(hào)紅富士蘋果,授粉品種為嘎啦,以紡錘形樹形為主,株行距為4 m×5 m,整體樹勢中庸,樹形結(jié)構(gòu)合理,具有良好的灌溉條件和栽培管理水平。
在蘋果盛花期的4月15日前后,分別噴施激素IAA、GA3和6-BA,每種激素設(shè)3個(gè)濃度梯度,每個(gè)處理選取長勢一致、花量適中、無病害的5株樹,每株選擇高度、朝向一致的枝條3個(gè),掛牌標(biāo)記為處理1,IAA25 mg/L;處理2,IAA 250 mg/L;處理 3,IAA500 mg/L;處理 4,GA3325 mg/L;處理 5,GA3250 mg/L;處理 6,GA3500 mg/L;處理 7,6-BA25 mg/L;處理 8,6-BA250 mg/L;處理9,6-BA500 mg/L;CK(對(duì)照),不噴施任何激素。對(duì)上述各處理進(jìn)行相同的栽培管理。在采收期對(duì)經(jīng)各處理的每株樹的每枝隨機(jī)選果10個(gè),每個(gè)處理共150個(gè)果,分別進(jìn)行可溶性總糖、還原糖、蔗糖、果糖、葡萄糖、甜度值、可滴定酸以及甜酸比等指標(biāo)的測定。
可滴定酸含量采用NaOH滴定法測定[7],還原糖含量采用直接滴定法[8],果糖含量測定采用間苯二酚比色法[11],葡萄糖含量測定采用鄰甲苯二酚比色法[11]。
總糖的測定:吸取50 mL測還原糖時(shí)的果樣處理液,于100 mL容量瓶,加入5 mL鹽酸,70 ℃水浴15 min,冷卻后,加2滴甲基紅指示液,用氫氧化鈉溶液(200 g/L)中和后,定容至刻度,混合均勻[8]。
測果糖和葡萄糖的前處理,參照王艷穎[10]等的方法并略作改進(jìn)。準(zhǔn)確稱取果實(shí)勻漿0.5 g于離心管中,加超純水5 mL,80 ℃水浴10 min,超聲提取1 h。使可溶性糖充分浸出,冷卻后5 500 r/min離心15 min,上清液過濾到10 mL的容量瓶中,殘?jiān)尤? mL超純水再提取,合并上清液,超純水定容后待測。
蔗糖含量=(可溶性總糖含量-還原糖含量)×0.95[8];
甜度值=(葡萄糖×0.7)+(果糖×1.75)+蔗糖×1[9]。
所有數(shù)據(jù)采用Excel2007和SPSS17.0軟件進(jìn)行處理。
將試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行箱狀圖分析,如圖1所示。不同處理下,各糖組分積累量大小為:總糖>還原糖>果糖>葡萄糖>蔗糖,均值分別為123.54、102.38、65.01、32.55、13.88 mg/g;其中對(duì)各糖分作用最顯著的處理分別為:總糖6-BA 250 mg/L,還原糖IAA500 mg/L,蔗糖GA3500 mg/L,果糖GA3250 mg/L,葡萄糖GA3250 mg/L。從分析結(jié)果中還可以得出,在不同處理下總糖、果糖和葡萄糖的差異和分布范圍較大,而還原糖和蔗糖的分布范圍相對(duì)較小。
圖1 不同處理可溶性糖含量的變化范圍及分布Fig. 1 Content range and distribution of soluble sugars in different treatments
蘋果果實(shí)各糖分之間有著密切的相關(guān)性,將蘋果果實(shí)的各糖組分進(jìn)行了相關(guān)性分析,如表1所示。果糖和甜度值的相關(guān)性最高(r=0.945**);果糖與總糖之間也表現(xiàn)出極顯著的正相關(guān)關(guān)系(r=0.651**);此外,甜度值與葡萄糖、蔗糖以及總糖之間也呈現(xiàn)出顯著的正相關(guān)關(guān)系;然而,酸與甜酸比之間表現(xiàn)出極強(qiáng)的負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.803**),酸與大多數(shù)糖都存在一定的負(fù)相關(guān)關(guān)系,但都表現(xiàn)不顯著。
表1 可溶性糖組分與酸、甜度值的相關(guān)分析?Table 1 Correlation analysis of sugar components, acid value and sweetness value
將不同處理下蘋果果實(shí)可溶性糖組分進(jìn)行顯著性分析,結(jié)果如表2所示。
在IAA,GA3和6-BA這3種激素的作用下,大多都呈現(xiàn)出隨著激素濃度的遞增各糖分積累量增大的趨勢。
表2 不同激素處理下蘋果果實(shí)各可溶性糖組分的含量?Table 2 Contents of soluble sugars in apple fruit under different hormone treatments
處理8對(duì)總糖的作用最顯著,處理6的總糖值最小,但也顯著高于對(duì)照;處理2、4對(duì)還原糖的促進(jìn)作用較小,其含量與對(duì)照無差異,而處理3對(duì)還原糖的促進(jìn)作用最顯著;IAA處理的蔗糖均值顯著低于其他兩種激素處理的均值,其中,處理6的作用最顯著;GA3處理的果糖均值顯著高于其他兩種激素處理的均值,作用最顯著出現(xiàn)在處理5;而葡萄糖在處理4、7和8中的含量與對(duì)照無差異,處理5的作用最顯著。
將不同處理下蘋果果實(shí)的甜度值、酸和甜酸比進(jìn)行了顯著性分析,結(jié)果如表2所示。在3種激素處理下,處理1和處理7的甜度值顯著低于對(duì)照,處理5的甜度值最高,在處理3和處理5中,果糖含量在相同的激素處理中相對(duì)較大時(shí),相應(yīng)的甜度值含量也較大;酸含量都在各激素最大濃度的處理中,值較大;甜酸比的變化與糖分積累的變化趨勢一致,處理5和處理8中,當(dāng)總糖、還原糖和果糖含量在同種激素處理中相對(duì)較大時(shí),甜酸比也較大。
總糖由還原糖和非還原糖組成,還原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖等,非還原性糖包括蔗糖、淀粉、纖維素等。而果實(shí)中所含單糖主要是葡萄糖和果糖,雙糖以蔗糖為主,本試驗(yàn)通過測量具有代表性的總糖、還原糖、蔗糖、果糖以及葡萄糖,來衡量蘋果果實(shí)中糖的含量。試驗(yàn)結(jié)果表明,在所有處理中,各糖分的積累量從大到小的順序都是總糖>還原糖>果糖>葡萄糖>蔗糖,其中果糖占還原性糖的比例最大,達(dá)45.64%~54.86 %,其次是葡萄糖,占17.04%~33.29 %,蔗糖所占比例最小,僅為8.14%~13.33%。此結(jié)論與劉金豹[12]等所提出的蘋果果實(shí)中果糖含量最高的結(jié)論一致,由此說明,各激素處理并沒有影響成熟的蘋果果實(shí)中糖分的分布特點(diǎn)。
試驗(yàn)結(jié)果還顯示,所有處理中蘋果果實(shí)的總糖、果糖和葡萄糖的分布范圍較大,而還原糖和蔗糖的分布范圍相對(duì)較小,說明激素處理對(duì)總糖、果糖和葡萄糖的影響效果較還原糖和蔗糖顯著,使得其變化范圍有所擴(kuò)大,其具體原因還需進(jìn)一步深入研究。
3種激素處理對(duì)糖的積累都具有一定的促進(jìn)作用,進(jìn)一步證實(shí)了經(jīng)生長調(diào)節(jié)劑處理的果實(shí)會(huì)使果實(shí)內(nèi)部內(nèi)源激素受到影響,從而增加其果實(shí)內(nèi)糖的積累量。其中IAA500 mg/L、GA3250 mg/L和6-BA 250 mg/L對(duì)各糖分的積累效果最顯著;IAA對(duì)蔗糖分解的促進(jìn)作用顯著大于其他兩種激素,這與夏國海[13]的結(jié)論一致;而GA3對(duì)果糖合成的促進(jìn)作用比較顯著,此結(jié)果與陳發(fā)河[14]的研究結(jié)果一致。
有研究表明,蘋果果實(shí)的糖酸含量以及糖酸比可決定其風(fēng)味品質(zhì)[15],本試驗(yàn)不僅比較了糖組分和酸含量,更是將甜度值和甜酸比進(jìn)行了分析,結(jié)果表明,甜度值由3種糖按不同比例計(jì)算出的結(jié)果,不同處理中,這3種糖的含量都不同,因此果實(shí)的綜合甜味由甜度值來判斷更為準(zhǔn)確可靠。
相關(guān)分析結(jié)果顯示,果糖和甜度值的相關(guān)性水平最強(qiáng),表明蘋果果實(shí)的甜度值與果糖積累量的關(guān)系最為密切,在IAA500 mg/L和GA3250 mg/L處理中,果糖含量相對(duì)較大時(shí),相應(yīng)的甜度值含量也較大,這種正相關(guān)關(guān)系也充分說明果糖含量可直接反映出甜度值的大小;同時(shí),果糖與總糖之間也表現(xiàn)出極顯著的正相關(guān)關(guān)系,在IAA500 mg/L,GA3250 mg/L和6-BA250 mg/L處理中,果糖值達(dá)到最大時(shí),總糖值也最大,充分說明果糖占總糖的比例最大,是影響總糖含量的關(guān)鍵性因素。以上兩結(jié)論與姚改芳[9]提出的果糖含量的多少將直接影響果實(shí)的甜味的結(jié)論一致,也進(jìn)一步說明了果糖含量對(duì)果實(shí)口感品質(zhì)的貢獻(xiàn)較大。
甜酸比也是體現(xiàn)蘋果果實(shí)口感品質(zhì)的重要指標(biāo)。經(jīng)GA3250 mg/L和6-BA250 mg/L處理后各果實(shí)糖分的積累效果最顯著,含量也相對(duì)較高;酸含量隨激素濃度的升高而有所提高,相關(guān)分析中顯示酸含量與甜酸比有極顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系。因此甜酸比在該處理下均出現(xiàn)了最大值,表明蘋果果實(shí)糖分含量與甜酸比有著密切的關(guān)系。此結(jié)論再一次驗(yàn)證,可溶性糖等味感物是構(gòu)成果實(shí)的風(fēng)味物質(zhì)的基礎(chǔ)[16]。此外,香味物質(zhì)等嗅感物質(zhì)[17]以及與糖代謝相關(guān)酶對(duì)風(fēng)味對(duì)果實(shí)內(nèi)在品質(zhì)也有著重要影響[18]。
不同激素處理下阿克蘇富士蘋果果實(shí)各糖分的積累量均為:總糖>還原糖>果糖>葡萄糖>蔗糖,其中果糖占總糖的比例最大,其次是葡萄糖,含量最少的是蔗糖;不同激素處理對(duì)糖組分分布影響不明顯。
以 IAA500 mg/L、GA3250 mg/L和 6-BA250 mg/L 3個(gè)處理對(duì)蘋果果實(shí)各糖分積累的影響最顯著,同時(shí)也具有較優(yōu)良的風(fēng)味品質(zhì)。其中IAA對(duì)蔗糖的分解、GA3對(duì)果糖的合成具有較好地促進(jìn)作用。
蘋果果實(shí)風(fēng)味品質(zhì)可用甜度值來進(jìn)行綜合評(píng)價(jià),甜度值的大小又可通過果糖、葡萄糖和蔗糖進(jìn)行綜合分析,其中果糖對(duì)甜度值的貢獻(xiàn)最大,果糖對(duì)總糖的影響最顯著。
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