盧婉怡

姜黃素的抗氧化研究

盧婉怡

本文研究三種不同水平姜黃素對奧尼羅非魚抗氧化能力的影響。對照組投喂基礎日糧，試驗組投喂在基礎日糧的基礎上分別添加200、500和800 mg/kg姜黃素的日糧。分別采集背肌、肝臟、腸道、腸系膜和血清樣品。測定分析谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。研究結果表明：添加適量的姜黃素，提高了羅非魚肌肉、肝臟和血清的GSH-Px和SOD的活性。

姜黃素；生物學功能 ；抗氧化

姜黃素(Curcumin)是從中草藥姜黃中提取的一類多效的天然活性物質，具有特殊的生理功能，表現(xiàn)為具有抗炎、抗氧化、清除氧自由基、抗過氧化脂質損傷、抗衰老、抗纖維化、保護肝臟和腎臟等作用。目前姜黃已被世界衛(wèi)生組織/食品藥品管理局(WHO/FAD)批準為天然食品添加劑[1]。

Motterlini等[2]研究表明，姜黃素具有體內外的抗氧化活性，其機制主要是使肝內環(huán)氧化物水解酶(epoxide hydrolase，EH)、谷胱甘肽S轉移酶(glutathione s-transferase，GST)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)的活性增加。從姜黃根草中分離純化到幾種天然抗氧化組分，結果發(fā)現(xiàn)它們具有非常優(yōu)越的清除自由基活性[3]。Huang等[4]指出姜黃素不僅在食品體系顯出很強的抗氧化活性，而且在身體內也顯出較強的抗氧化性。趙革平等[5]進行了姜黃醇提取物對抗體外LDL氧化修飾作用的研究，表明姜黃醇提取物是一有效的抗氧化劑,抗氧化作用強于β-胡蘿卜素和生育酚。

1 材料與方法

1.1 試驗用魚及試驗設計 試驗選用的奧尼羅非魚(Mossabica tilapia)，由廣州市白云區(qū)太和良種魚苗場提供。試驗魚暫養(yǎng)兩周，期間投喂對照組的基礎日糧。暫養(yǎng)結束后，選擇無病態(tài)、體格健壯、活動力強、平均(49.71±1.58)g的雄性奧尼羅非魚240尾隨機分為四組，其中一組為對照組，三組為試驗組，每組設三個平行，每個平行20尾。對照組投喂基礎日糧，試驗組分別投喂含200 mg/kg、500 mg/kg和800 mg/kg姜黃素的日糧。

1.2 試驗日糧 試驗日糧的原料和預混料來自廣州市日糧研究所，姜黃素購于Hangzhou Greensky Biological Tech Co. Ltd.，產(chǎn)品編號：GS060722。每種日糧原料均粉碎過40目篩，按配方充分混勻后用絞肉機加工成直徑1.0 mm的顆粒日糧，風干，冰箱中密封保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 試驗采樣 試驗為期60 d。每隔15 d采樣一次，共采樣4次。每個平行分別隨機抽取4條魚，于背鰭下端無血無皮處取魚肌肉，于肝胰臟靠中間一段取魚肝臟，于魚腸上取下脂肪和取去脂后的全部腸道，-73℃保存?zhèn)溆?；于尾鰭上部側線鱗下面靜脈采血并離心分離出血清，-20℃保存?zhèn)溆?。其中肌肉、肝臟和腸道，按重量體積比1：4，加入預冷生理鹽水，在冰浴條件下4000r/min勻漿3 min，吸取上清液保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 分析指標與方法

1.4.1 抗氧化指標的分析 測定羅非魚血清、肝臟和肌肉的GSH-Px和SOD酶的活性。GSH-Px、SOD酶活性的具體分析原理和方法按照南京建成生物工程研究所試劑盒說明書進行，用日立KY2000型半自動生化分析儀測定。

1.4.2 姜黃素對羅非魚抗氧化能力的影響

1.4.2.1 姜黃素對羅非魚機體GSH-Px活力影響 從統(tǒng)計分析中可以看到，肌肉GSH-Px指標中，在試驗期15 d的200 mg/kg和500 mg/kg 試驗組、30 d的500 mg/kg和800 mg/kg試驗組、45 d的各試驗組以及60 d的800 mg/kg試驗組的GSH-Px活力都高于對照組，且第15 d的500 mg/kg和60 d的800 mg/kg試驗組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；肝臟GSH-Px指標中，除了45 d的200 mg/kg和500 mg/kg 試驗組，其他試驗組的GSH-Px活力都高于對照組，且60 d的800 mg/kg試驗組與對照組相比較，顯著地高于對照組的酶活力(P<0.05)；血清GSH-Px指標中，15 d的500 mg/kg和800 mg/kg試驗組、45 d的500 mg/kg和800 mg/kg試驗組以及60 d的200 mg/kg試驗組的GSH-Px活力也都高于對照組，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；且其他少數(shù)的肌肉、肝臟和血清的試驗組酶活力略低于對照組，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。上述結果表明：日糧中添加不同量的姜黃素有提高羅非魚肌肉的GSH-Px活力的趨勢，且500 mg/kg和 800 mg/kg添加劑量效果顯著；也有提高羅非魚肝臟的GSH-Px活力的趨勢，且800 mg/kg添加劑量效果顯著；姜黃素對血清GSH-Px活力的影響不太顯著。

1.4.2.2 姜黃素對羅非魚機體SOD活力的影響 從統(tǒng)計分析中可以看到，肌肉SOD指標中，試驗第15 d時，各試驗組肌肉中SOD活力均高于對照組，且800 mg/kg試驗組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而500 mg/kg試驗組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；試驗期第30 d的200 mg/kg和 800 mg/kg試驗組、45 d的500 mg/kg試驗組以及60 d的500 mg/kg和 800 mg/kg試驗組的SOD活力也均高于對照組，且800 mg/kg劑量試驗組與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。肝臟SOD指標中，除了15 d的200 mg/kg試驗組、45 d的200 mg/kg和 800 mg/kg試驗組以及60 d的200 mg/kg和 500 mg/kg試驗組的SOD活力低于對照組，且差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)外，其余各試驗組的SOD活力均高于對照組，且試驗期60 d的800 mg/kg試驗組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。在試驗第30 d時，各試驗組血清中SOD活力均高于對照組，且800 mg/kg試驗組顯著高于對照組(P<0.05)，而 500 mg/kg試驗組顯著高于對照組(P<0.05)；其他試驗期的各試驗組的血清SOD活力與對照組相比差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。上述結果表明：日糧中添加不同量的姜黃素有提高羅非魚機體的SOD活力的趨勢，且500 mg/kg和 800 mg/kg劑量試驗組對肌肉、800 mg/kg劑量試驗組對肝臟SOD活力的提高作用顯著。

2 結果與討論

動物細胞生存需要適當?shù)难趸涂寡趸胶?，當大量自由基產(chǎn)生，超過機體的抗氧化能力時，就會造成氧化損傷[6]。病理或應激狀態(tài)產(chǎn)生的大量自由基中作用最廣的是氧自由基，氧自由基可攻擊體內不飽和脂肪酸鏈的雙鍵部位造成的脂質氧化，是魚類發(fā)病的主要原因[7]。因此對魚類的細胞膜而言，防止不飽和脂肪酸的發(fā)生和脂質過氧化具有極其重要的意義。

添加不同量的姜黃素與對照組相比能提高羅非魚機體的GSH-Px和SOD活性，有利于對H2O2、活性氧和脂質氫過氧化物等的清除，從而間接降低脂質過氧化損傷。添加量中，800 mg/kg組效果最為顯著，500 mg/kg組次之，200 mg/kg組效果一般。

[1] 劉兆金,黃瑞林,印遇龍,等.姜黃素的營養(yǎng)生理作用綜述.安徽農(nóng)業(yè)科學,2006,34(7):1287-1288,1291.

[2] Motterlini R,Foresti R，Bassi R,et al. Curcumin,an antioxidant and anti-inflammatory agent,induces hemeoxygeuase-1 and protests endothelial cells against oxidative stress.Free Radic Biol Med,2000,28(8):1303-1312.

[3] 朱曉薇.姜黃的藥理作用.國外醫(yī)藥植物藥分冊,1999,14(2):58-61.

[4] Huang M T.Phenolic compounds in food and cancer preprevention. American Chemical Society,1992:8-34.

[5] 趙革平,洪行球,李萬里.姜黃醇提取物對抗體外LDL氧化修飾作用的研究.浙江中醫(yī)學院學報,1999,23(4):27-28.

[6] Jos A,Pichardo S,Prieto A I,et al.Toxic cyanobacterial cells containing microcystins induce oxidative stress in exposed tilapia fish under laboratory conditions. Aquatic Toxicology,2005(72):261-271.

[7] 劉媛,王安利,王維娜,等.不飽和脂肪酸對魚類免疫功能的影響.水利漁業(yè),2005,25(5):92-94.

Research on antioxidation of curcumin

LUWan-yi.

DepartmentofPharmaceutical,GuangdongFoodandDrugVocationalSchool,Guangzhou510663,China

To study the effect of three different levels of curcumin on antioxidation of hybrid tilapias.Hybrid tilapias were fed diets supplemented with 200,500 and 800mg/kg curcumin respectively, the sample of muscle, liver, intestine, mesenteric and serum of hybrid tilapias were collected, and the effect of curcumin on the activities of glutathione peroxidase (GSH-Px), Superoxide dismu-tase (SOD). Supplementation with curcumin can enhance the antioxidation.

Curcumin; Biological function; Antioxidation

510663廣東省食品藥品職業(yè)技術學校制藥系