王海英，郭瑞臣

（1.山東大學(xué)藥學(xué)院，山東濟(jì)南250012；2.濟(jì)南市傳染病醫(yī)院，山東濟(jì)南250021；3.山東大學(xué)齊魯醫(yī)院臨床藥理研究所，山東濟(jì)南250012）

國(guó)產(chǎn)與進(jìn)口恩替卡韋的比較研究

王海英1，2，郭瑞臣3

（1.山東大學(xué)藥學(xué)院，山東濟(jì)南250012；2.濟(jì)南市傳染病醫(yī)院，山東濟(jì)南250021；3.山東大學(xué)齊魯醫(yī)院臨床藥理研究所，山東濟(jì)南250012）

目的對(duì)國(guó)產(chǎn)與進(jìn)口恩替卡韋進(jìn)行比較研究，考察其質(zhì)量等同性。方法對(duì)不同廠家恩替卡韋在制劑質(zhì)量、體內(nèi)過(guò)程、臨床療效方面進(jìn)行回顧性分析研究。結(jié)果國(guó)產(chǎn)恩替卡韋在溶出曲線、生物等效性、臨床療效方面與進(jìn)口恩替卡韋片無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論國(guó)產(chǎn)與進(jìn)口恩替卡韋具有質(zhì)量等同性。

恩替卡韋；國(guó)產(chǎn)與進(jìn)口；一致性

恩替卡韋為鳥嘌呤核苷類似物，在體內(nèi)能夠通過(guò)磷酸化成為具有活性的三磷酸鹽，而后與乙型肝炎病毒（HBV－DNA）多聚酶的天然底物三磷酸脫氧鳥嘌呤核苷競(jìng)爭(zhēng)，抑制乙肝病毒多聚酶的合成，從而抑制乙肝病毒前基因組反轉(zhuǎn)錄負(fù)鏈形成、HBV－DNA正鏈合成，最終起到抑制乙肝病毒復(fù)制的作用。

由于恩替卡韋較高的抗病毒活性和較低的耐藥性，目前國(guó)內(nèi)恩替卡韋仿制藥生產(chǎn)廠家較多，但不同廠家因輔料和生產(chǎn)工藝不同，所制片劑晶型、主成分含量、溶出度、穩(wěn)定性以及輔料的不同，可能導(dǎo)致體內(nèi)過(guò)程、效應(yīng)的差異，從而引起臨床療效及安全性的不同，為此需要對(duì)國(guó)產(chǎn)與進(jìn)口恩替卡韋進(jìn)行對(duì)比研究，也為全面評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量提供依據(jù)。

1 制劑質(zhì)量

很多國(guó)產(chǎn)仿制藥品成份中含不同添加劑及內(nèi)在成份物質(zhì)，此有別于原研進(jìn)口藥廠的藥物，對(duì)于國(guó)產(chǎn)與進(jìn)口藥品，應(yīng)進(jìn)行多層面的質(zhì)量對(duì)比研究，主要內(nèi)容包括原料藥生產(chǎn)工藝研究、結(jié)構(gòu)確證研究、制劑處方工藝研究、質(zhì)量研究和穩(wěn)定性研究等。如對(duì)自制恩替卡韋分散片（北京）與博路定（進(jìn)口恩替卡韋片）在含量、有關(guān)物質(zhì)及溶出曲線的研究發(fā)現(xiàn)，恩替卡韋分散片在制備過(guò)程中并沒有產(chǎn)生新的有關(guān)物質(zhì)，且雜質(zhì)總量控制得比較嚴(yán)格。在相同條件下，自制分散片溶出速率比進(jìn)口恩替卡韋片快，溶出曲線趨勢(shì)相一致［1］。

通過(guò)比較進(jìn)口原研和國(guó)產(chǎn)仿制的恩替卡韋原料藥以及4種恩替卡韋制劑（進(jìn)口A制劑和國(guó)產(chǎn)B、C、D制劑）的穩(wěn)定性發(fā)現(xiàn)，國(guó)產(chǎn)與進(jìn)口原料藥的穩(wěn)定性相似；幾種恩替卡韋制劑的穩(wěn)定性有不同程度的差異。進(jìn)口A制劑的穩(wěn)定性顯著優(yōu)于其他幾種制劑［2］。

根據(jù)患有該疾病的不同人群體內(nèi)環(huán)境的差異，利用模擬人體消化道內(nèi)體液的4種基本介質(zhì)對(duì)自制恩替卡韋片劑與博路定進(jìn)行試驗(yàn)研究，結(jié)果各溶出介質(zhì)條件下輔料均不干擾本品溶出度的測(cè)定，恩替卡韋在各溶出介質(zhì)8 h內(nèi)穩(wěn)定。在以上4種溶出介質(zhì)中，5 min時(shí)自制制劑與對(duì)照制劑的溶出度均大于85%，體外溶出度基本一致［3］。

有效成分含量是保證制劑質(zhì)量的關(guān)鍵，已有采用高效液相色譜法直接測(cè)定恩替卡韋膠囊含量［4］的研究。

2 體內(nèi)過(guò)程

2.1 方法 體格檢查及血、尿常規(guī)等檢查均正常的健康志愿者，按隨機(jī)雙交叉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，空腹口服恩替卡韋受試制劑或參比制劑規(guī)定劑量，問隔1周、3周或4周后交換服用另一種恩替卡韋制劑。采用LC－MS／MS法［5，6］以及HPLC－MS／MS法［7］測(cè)定恩替卡韋血藥濃度，計(jì)算相應(yīng)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，評(píng)價(jià)恩替卡韋受試制劑以及參比制劑的生物等效性。

2.2 結(jié)果 不同企業(yè)制劑、不同研究藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)與參比制劑相比基本相似。同為分散片受試制劑（江蘇）的Cmax略有提高，Tmax略有提前，而江西的無(wú)顯著性差異。但不同產(chǎn)地國(guó)產(chǎn)恩替卡韋與對(duì)照進(jìn)口制劑相比，均具有生物等效性，結(jié)果見表1。

表1 國(guó)產(chǎn)與進(jìn)口恩替卡韋的生物等效性研究

3 臨床療效

3.1 方法 隨機(jī)設(shè)立兩個(gè)組，試驗(yàn)組為國(guó)產(chǎn)恩替卡韋，對(duì)照組為進(jìn)口恩替卡韋，兩組臨床資料具有可比性，進(jìn)行24周或48周的臨床療效觀察，對(duì)比研究國(guó)產(chǎn)與進(jìn)口恩替卡韋在臨床療效方面的差異。

3.2 結(jié)果 不同產(chǎn)地國(guó)產(chǎn)恩替卡韋與進(jìn)口對(duì)照組相比，在ALT復(fù)常率、HBV－DNA抑制率、HBeAg轉(zhuǎn)陰率、HBeAg／HBeAb轉(zhuǎn)換率方面效果顯著，試驗(yàn)組與對(duì)照組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，結(jié)果見表2。

表2 恩替卡韋治療乙型肝炎臨床療效對(duì)比研究

4 討論

恩替卡韋臨床上用于HBV活動(dòng)性復(fù)制和血清學(xué)或肝組織學(xué)炎癥指標(biāo)的成年慢性乙肝患者，在細(xì)胞內(nèi)作用半衰期為15 h，在人體內(nèi)不被肝細(xì)胞代謝，主要從腎臟排出體外。有很強(qiáng)的抗HBV能力，一年治療便可使67%HBeAg陽(yáng)性和90%HBeAg陰性患者達(dá)到HBV－DNA不可檢測(cè)，而毒性相對(duì)較低，且有良好的安全性與耐受性。到目前為止，尚未發(fā)現(xiàn)1例藥物相關(guān)的嚴(yán)重不良事件。國(guó)產(chǎn)恩替卡韋的上市，解決了患者的經(jīng)濟(jì)問題，使越來(lái)越多的患者能夠得到有效的治療。但國(guó)產(chǎn)藥品是否能代替進(jìn)口藥品，二者之間是否具有質(zhì)量等同性，是大家一直關(guān)注的問題。

通過(guò)對(duì)文獻(xiàn)中幾個(gè)廠家恩替卡韋的研究，發(fā)現(xiàn)國(guó)產(chǎn)藥與進(jìn)口藥的溶出曲線相一致，各溶出介質(zhì)條件下輔料均不干擾本品溶出度的測(cè)定，體外溶出度基本一致，有的廠家分散片溶出速率比進(jìn)口恩替卡韋片快。但穩(wěn)定性方面國(guó)產(chǎn)藥略遜于進(jìn)口藥。體內(nèi)過(guò)程方面，國(guó)產(chǎn)與進(jìn)口恩替卡韋生物等效，有的國(guó)產(chǎn)分散片的吸收速率比進(jìn)口制劑略快。臨床研究表明在血清ALT復(fù)常率、HBV－DNA抑制率、HBeAg轉(zhuǎn)陰率、HBeAg／HBeAb轉(zhuǎn)換率方面國(guó)產(chǎn)恩替卡韋與進(jìn)口相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

國(guó)產(chǎn)恩替卡韋上市時(shí)間比較短，相應(yīng)的研究文獻(xiàn)也比較少。由于恩替卡韋微量即可起作用，微小的差異可能帶來(lái)療效上的明顯不同，因此尚需對(duì)原料藥晶型及穩(wěn)定性、有效成分、含量均勻度、溶出情況、生物利用度等影響藥物質(zhì)量的因素進(jìn)行更深入的研究。恩替卡韋有3個(gè)手性中心，可能產(chǎn)生多個(gè)異構(gòu)體，鑒于有機(jī)分子立體結(jié)構(gòu)與生物活性的特殊關(guān)系，因此生產(chǎn)過(guò)程中必須嚴(yán)格控制其它異構(gòu)體的含量［11］。晶型的不同，可能導(dǎo)致藥物的溶解度及穩(wěn)定性有可能不同。分散片是遇水迅速崩解形成均勻混懸液的片劑，與普通片劑和膠囊等其他口服固體制劑相比，具有崩解時(shí)間短、吸收快、生物利用度高等優(yōu)點(diǎn)，可吞服及在水中分散后服用。國(guó)內(nèi)仿制恩替卡韋藥品大多采用此劑型。研究發(fā)現(xiàn)有的恩替卡韋分散片溶出速率與吸收速率高于進(jìn)口恩替卡韋片，但有的卻沒有顯出這方面的優(yōu)勢(shì)。這有實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方面的問題，與藥品質(zhì)量也密切相關(guān)，可以認(rèn)為國(guó)產(chǎn)不同廠家恩替卡韋在質(zhì)量上存在差異。生物等效性的研究也只局限于健康受試者單劑量給藥，尚缺乏針對(duì)乙肝患者的研究，國(guó)外已有恩替卡韋在乙肝患者的藥動(dòng)學(xué)研究［12］。國(guó)產(chǎn)藥在原輔材料、工藝水平、技術(shù)條件、質(zhì)量管理等方面，與進(jìn)口藥品存在一定差異，但這種差異在療效上有多大的反映，尚缺乏循證醫(yī)學(xué)的證據(jù)。還須繼續(xù)對(duì)國(guó)產(chǎn)仿制藥品在肝病治療中的長(zhǎng)期安全性，抗病毒療效，耐藥發(fā)生率水平，患者依從度等進(jìn)行歸納總結(jié)。目前認(rèn)為耐藥不僅與抑制病毒的速度和強(qiáng)度有關(guān)，基因屏障和藥物動(dòng)力學(xué)屏障也是產(chǎn)生耐藥的重要因素［13］。

綜上所述，為保證國(guó)產(chǎn)仿制藥的安全性及有效性，必須對(duì)其在制劑質(zhì)量及體內(nèi)過(guò)程方面進(jìn)行系統(tǒng)的研究。

［1］韓晉，易毛，吳榮榮，等.恩替卡韋分散片的處方工藝研究［J］.中國(guó)藥學(xué)雜志，2009，44（22）：1718－1722.

［2］陳倩，杜光.幾種恩替卡韋制劑的穩(wěn)定性研究［J］.中國(guó)藥學(xué)雜志，2012，47（14）：1129－1133.

［3］李瑞芳，程秀民.自制恩替卡韋片與上市對(duì)照制劑體外溶出度對(duì)比研究［J］.藥物分析雜志，2011，31（7）：1333－1336.

［4］張蓮蓮.恩替卡韋膠囊的含量測(cè)定［J］.海峽藥學(xué)，2007，19（10）：78－79.

［5］林琳，馬忠英，喬逸，等.2種恩替卡韋制劑的人體生物等效性研究［J］.中國(guó)藥房，2011，22（46）：4358－4360.

［6］丁瑩，宋敏，史香齡，等.恩替卡韋分散片的健康人體相對(duì)生物利用度及生物等效性研究［J］.中國(guó)新藥雜志，2010，19（7）：590－594.

［7］郝光濤，梁宇光，曲恒燕，等.健康志愿者恩替卡韋分散片的生物等效性研究［J］.中南藥學(xué)，2010，8（9）：669－672.

［8］丁晉彪，李躍旗，周越塑，等.恩替卡韋分散片治療慢性乙型肝炎臨床研究［J］.傳染病信息，2010，23（3）：168－171.

［9］李青.國(guó)產(chǎn)恩替卡韋治療初治HBeAg陽(yáng)性慢乙肝患者24周的早期臨床療效觀察［J］.中國(guó)醫(yī)療前沿，2011，6（17）：20.

［10］朱姍薇.恩替卡韋分散片治療HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎近期效果觀察與經(jīng)濟(jì)學(xué)分析［J］.華北國(guó)防醫(yī)藥，2010，22（6）：529－530.

［11］許晉星.HPLC法測(cè)定恩替卡韋分散片的異構(gòu)體［J］.中國(guó)藥房，2009，20（22）：1741－1742.

［12］Zhu M，Bifano M，Xu X，eta1.Lack of an effectof human immunodeflciency virus coinfection on the pharmacokinetics of entecavir in hepatitis B virus－infected patients［J］.Antimicrob Agents Chemother，2008，52（8）：2836－2841.

［13］成軍.乙型肝炎病毒學(xué)研究存在的問題及對(duì)策［J］.中華肝臟病雜志，2007，15（2）：131－132.

Comparative study on the domestic and im ported entecavir

WANG Hai-ying1，2，GUO Rui-chen3
（1.School of Pharmaceutical Sciences，Shandong University，Jinan 250012，China；2.Jinan Infectious Hospital，Jinan 250021，China；3.Institute of Clinical Pharmacology，Qilu Hospital of Shandong University，Jinan 250012，China）

ObjectiveTo compare the study of the domestic and imported entecavir and investigate the quality equivalence.M ethodsDifferentmanufacturers of entecavir in preparation quality，pharmacokinetics，clinical efficacy were retrospectively analyzed.ResultsThere was no statistical difference between domestic and imported entecavir on dissolution curve，bioequivalence and clinical effect.ConclusionDomestic and imported entecavir was equality.

Entecavir；Domestic and imported；Equality

R927.1

A

2095－5375（2014）02－0100－003

王海英，女，副主任藥師，研究方向：醫(yī)院藥學(xué)，E－mail：why0531＠126.com

郭瑞臣，男，博士生導(dǎo)師，研究方向：藥理學(xué)，Tel：0531－82169636，E－mail：grc7636＠126.com