包喜軍，劉文春，葉俊華

（1.公安部南京警犬研究所，江蘇 南京210012；2.公安部南昌警犬基地，江西 南昌330100）

犬瘟熱是犬的急性傳染病之一，本病由犬瘟熱病毒（canine distemper virus，CDV）引起，一年四季發(fā)病，冬春季多發(fā)，該病毒可通過(guò)空氣飛沫傳播、直接或間接接觸傳播等，本病的臨床表現(xiàn)主要包括：精神沉郁，流膿性鼻涕，眼睛分泌物增加，咳嗽，聽(tīng)診肺部有雜音，體溫呈雙相熱型，鼻鏡和足墊角質(zhì)化過(guò)度，部分患犬出現(xiàn)肌肉痙攣和后肢癱瘓等神經(jīng)癥狀[1]。該病毒主要侵害3～6月齡的幼犬，偶見(jiàn)于成年犬，但成年犬多可耐過(guò)，在臨床上老齡犬發(fā)生該病的報(bào)道較少。筆者近期遇到一例10歲犬抽搐的病例，對(duì)該病例除進(jìn)行常規(guī)的膠體金試紙快速診斷外，還進(jìn)行了動(dòng)物回歸試驗(yàn)，上述結(jié)果均證明該病為犬瘟熱。

1 材料

1.1 病例來(lái)源 病例來(lái)自公安部南昌警犬基地犬病醫(yī)院，雜交犬，雌性，10歲，體重約10 kg。

1.2 試劑及儀器 CDV膠體金檢測(cè)試紙（BIO?INDIST），血細(xì)胞分析儀（IDEXX LaserCyte），血液生化分析儀（IDEXX VETTEST）。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物 健康羅威納幼犬10頭，3～6月齡，未免疫，來(lái)自公安部南昌警犬基地。

2 方法

2.1 臨床檢查 問(wèn)診患犬的發(fā)病時(shí)間，檢查患犬的臨床癥狀。

2.2 膠體金試紙快速診斷 用無(wú)菌棉簽蘸取眼睛、鼻分泌物，將棉簽放入裝有稀釋液的樣品管中充分?jǐn)嚢?，用吸管吸取攪拌后的稀釋液，滴?～4滴稀釋液于CDV膠體金檢測(cè)試紙樣品孔中，待10min后觀察結(jié)果。

無(wú)菌采集血液1mL，離心，吸取血清3～4滴滴注于CDV膠體金檢測(cè)試紙樣品孔中，待10min后觀察結(jié)果。

2.3 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn) 常規(guī)采集前肢頭靜脈血，進(jìn)行血常規(guī)和部分生化指標(biāo)檢測(cè)。

2.4 動(dòng)物回歸試驗(yàn) 將10頭幼犬分為兩組，試驗(yàn)一組7頭犬，試驗(yàn)二組3頭犬。

將采集到的患犬的口腔、鼻腔和眼睛分泌物稀釋，將稀釋液直接滴入試驗(yàn)一組幼犬鼻腔，每只犬滴注0.5mL，第二天再滴注一次；試驗(yàn)二組幼犬只滴注生理鹽水。

連續(xù)觀察并記錄兩組犬的臨床癥狀變化，在第5天和第10天分別采集犬鼻腔和眼睛分泌物用CDV膠體金檢測(cè)試紙檢測(cè)分泌物中有無(wú)病毒抗原。

3 結(jié)果

3.1 臨床檢查及快速診斷 來(lái)院就診時(shí)病程已兩日，流膿性鼻涕，眼睛分泌物增加，可視黏膜潮紅，體溫39.6℃，四肢抽搐、不能站立，飲食欲廢絕。

眼睛、鼻腔分泌物CDV膠體金檢測(cè)試紙檢測(cè)呈陽(yáng)性，血液CDV膠體金檢測(cè)試紙檢測(cè)呈陽(yáng)性。

3.2 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn) 血常規(guī)檢查表明炎性細(xì)胞升高（表1），部分生化指標(biāo)結(jié)果表明患犬肝臟功能有異常（表2）。

3.3 動(dòng)物回歸試驗(yàn) 試驗(yàn)一組幼犬在接種后3～5天相繼出現(xiàn)類感冒癥狀，表現(xiàn)為精神沉郁，流鼻涕，眼睛分泌物增加，咳嗽，體溫升高等；在第5天采集所有犬的鼻腔和眼睛分泌物，經(jīng)CDV膠體金檢測(cè)試紙檢測(cè)均呈陰性，在第10天采集所有犬的鼻腔和眼睛分泌物，經(jīng)CDV膠體金檢測(cè)試紙檢測(cè)均呈陽(yáng)性。試驗(yàn)二組幼犬在觀察期內(nèi)無(wú)明顯病理性臨床癥狀；在第5天和第10天采集所有犬的鼻腔和眼睛分泌物，經(jīng)CDV膠體金檢測(cè)試紙檢測(cè)均呈陰性。

表1 患犬血常規(guī)檢查

表2 患犬血液生化檢查

4 結(jié)論

綜合對(duì)患犬的臨床檢查、膠體金試紙快速診斷、實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)和動(dòng)物回歸試驗(yàn)，確診該病例為犬瘟熱。

5 討論

根據(jù)對(duì)發(fā)病機(jī)理的研究，犬瘟熱病毒的潛伏期一般為3～5 d，在病毒的潛伏期內(nèi)，感染犬一般無(wú)明顯臨床癥狀，隨后則出現(xiàn)犬瘟熱典型癥狀，如：出現(xiàn)雙相熱型發(fā)熱，眼、鼻有卡他性或化膿性分泌物，在第二次發(fā)熱表現(xiàn)嘔吐和腹瀉，呼吸道有卡他炎癥，有時(shí)發(fā)展成肺炎，鼻鏡和足墊角質(zhì)化過(guò)度，有神經(jīng)癥狀[1]。在本試驗(yàn)中，試驗(yàn)一組幼犬大部分在接種后3～5 d相繼出現(xiàn)似犬瘟熱的感冒癥狀，本試驗(yàn)結(jié)果證明了CDV可以通過(guò)身體的所有分泌物排到體外，尤其是呼吸道的分泌物，將分泌物對(duì)易感犬實(shí)施各種途徑的試驗(yàn)性接種，均可使犬發(fā)生具有臨床癥狀的感染[1-2]；在用CDV膠體金檢測(cè)試紙對(duì)試驗(yàn)犬分泌物進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，在第5天的分泌物中未檢測(cè)到病毒，在第10天對(duì)分泌物檢測(cè)時(shí)呈陽(yáng)性，表明在第5天時(shí)病毒并未出現(xiàn)在上皮細(xì)胞中，在第10天時(shí)上皮細(xì)胞已有病毒存在，此研究結(jié)果與犬瘟熱病毒在感染后最初主要在淋巴系統(tǒng)中增殖，隨后出現(xiàn)于支氣管淋巴結(jié)、扁桃體內(nèi)和上皮細(xì)胞的研究結(jié)果相一致[1]。

CDV引起的免疫會(huì)持續(xù)時(shí)間很長(zhǎng)，但不會(huì)終生免疫[2]。在本試驗(yàn)中，患犬年齡已達(dá)10歲的老齡犬，問(wèn)診患犬主人，該犬在1歲內(nèi)時(shí)曾進(jìn)行CDV疫苗接種，以后則再未接種該疫苗，在該年齡發(fā)病，表明患犬已無(wú)對(duì)CDV的免疫，由此可見(jiàn)，CDV不會(huì)引起終生免疫的理論是正確的，但具體的免疫保護(hù)期則有待于進(jìn)一步研究。

在犬瘟熱疾病發(fā)展過(guò)程中，病犬的肺可能不被感染，但在致死性病例中，患犬經(jīng)常因?yàn)槔^發(fā)細(xì)菌感染而引起支氣管肺炎[1]，所以當(dāng)發(fā)生感染時(shí)，患犬的血常規(guī)檢查則表現(xiàn)明顯的炎性細(xì)胞增多癥狀，該病例的血常規(guī)呈現(xiàn)炎性細(xì)胞增多，表明患犬已經(jīng)繼發(fā)細(xì)菌感染，所以在對(duì)該病例的治療時(shí)應(yīng)注重考慮炎癥的控制；通常在患犬瘟熱時(shí)，犬的血清學(xué)檢查一般無(wú)特異，在疾病的初期或比較嚴(yán)重時(shí)，會(huì)出現(xiàn)白蛋白降低或球蛋白升高[2]，但在該病例的部分血液生化指標(biāo)檢測(cè)時(shí)出現(xiàn)肝功能指標(biāo)升高的現(xiàn)象，這可能是由于其他疾病所導(dǎo)致，此癥候的出現(xiàn)是否與犬瘟熱具有相關(guān)性需要進(jìn)一步研究。

膠體金試紙快速診斷技術(shù)是一種基于單克隆抗體的膠體金免疫層析診斷技術(shù)，其在與巢式PCR進(jìn)行比較時(shí)，敏感性（89.7%和85.7%）和特異性（94.6%和100%）略低[3]，但因其使用方便、造價(jià)低廉、特異性高、檢測(cè)時(shí)間短等，所以在臨床上得到廣泛應(yīng)用。

[1]殷震，劉景華.動(dòng)物病毒學(xué)[M].2版.北京：科學(xué)出版社，1997：756-762.

[2]施振聲.譯.小動(dòng)物臨床手冊(cè)[M].4版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2004：1096-1098.

[3]Dong-Jun An，Tae-Young Kim，Dae-Sub Song，et al.An immu?nochromatography assay for rapid antemortem diagnosis of dogs suspected to have canine distemper[J].Journal of Virological Meth?ods，2008，147（2）：244-249.