林 林，林永強，汪 冰，林 曉，尹寧寧，徐麗華

（山東省食品藥品檢驗研究院，山東濟南250101）

羚羊感冒片質(zhì)量分析

林 林，林永強，汪 冰，林 曉，尹寧寧，徐麗華

（山東省食品藥品檢驗研究院，山東濟南250101）

目的通過對2013年全國范圍內(nèi)抽取的羚羊感冒片進行標準檢驗及探索性研究，對該品種的質(zhì)量及標準狀況作出總體分析與評價。方法針對法定標準檢驗項目不完善的問題，采用高效液相色譜－蒸發(fā)光散射檢測法（HPLC－ELSD）進行山銀花的篩查；采用高效液相色譜法進行金銀花、甘草、連翹、牛蒡子等藥味中多指標性成分的含量同時測定；采用近紅外光譜掃描法建立近紅外光譜庫，為快速檢驗提供依據(jù)。結(jié)果法定標準檢驗與探索性研究結(jié)果之間存在顯著差異。結(jié)論探索性研究結(jié)果表明法定標準存在較多缺陷，應(yīng)進一步完善現(xiàn)行質(zhì)量標準，全面控制產(chǎn)品的質(zhì)量。

羚羊感冒片；質(zhì)量分析；高效液相色譜法

羚羊感冒片由羚羊角、金銀花、連翹、牛蒡子等十味藥組成，具有清熱解表的作用，用于流行性感冒。為全面分析與評價該品種的質(zhì)量狀況及標準可行性，結(jié)合2013年國家評價性抽驗工作，對全國范圍內(nèi)抽取的17個生產(chǎn)企業(yè)共計154批樣品進行標準檢驗及探索性研究。

1 按法定標準檢驗情況

該品種現(xiàn)行質(zhì)量標準為《中國藥典》2010年版（一部），標準基本可行。按照法定標準檢驗，樣品全部合格，合格率為100%。

2 探索性研究

2.1 山銀花的篩查 目前，金銀花藥材市場比較混亂，山銀花摻雜現(xiàn)象時有發(fā)生。為了考察生產(chǎn)企業(yè)是否以符合標準的金銀花投料進行生產(chǎn)，參照《中國藥典》2010年版山銀花藥材及相關(guān)文獻［2～4］，以灰氈毛忍冬皂苷乙為指標，建立了山銀花的HPLC－ELSD檢查方法，并對收集的91批羚羊感冒片樣品進行了篩查。

2.1.1 儀器與試藥 美國Waters 2695－2998高效液相色譜儀；Sartorius CP225D電子天平?；覛置潭碥找覍φ掌酚沙啥计账忌锟萍加邢薰荆枺篜S10020701。乙腈為美國Merck公司生產(chǎn)的色譜純試劑，甲醇為天津康科德生產(chǎn)的分析純試劑，試驗用水為Millipore純化的去離子水。

2.1.2 實驗方法 色譜柱：大連依利特C18（4.6 mm×250 mm，5μm），以水為流動相A，以乙腈為流動相B，按表1進行梯度洗脫，柱溫30℃；蒸發(fā)光散射檢測器檢測。

表1 梯度洗脫程序

2.1.3 對照品溶液的制備 精密稱取灰氈毛忍冬皂苷乙對照品10.24 mg，加50%甲醇溶解并稀釋至50 mL，搖勻，即得到濃度為0.204 8 mg·mL－1的對照品溶液。

2.1.4 供試品溶液的制備 取本品10片，除去包衣，精密稱定，研細，取約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇25 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率500 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.1.5 實驗結(jié)果 91批羚羊感冒片中有8批檢出灰氈毛忍冬皂苷乙，表明部分生產(chǎn)企業(yè)對藥材控制不嚴，存在摻雜使用山銀花的現(xiàn)象。

2.2 金銀花、連翹、牛蒡子等藥味中多指標性成分的含量同時測定 《中國藥典》2010年版（一部）僅對牛蒡子進行了含量測定，金銀花、連翹等主要藥味均未進行含量控制。為了保證企業(yè)使用合格的藥材以及按處方量投料，建立了HPLC法同時測定羚羊感冒片中綠原酸、異綠原酸A、B、C、甘草苷、連翹酯苷A、連翹苷、牛蒡苷、牛蒡苷元等多種指標性成分的含量［5～9］，并對全部154批樣品進行了測定。

2.2.1 儀器與試藥 綠原酸、甘草苷、連翹酯苷A、連翹苷、牛蒡苷對照品由中國食品藥品檢定研究院提供，批號分別為110753－201314、111610－201106、111810－201304、110821－201213、110819－201309。其他同“2.1.1”項下。

2.2.2 實驗方法 色譜柱：Agilent Zorbax SB C18（4.6 mm×250 mm，5μm），以乙腈為流動相A，水為流動相B，按表2中的規(guī)定進行梯度洗脫；流速：1 mL·min－1。采用波長切換技術(shù)，0～21 min，330 nm；21～28.6 min，360 nm；28.6～55 min，280 nm。理論板數(shù)按牛蒡苷峰計算應(yīng)不低于4 000。

2.2.3 對照品溶液的制備 分別精密稱取上述對照品適量，加50%甲醇溶解并稀釋成每1 mL含綠原酸86.56μg、甘草苷53.20μg、連翹酯苷A 52.40 μg、連翹苷46.88μg、牛蒡苷42.40μg的混合溶液，即得。

表2 梯度洗脫程序

2.2.4 供試品溶液的制備 同”2.1.4”項下。

2.2.5 實驗結(jié)果 參考《中國藥典》2010年版（一部）金銀花、甘草、連翹、牛蒡飲片的含量限度，結(jié)合實際測定結(jié)果以及生產(chǎn)工藝，制訂所測成分的含量限度。結(jié)果154批樣品中，56批樣品連翹酯苷A的含量低于限度；12批樣品甘草苷的含量低于限度；90批樣品綠原酸的總含量低于限度。表明生產(chǎn)企業(yè)對生產(chǎn)所用藥材控制不嚴，藥材質(zhì)量較差或者未按規(guī)定處方量投料。

2.3 近紅外分析 儀器：德國布魯克公司Bruker Matrix－F型傅里葉變換近紅外光譜儀。測定方法：對154批樣品逐一掃描，對光譜進行預(yù)處理，通過一階導(dǎo)數(shù)化和矢量歸一化，應(yīng)用馬氏距離方法建立一致性檢驗?zāi)Ｐ?。結(jié)果各企業(yè)生產(chǎn)的產(chǎn)品存在一定的差異性，與中檢院對具體的某“一廠一品一規(guī)”的藥品建立的一致性檢驗?zāi)Ｐ偷囊笙喾稀?/p>

3 討論

3.1 總體評價 通過對羚羊感冒片進行質(zhì)量分析，發(fā)現(xiàn)以下兩方面的問題：①現(xiàn)行標準檢驗項目不完善，應(yīng)進一步進行補充；②部分企業(yè)對原料控制力度不夠，存在以次充好、偷工減料的可能。

3.2 建議 為提高質(zhì)量意識和質(zhì)控水平，以保證羚羊感冒片的安全性和有效性。建議：①在現(xiàn)行標準的基礎(chǔ)上增加山銀花的檢查項以及連翹、甘草、金銀花中指標性成分的含量測定項；②加強監(jiān)督管理；組織對相關(guān)企業(yè)的生產(chǎn)核查。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版（一部）［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：57，160，923.

［2］谷筱玉，陳振鵬，陳乾平，等.HPLC－UV－ELSD測定山銀花中綠原酸、灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙的含量［J］.藥物分析雜志，2011，31（5）：884－887.

［3］張璐，曾文雪.HPLC－ELSD同時測定山銀花中綠原酸、木犀草苷和川續(xù)斷皂苷乙的含量［J］.江西中醫(yī)學院學報，2011，23（4）：40－42. ［4］盧鳳來，蔣海英，陳月圓，等.HPLC－ELSD法測定山銀花中綠原酸、灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙［J］.中成藥，2013，35（8）：1821－1823.

［5］段佳葳，胡齊莉，張婷婷.HPLC法測定羚羊感冒片中牛蒡苷的含量［J］.黑龍江醫(yī)藥，2007，20（4）：299－300.

［6］楊慶勝，張京健，李江華.HPLC測定羚羊感冒片中牛蒡苷和連翹苷的含量［J］.中成藥，2007，29（3）：383－385.

［7］郝洪濤，郝鳳霞.RP－HPLC法測定羚羊感冒片中綠原酸和甘草酸的含量［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學，2008，36（9）：3493－3494.

［8］邱海蘊，袁才瓊，康紅英.RP－HPLC法測定羚羊感冒片中綠原酸的含量［J］.中國藥師，2008，11（10）：1218－1219.

［9］林永強，王淑華，徐麗華，等.金銀花與山銀花的鑒別方法研究［J］.藥學研究，2013，22（2）：69－71.

Quality analysis of Lingyang Ganmao Tablets

LIN Lin，LIN Yong-qiang，WANG Bing，LIN Xiao，YIN Ning-ning，XU Li-hua（Shandong Province Institute for Food and Drug Control，Jinan 250101，China）

ObjectiveTo evaluate the quality situation and problems of Lingyang Ganmao Tablets by testing and analyzing samples collected from drug manufacture and market all over China in 2013.MethodsTo combine the legal test with exploratory research.To inspect Lonicera confusa DC.by HPLC－ELSD；To determine contents of honeysuckle，liquorice，forsythia，burdock by HPLC；To establish NIR spectrum database as the foundation for instant test；To comply statistical analysis for the results of legal testand exploratory research.ResultsTherewere obvious differences between the results of legal test and exploratory research.ConclusionThe results of exploratory research demonstrated thatmany defects existed in the legal drug specifications，and a series of exclusive，accurate，and sensitivemethods should be established to fully control the quality of sodium aescinate for injection.

Lingyang Ganmao Tablets；Quality analysis；HPLC

R927.1

A

2095－5375（2014）09－0514－003

山東省自然科學基金2013（No.R2013HM074）

林林，女，主管藥師，研究方向：藥品檢驗，E－mail：linlinsfda＠163.com