李秋紅 古立翠

黑龍江中醫(yī)藥大學藥學院 150040

和厚樸酚在大鼠體內(nèi)的藥動學

李秋紅 古立翠

黑龍江中醫(yī)藥大學藥學院 150040

本文主要探討和厚樸酚靜脈注射給藥后在大鼠體內(nèi)的動態(tài)變化規(guī)律。我們采用大鼠尾靜脈注射和厚樸酚的方法，用反相高效液相色譜法測定和厚樸酚在血漿、唾液中的濃度，采用藥動學軟件3P97分析數(shù)據(jù)，確定藥動學參數(shù)。

和厚樸酚；藥動學

一、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀

以對生物堿類、黃酮類化合物唾液分布規(guī)律研究為切入點，創(chuàng)建中藥的唾液藥動學研究方法，并以此為模式總結(jié)各中藥有效成分向唾液分布的規(guī)律；利用唾液進行中藥藥動學研究在國內(nèi)外尚為首次。較其它非創(chuàng)傷性采集的樣品（尿、糞、汗等），唾液能直接反映血液中具藥理活性的游離型藥物濃度，唾液的采集更簡便、隨時、易得，尤其在中藥新藥的臨床試驗研究和解決中藥臨床應用的安全性問題時，易于被受試者及患者（特別是嬰幼兒，年老體弱者）接受，這也將開辟中藥臨床藥動學研究中的創(chuàng)新領域——中藥唾液治療藥物監(jiān)測。

以生物堿類、黃酮類成分為代表研究中藥有效成分向唾液中分布的情況，主要內(nèi)容包括化合物的篩選；血液、唾液中生物堿類、黃酮類化合物測定方法的研究；化合物在唾液中分布狀況及生物堿類、黃酮類化合物在唾液與血液中藥動學變化過程。

本文關于和厚樸酚靜脈注射給藥后在大鼠體內(nèi)的動態(tài)變化規(guī)律的研究對上述研究內(nèi)容有著重要的基礎作用，能為研究提供可靠的數(shù)據(jù)保障。

二、和厚樸酚在大鼠體內(nèi)的藥動學研究意義

厚樸為木蘭科植物厚樸(Magnolia off cinalis Rend et Wils)的干皮、根皮或枝皮，性溫味苦辛，無毒，入脾、胃、大腸經(jīng)，能溫中下氣，燥濕消痰。中藥方劑如厚樸三物湯、平胃散、大承氣湯、四七湯和梔子厚樸湯中都含有生藥厚樸，中國藥典2005年版一部中有包括蕾香正氣水、香砂養(yǎng)胃丸、開胸順氣丸、柴胡舒肝丸等20多個常用中成藥的主要原料藥均含厚樸。由于厚樸在傳統(tǒng)中醫(yī)中藥中具有廣泛而又重要的用途，國內(nèi)外學者便對其活性成分和厚樸酚進行了諸多研究。

許多研究表明和厚樸酚具有抗菌及抗病毒、抗炎、調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)、抑制血小板凝集以及抗腫瘤等藥理作用，所以和厚樸酚的藥動學研究對于闡明其作用機理和開發(fā)劑型具有重要的意義。有一些研究關于灌胃給藥后和厚樸酚的血藥濃度研究，但因其口服生物利用度低，只有少量的原型藥物被吸收進入體內(nèi)，因此有必要研究和厚樸酚經(jīng)靜脈給藥后的藥動學。

三、和厚樸酚在大鼠體內(nèi)的藥動學研究方法

1．化學試劑。和厚樸酚標準品購于中國藥品生物制品檢定所（中國，北京）。高效液相色譜純的甲醇購自迪馬公司（美國，迪馬）。其他用于本試驗的試劑為分析純，水為蒸餾水。

2．動物。約12周雄性SD大鼠，體重370-420g（SYXK2009-003黑龍江中醫(yī)藥大學）用于本研究中。

3．儀器及色譜條件。高效液相（LC-2010，島津)配有紫外檢測器、Class-VP色譜工作站。蛇床子素的檢測在室溫下Diamonsil(R) C18150mm×4．6mm)色譜柱上進行，流動相為甲醇：1%冰醋酸水（75：25，v?v-1），流速為0．8mL?min-1，紫外檢測波長設置在254nm，柱溫為25℃。

4．給藥及采樣。大鼠通過勻速泵以3mL?h-1的速度經(jīng)股靜脈勻速注射1mg?mL-1用生理鹽水稀釋的毛果蕓香堿。唾液分泌速度恒定后，經(jīng)頸靜脈給予用溶于聚乙二醇PEG400（20%v）、吐溫-80（10%v），生理鹽水（70%v）稀釋為3mg?mL-1的和厚樸酚30mg?mL-1。血液樣品在給藥前及給藥后3、5、10、15、20、30、45、60、75、90、120、150、180、240min采集于帶肝素離心管中，并立即離心分離的到血漿。腮腺及頜下腺唾液分別于0-10，10-30，30-60，60-90，90-150，150-210min收集與不同離心管中。所有樣品均儲藏在-20℃直至分析。

5．樣品處理。含藥血漿中加入0．4mL甲醇，漩渦混合3min后，離心（10000r/min）10min，取上清液0．4mL，45℃水浴下氮氣吹干后，用流動相200μL溶解，渦旋混合3min，低溫離心（13000r/min）5min，取上清液100μL，血液樣品20μL（唾液樣品50μL）進樣供HPLC分析。

四、和厚樸酚在大鼠體內(nèi)的藥動學研究結(jié)論

靜脈注射和厚樸酚后，和厚樸酚血藥濃度-時間曲線如圖1所示。由圖可知，給藥后和厚樸酚在大鼠體內(nèi)的血藥濃度呈雙指數(shù)冪形式下降。開始時血藥濃度下降得很快然后緩慢下降，表明蛇床子素在大鼠體內(nèi)的分布速度較快。根據(jù)藥-時曲線結(jié)果，經(jīng)3P97軟件計算，AIC法判定大鼠靜脈注射蛇床子素后的藥物動力學過程均屬于二室模型。同時得出主要藥動學參數(shù)如表1所示。從藥動學參數(shù)來看，T1/2α為6．288min，分布速率常數(shù)α為0．110min-1，說明和厚樸酚在大鼠體內(nèi)分布較快。T1/2β為102．980min，血漿中和厚樸酚的消除速率常數(shù)β為0．007min-1，遠大于T1/2α，說明和厚樸酚在體內(nèi)主要以消除過程為主，且消除過程也較快。AUC為1219．2μg?min?mL-1，遠大于陳世忠等研究結(jié)果，原因主要是給藥劑量的不同。

表1 血漿與唾液中和厚樸酚回收率及日內(nèi)和日間精密度（n=6，±s ）

濃度 日內(nèi) 日間(μg·mL-1) 實測值 回收率 RSD 實測值 回收率 RSD (μg·mL-1) (%) (%) (μg·mL-1) (%) (%) 1.00 1.04±0.04 104.00 4.00 1.03±0.06 103.00 6.00血漿 5.00 4.86±0.05 97.20 1.00 4.94±0.14 98.80 2.80 10.00 9.50±0.24 95.00 2.40 10.05±0.46 100.50 4.60 0.50 0.49±0.02 98.00 4.00 0.51±0.03 102.00 6.00唾液1.50 1.48±0.10 98.70 6.70 1.53±0.13 102.00 8.70 3.00 3.04±0.14 101.00 4.70 3.02±0.05 100.70 1.70

[1]姚彤煒．體內(nèi)藥物分析[M]，浙江大學出版社：72．

[2]高華，薛紅利，黃學娣．脂質(zhì)體和厚樸酚治療淋巴瘤的實驗研究[J]．中國實驗血液學雜志．2009．9(13)．329-330．

教育部春暉計劃，項目編號Z2010033

李秋紅，女，教授，碩士研究生導師，研究方向：臨床藥學及中藥藥動學的研究。