柴軍紅，何婷婷，金志民，馬懷良，肖杰，張鵬

（牡丹江師范學(xué)院，黑龍江牡丹江157011）

花楸葉活性成分提取工藝的優(yōu)化

柴軍紅，何婷婷，金志民，馬懷良，肖杰，張鵬

（牡丹江師范學(xué)院，黑龍江牡丹江157011）

建立花楸葉中黃酮、多糖、萜類同步快速提取工藝，以期為花楸葉活性成分藥用價(jià)值開發(fā)提供工藝基礎(chǔ)。以花楸葉為原料，以總黃酮、多糖、總萜提取率為技術(shù)指標(biāo)，通過(guò)提取方法對(duì)比試驗(yàn)，采用正交設(shè)計(jì)與多指標(biāo)綜合分析法（權(quán)重）探討提取工藝的影響因素。影響因素順序依次是：超聲波時(shí)間＞乙醇濃度＞pH（料液比）＞酶添加量，優(yōu)化最佳工藝參數(shù)：超聲波時(shí)間25min，乙醇濃度50%，料液比1∶25（g/mL），pH=4，酶添加量5mg/g。本工藝3種主要指標(biāo)均比傳統(tǒng)提取法有很大提高，放大20倍實(shí)驗(yàn)表明工藝較為穩(wěn)定，標(biāo)準(zhǔn)偏差均在3%以內(nèi)。

花楸葉；黃酮；多糖；萜類；工藝優(yōu)化

花楸為薔薇科花楸屬植物，常用于治療肺結(jié)核、哮喘、咳嗽、胃痛等癥?；ㄩ比~中富含三萜類、甾醇類、黃酮類、胡蘿卜烴類、二聯(lián)苯類和木脂素類、生氰苷類、有機(jī)酸類、花楸酸及其苷類化合物[1]。除以上各種化合物外，花楸屬植物中還含有烷（醇）類，間苯三酚，D-山梨酸，氨基酸和VC等成分。其中黃酮類、萜類、多糖是主要活性物質(zhì)，藥理作用上有強(qiáng)抗氧化、抗癌、抗輻射和止咳平喘等作用而引起國(guó)內(nèi)外研究及關(guān)注。

以牡丹江產(chǎn)花楸葉（經(jīng)牡丹江師范學(xué)院曲秀春教授鑒定為百花花楸Sorbus pohuashanensis（Hance）Hedl，標(biāo)本現(xiàn)存于牡丹江師范學(xué)院-生命學(xué)院標(biāo)本室）為原料，針對(duì)常見工藝提取率低，活性成分收率不穩(wěn)定，提取率指標(biāo)單一，不能準(zhǔn)確進(jìn)行工藝評(píng)價(jià)——因?yàn)椴煌崛》椒ㄖ谢钚猿煞痔崛÷视忻黠@差異性；同種方法，條件不同對(duì)多種活性成分的浸出也存在干擾，所以單一指標(biāo)是不能準(zhǔn)確評(píng)價(jià)工藝的。為了消除影響，有必要研究多指標(biāo)工藝對(duì)參數(shù)的影響，以期為類似藥物提取工藝提供一種新的評(píng)價(jià)模式。本文采用含量加權(quán)法，對(duì)總黃酮類、總萜類、多糖等指標(biāo)加權(quán)，利用單因素及正交實(shí)驗(yàn)，研究了花楸葉活性成分提取工藝，獲得較為穩(wěn)定的提取工藝。

1 材料與方法

1.1.1 主要試劑

苯酚（AR）、濃硫酸（AR）、葡萄糖（AR）：沈陽(yáng)試劑三廠；工業(yè)酒精（98%）、活性碳、纖維素酶（Sigma，C1794）、蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品＞99%：貴州迪大生物技術(shù)公司；甲醇（AR），三氯甲烷（AR），鹽酸（AR）：沈陽(yáng)試劑三廠；熊果酸標(biāo)準(zhǔn)品＞98%：貴州迪大生物技術(shù)公司；香草醛（AR）：遼寧世星藥化；高氯酸（AR）等，以上未標(biāo)出試劑為天津大茂化學(xué)試劑廠。

1.1.2 主要儀器

HH-6恒溫水浴鍋：金壇市友聯(lián)儀器研究所；DZF-6020真空干燥：沈陽(yáng)林頻實(shí)驗(yàn)設(shè)備公司；FZ102植物粉碎機(jī)：天津泰斯特儀器公司；UV～2010紫外可見分光光度計(jì)（日立），PHS-25型PH計(jì)：上海雷磁；BS214D電子天平（德國(guó)賽多利斯），RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：上海亞榮；SL-2010N超聲波萃取裝置（南京順流），索氏提取裝置；NJL07-3型實(shí)驗(yàn)專用微波爐：南京杰全微波設(shè)備有限公司；等。

1.2 提取方法對(duì)比試驗(yàn)

對(duì)傳統(tǒng)浸提法，回流提取法，索氏提取法，超聲波輔助法，微波輔助法[2]，纖維素酶輔助法，并對(duì)酶法進(jìn)行了適當(dāng)組合。以總黃酮、多糖、萜類收率為參數(shù)指標(biāo)，綜合研究確定了提取方法。

具體設(shè)置參數(shù)為：將自然陰干的花楸葉，粉碎，過(guò)20～30目篩，①浸提法采用工業(yè)常用參數(shù)料液比1∶20（g/mL），70%乙醇，浸泡24 h，回收乙醇濃縮至原體積1/10，定容檢測(cè)；②回流提取法：料液比1∶20（g/mL），70%乙醇，回流提取2 h，提取2次合并濾液，回收乙醇濃縮至原體積1/10，定容檢測(cè)；③索氏提取同上料液比，乙醇濃度，提取6 h回收乙醇濃縮至原體積1/10定容檢測(cè)；④超聲波輔助法依據(jù)同樣料液比，乙醇濃度，提取時(shí)間30min，溫度30℃，功率100W，頻率20 kHz；⑤微波輔助法：提取時(shí)間10min，功率300W，其它條件同上；⑥纖維素酶輔助法溫度37℃，酶解時(shí)間0.5 h，酶添加量4mg/g，其它條件同上；⑦酶輔助復(fù)合法：具體采用酶解反應(yīng)時(shí)間0.5 h，溫度37℃，其它條件同上；將每組實(shí)驗(yàn)設(shè)置平行實(shí)驗(yàn)3次取平均值，結(jié)果見表1。

1.3 活性成分測(cè)定方法

1.3.1 總黃酮測(cè)定方法

采用亞硝酸鈉一硝酸鋁法[3]，在紫外可見分光光度計(jì)上，505 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

樣品含量測(cè)定依據(jù)1.2方法將提取液回收乙醇，濃縮至原體積1/10，取50%乙醇定容至100mL容量瓶中，移取1mL母液于25mL比色管依據(jù)前法測(cè)定含量。

1.3.2 多糖測(cè)定方法

采用硫酸-苯酚法[4]測(cè)定多糖含量。在紫外可見分光光度計(jì)上，490 nm處測(cè)定吸光值，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

樣品含量測(cè)定依據(jù)1.2方法將提取液回收乙醇，濃縮至原體積1/10，取50%乙醇定容至100mL容量瓶中，移取2mL母液于25mL比色管依據(jù)前法測(cè)定含量。

1.3.3 萜類測(cè)定方法

此外花楸富含萜類化合物，所以將萜類化合物作為主要成分之一，采用5%香草醛～冰乙酸和高氯酸顯色法[5]，在紫外可見分光光度計(jì)上，545 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

樣品含量測(cè)定依據(jù)1.2方法將提取液回收乙醇，濃縮至原體積1/10，取50%乙醇定容至100mL容量瓶中，移取1mL母液于25mL比色管依據(jù)前法測(cè)定含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 提取方法對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果

提取方法對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 提取方法對(duì)比研究Table1 Comparative Study of Extraction

通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)表明，傳統(tǒng)的浸提法、回流提取法、索氏提取法對(duì)于大極性多糖提取效能較低，加入酶后可以提高提取率6倍以上，對(duì)于黃酮與萜類均能提高30%～50%以上，這可能與纖維素酶水解細(xì)胞壁，促進(jìn)胞內(nèi)物質(zhì)釋放密切相關(guān)。相對(duì)來(lái)說(shuō)，超聲波法與微波法均能較好的促進(jìn)活性物質(zhì)釋放擴(kuò)散，是較為節(jié)能又快速提取方法，相對(duì)有工藝優(yōu)勢(shì)。在相關(guān)萃取方法中，若采取酶先處理，將會(huì)有更大收率。通過(guò)對(duì)比，本文將以低溫超聲波法+酶輔助法為提取方法進(jìn)行討論，至于微波法在其它文章中討論。

2.2 活性成分標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2.1 黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線

依據(jù)1.3.1方法建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，蘆丁對(duì)照品在（0.11～0.67）mg/mL，線性關(guān)系良好。其回歸方程為Y= 0.573x+0.016 8，R2=0.999 2。

2.2.2 多糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

依據(jù)1.3.1方法建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，葡萄糖在（2.336～23.356）μg/mL，線性關(guān)系良好。其回歸方程為Y= 0.017 5x+0.017 6，R2=0.999 3。

2.2.3 萜類標(biāo)準(zhǔn)曲線

依據(jù)1.3.3.方法建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，熊果酸對(duì)照品在（20～100）μg/mL范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。其回歸方程為Y=0.005 5x+0.086 7，R2=0.998 4。

2.4 提取因素討論

2.4.1 料液比的影響

將其它參數(shù)固定如：酶促溫度37℃，酶促時(shí)間為1 h，添加量為4mg/g，pH為5，乙醇濃度60%，超聲波溫度25℃，超聲波時(shí)間20min，超聲波頻率20 kHz，功率為200W，料液比設(shè)置如下：1∶10；1∶15；1∶20；1∶25；1∶30（g/mL），進(jìn)行單因素試驗(yàn)，依據(jù)1.3提供的方法測(cè)定目標(biāo)成分含量。其結(jié)果如圖1。

圖1 料液比的影響Fig.1 The effect of Feedstock ratio

如圖1所示，在不斷提高料液比時(shí)有利于活性成分萃取，但是隨著料液比增大，會(huì)對(duì)后續(xù)過(guò)濾，濃縮干燥帶來(lái)更多耗能，所以料液比選在1∶20～1∶25（g/mL）范圍較為合理。

2.4.2 酶添加量的影響

取5 g材料依據(jù)前面試驗(yàn)將料液比固定在1∶25（g/mL），酶促溫度設(shè)置在37℃，酶促時(shí)間設(shè)置在1.5 h，將其它參數(shù)同上固定，設(shè)置酶添加量：8、15、20、25、30 mg。進(jìn)行單因素試驗(yàn)，依據(jù)1.3提供的方法測(cè)定目標(biāo)成分含量。其結(jié)果如圖2。

酶添加量往往需要決定酶促反應(yīng)速度和程度，實(shí)驗(yàn)表明在當(dāng)酶添加量達(dá)到5mg/g就可以滿足以上工藝需求，同時(shí)提取液粘稠度適中過(guò)濾較快。

2.4.3 超聲波時(shí)間影響

依據(jù)前面試驗(yàn)將料液比固定在1∶25（g/mL），酶促溫度設(shè)置在37℃，酶促時(shí)間設(shè)置在1.5 h，酶添加量5mg/g，將其它參數(shù)同上固定，超聲波時(shí)間：10、20、25、30、40、45min。進(jìn)行單因素試驗(yàn)，依據(jù)1.3提供的方法測(cè)定目標(biāo)成分含量。其結(jié)果如圖3。

圖2 酶添加量影響Fig.2 The effect of enzyme concentration

圖3 超聲波時(shí)間影響Fig.3 The effect of Ultrasonic extraction time

據(jù)圖3，在超聲波萃取時(shí)間達(dá)到20min～30min中將會(huì)有一個(gè)穩(wěn)定的收率，但是隨著時(shí)間增加黃酮與萜類出現(xiàn)降低，這可能與隨著時(shí)間延長(zhǎng)多糖和其它水解糖開始團(tuán)聚，會(huì)出現(xiàn)黃酮和萜類吸附，增加其它可能的雜質(zhì)，最后影響工藝，這一點(diǎn)試驗(yàn)中采用TLC手段得到了驗(yàn)證，具體討論另文介紹。

2.4.4 超聲波頻率的影響[6]

依據(jù)前面試驗(yàn)將料液比固定在1∶25（g/mL），酶促溫度設(shè)置在37℃，酶促時(shí)間設(shè)置在1.5 h，酶添加量5mg/g，超聲波時(shí)間20min，將其它參數(shù)同上固定，超聲波頻率：15、20、25、30、35、40 kHz。進(jìn)行單因素試驗(yàn)，依據(jù)1.3提供的方法測(cè)定目標(biāo)成分含量。其結(jié)果如圖4。

圖4 超聲波頻率的影響Fig.4 The effect of Ultrasonic frequency

超聲波頻率對(duì)提取產(chǎn)物種類有不同的影響，為了防止所需要目標(biāo)產(chǎn)物的流逝，在以上試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)低頻率對(duì)于黏度大的如多糖有很好的萃取能力，對(duì)于溶液黏度小的物質(zhì)適當(dāng)提高頻率有利于產(chǎn)品萃取，在本工藝中為了達(dá)到平衡所以取20 kHz下較為合理。

2.4.5 超聲波功率的影響[7]

依據(jù)前面試驗(yàn)將料液比固定在1∶25（g/mL），酶促溫度設(shè)置在37℃，酶促時(shí)間設(shè)置在1.5 h，酶添加量5mg/g，超聲波時(shí)間20min，超聲波頻率20 kHz將其它參數(shù)同上固定，超聲波功率：100、200、300、400、500、600W。進(jìn)行單因素試驗(yàn)，依據(jù)1.3提供的方法測(cè)定目標(biāo)成分含量。其結(jié)果如圖5。

圖5 超聲波功率影響Fig.5 The effect of ultrasonic power

超聲波功率在300W下可以較好的兼顧以上三種主要成分，大那是隨著功率加大，熱效應(yīng)會(huì)增強(qiáng)，這樣大分子的如淀粉纖維素會(huì)逐步進(jìn)入溶劑，產(chǎn)生吸附，過(guò)濾時(shí)會(huì)有損失，最后影響主要成分收率，所以無(wú)論從能耗或是提取角度都應(yīng)該選擇較為適中功率。

2.4.6 超聲波溫度影響

依據(jù)前面試驗(yàn)將料液比固定在1∶25（g/mL），酶促溫度設(shè)置在37℃，酶促時(shí)間設(shè)置在1.5 h，酶添加量5mg/g，超聲波時(shí)間20min，超聲波頻率20 kHz，超聲波功率300W，將其它參數(shù)同上固定，超聲波溫度：30、40、50、60、70、80℃。進(jìn)行單因素試驗(yàn)，依據(jù)1.3提供的方法測(cè)定目標(biāo)成分含量。其結(jié)果如圖6。

圖6 超聲波溫度影響Fig.6 The effect of Ultrasonic temperature

超聲波溫度有好的熱擴(kuò)散效應(yīng)，可以促進(jìn)活性成分釋放[4]，但是隨著溫度升高，雜質(zhì)將也會(huì)增加，并給過(guò)濾帶來(lái)困難，所以本文提取溫度60℃～70℃之間即可。

2.4.7 pH的影響

依據(jù)前面試驗(yàn)將料液比固定在1∶25（g/mL），酶促溫度設(shè)置在37℃，酶促時(shí)間設(shè)置在1.5 h，酶添加量5mg/g，超聲波時(shí)間20min，超聲波頻率20 kHz，超聲波功率300W，超聲波溫度70℃，將其它參數(shù)同上固定，溶液pH設(shè)置為：3、4、5、6、7、8、9。進(jìn)行單因素試驗(yàn)，依據(jù)1.3提供的方法測(cè)定目標(biāo)成分含量。其結(jié)果如圖7。

圖7 pH的影響Fig.7 The effect of pH

提取時(shí)pH對(duì)提取產(chǎn)物有很大影響，同時(shí)是纖維素酶活性必須條件，如圖7所示，在4～6范圍內(nèi)有好的收率，隨著pH加大收率下降較快，這與酶最佳pH有關(guān)系，也可能與提取物質(zhì)在不同pH下發(fā)生降解有一定關(guān)系。所以pH設(shè)置在3～6即可滿足工藝要求。

2.4.8 乙醇濃度影響

依據(jù)前面試驗(yàn)將料液比固定在1∶25（g/mL），酶促溫度設(shè)置在37℃，酶促時(shí)間設(shè)置在1.5 h，酶添加量5mg/g，超聲波時(shí)間20min，超聲波頻率20 kHz，超聲波功率300W，超聲波溫度70℃，pH4，將其它參數(shù)同上固定，萃取劑乙醇濃度為：30%、50%、60%、70%、80%。進(jìn)行單因素試驗(yàn)，依據(jù)1.3提供的方法測(cè)定目標(biāo)成分含量。其結(jié)果如圖8。

圖8 乙醇濃度的影響Fig.8 The effect of ethanol concentration

提取溶劑濃度對(duì)目標(biāo)成分影響很大，這與極性相似相容原理統(tǒng)一。如圖8所示由于多糖極性大，醇溶性差所以低濃度有利于其提取，但是其它成分脂溶性強(qiáng)，為了平衡所以取中間值，本工藝采用40%～50%乙醇濃度為萃取劑。

2.5 正交工藝優(yōu)化

本試驗(yàn)是多指標(biāo)實(shí)驗(yàn)，利用綜合評(píng)分法將各項(xiàng)指標(biāo)加權(quán)系數(shù)（權(quán)值）計(jì)算每號(hào)試驗(yàn)結(jié)果。加權(quán)系數(shù)的大小由指標(biāo)的重要程度來(lái)決定，指標(biāo)越重要加權(quán)系數(shù)越大[8]。本文依據(jù)其提取率多少，將多糖加權(quán)100，防止因其提取率較低，數(shù)據(jù)被抵消不能顯示提取率意義?？傸S酮提取率相對(duì)較高，活性相對(duì)較高若是直接對(duì)比多糖進(jìn)行權(quán)值系數(shù)的話就和未加權(quán)前相似，故與萜類含量相比其權(quán)重應(yīng)該在萜2倍左右較為合理所以總黃酮加權(quán)系400，萜類加權(quán)系數(shù)200。

較選取pH，超聲波時(shí)間，酶加入量，乙醇濃度，料液比等為主要因素進(jìn)行正交設(shè)計(jì)，選取L18（37），每組實(shí)驗(yàn)平行3次取平均值，采用加權(quán)綜合評(píng)分，其結(jié)果如表2。

表2 正交分析結(jié)果Table2 The results of orthogonal analysis

通過(guò)R值其所選因素影響是：超聲波時(shí)間＞乙醇濃度＞pH（料液比）＞酶添加量，最佳工藝條件是3，4號(hào)pH值在3～4范圍內(nèi)，乙醇濃度50%～60%，料液比1∶25～1∶30（g/mL），酶量5mg/g～6mg/g，工藝上相對(duì)來(lái)說(shuō)3號(hào)更加符合節(jié)能降耗要求，同時(shí)由于設(shè)置權(quán)重會(huì)有一定影響，從成分平衡角度出發(fā)本文采用3號(hào)工藝參數(shù)：超聲波時(shí)間25min，乙醇濃度50%，料液比1∶25， pH=4，酶添加量5mg/g。

2.6 放大實(shí)驗(yàn)

依據(jù)2.5將實(shí)驗(yàn)擴(kuò)大20倍，每組重復(fù)3次，驗(yàn)證工藝穩(wěn)定性。其結(jié)果如下表3。

表3 工藝穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)Table3 Stability experim ent

通過(guò)穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)放大20倍后，其重復(fù)三次實(shí)驗(yàn)，其黃酮提取率平均值為3.468，標(biāo)準(zhǔn)偏差2.24%，此偏差與偏離算術(shù)平均值的程度在3%以內(nèi)，考慮試驗(yàn)誤差，表明提取工藝參數(shù)較為穩(wěn)定。同理其多糖、萜類偏差表明，工藝在放大20倍后有好的穩(wěn)定性。

3 結(jié)論

通過(guò)對(duì)比試驗(yàn)數(shù)據(jù)我們可以得到酶促輔助+超聲波提取技術(shù)是較為合理且能好溶劑使用量等方面有一定的優(yōu)勢(shì)。通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化和綜合加權(quán)分析我們可以明確對(duì)于中藥提取僅僅是停留在一個(gè)主成分或浸提率上面是不能真正體現(xiàn)中藥價(jià)值，同時(shí)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)即使高的浸提率并不一定代表活性成分含量高。對(duì)于中藥提取的理想狀態(tài)是竟可能的提高活性成分，減少無(wú)用成分或有毒成分，所以很有必要針對(duì)不同藥用部位開展多指標(biāo)工藝優(yōu)化及雜質(zhì)限量控制研究。

總之,本工藝三種主要指標(biāo)均比傳統(tǒng)提取法有很大提高,放大20倍實(shí)驗(yàn)表明工藝較為穩(wěn)定,標(biāo)準(zhǔn)偏差均在3%以內(nèi),有一定的實(shí)踐指導(dǎo)意義。

[1]于民,李銑.花楸屬植物化學(xué)成分藥理作用及其研究進(jìn)展[J].遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2004,6(5):364-366

[2]王艷,張鐵軍.微波技術(shù)在中藥有效成分提取中應(yīng)用[J].中草藥, 2005,36(3):470-472

[3]曠春桃,李湘洲,汪玉霞，等.大葉冬青葉中總黃酮測(cè)定方法和提取工藝研究[J].食品科學(xué),2009,30(6):49-51

[4]孟玲,王蘭英,梁大勇，等.樺褐孔菌多糖測(cè)定方法的比較[J].食品研究與開發(fā),2010,31(4):108-111

[5]高茗,胡玉霞,余啟榮，等.UV-Vis法測(cè)定靈丹草油中總萜類含量[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐,2011,25(1):60-62

[6]郭孝武,林書玉,王蕊娥.不同頻率對(duì)提取蕓香苷成分的影響[J].陜西師范大學(xué)學(xué)報(bào),1996,24(1):50-52

[7]王英張玉剛戴洪義.蘋果果皮中類黃酮的超聲波輔助提取及穩(wěn)定性研究[J].食品科學(xué),2011,32(11):178-181

[8]林青,林亞平,邱德文.用多指標(biāo)活動(dòng)水平的正交設(shè)計(jì)法對(duì)蘇長(zhǎng)史茱萸湯提取工藝進(jìn)行優(yōu)選[J].中國(guó)藥學(xué)雜志,2004,39(2):182-184

Optimization of Extraction Process for Active Components from Sorbus Leaves

CHAI Jun-hong，HE Ting-ting，JIN Zhi-min，MA Huai-liang，XIAO Jie，ZHANG Ping
（School of Science and Technology，Mu Dan Jiang Teachers College，Mudanjiang157011，Heilongjiang，China）

To establish simultaneous rapid extraction process for flavonoids，polysaccharides，terpene from Sorbus leaves，it is expected to be promoted to active ingredients of Sorbus leaves to provide technology-based. Sorbus leaves was used as raw material，extraction rate of the total flavonoids，polysaccharides，total terpene are technical Index；comparative study on extraction methods，using orthogonal design and comprehensive analysis of multi-index（weight）to study on the effect of the extraction process.The factors affecting the order is：ultrasonic time＞ethanol concentration＞pH（solid-liquid ratio）＞enzyme added.The Optimal process parameters：ultrasonic time was 25 min，50% ethanol concentration，the ratio of 1∶25（g/mL），pH=4，enzyme added 5 g/g.The three main Technical Index of extraction rate has more greatly improved than the traditional extraction method；the 20-times Amplification experiments show that the process was more stable；standard deviations were less than 3%.

Sorbus leaves；flavonoids；polysaccharides；terpene；optimization of process

10.3969/j.issn.1005-6521.2014.03.007

2012-08-21

黑龍江省教育廳科學(xué)技術(shù)研究面上項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：11551514）；黑龍江省教育教學(xué)改革項(xiàng)目，校企聯(lián)合培養(yǎng)制藥專業(yè)實(shí)用人才新模式的研究與實(shí)踐

柴軍紅（1982—），男（漢），講師，碩士，研究方向：天然產(chǎn)物的分離及應(yīng)用研究。