于瑞豐

（哈爾濱卓普科技有限公司，黑龍江哈爾濱150001）

0 引言

隔離器是防御微生物污染的屏障系統(tǒng)，是隔離實驗動物飼養(yǎng)和實驗的有效屏障，其主要分為2種，一種是正壓隔離器，另一種是正/負(fù)壓隔離器。實驗動物的生產(chǎn)繁殖主要采用正壓隔離器，正/負(fù)壓隔離器則可以正壓使用，也可以負(fù)壓使用，然而進行感染動物實驗均必須使用負(fù)壓。

SPF隔離器是培育和飼養(yǎng)高標(biāo)準(zhǔn)和高質(zhì)量無菌禽類的重要設(shè)施，也是臨床醫(yī)學(xué)、實驗醫(yī)學(xué)以及工業(yè)科學(xué)等領(lǐng)域研究中不可缺少的設(shè)備之一。其中，SPF不銹鋼雞隔離器是一種正/負(fù)壓隔離器，因其空間小，每個隔離器只能做1組動物實驗，彼此之間互不干擾，所以在獸用生物制品染毒動物實驗過程中得到了廣泛應(yīng)用。

1 隔離器的工作原理

隔離器分為用于維持無菌性的無菌隔離器和用于密封危害物質(zhì)的密封隔離器，但是二者的結(jié)構(gòu)基本是相同的。無菌隔離器多用于正壓管理，密封隔離器多用于負(fù)壓管理。對于無菌隔離器，在生產(chǎn)過程中需要利用手套箱進行必要的操作，使用時不允許開啟隔離器的小門。由于內(nèi)部是正壓管理，所以一旦內(nèi)部進行滅菌，因外部環(huán)境微生物而引起污染的風(fēng)險是極低的。在內(nèi)部正壓的管理下，可長時間維持無菌性。目前，無菌隔離器大部分采用過氧化氫氣體滅菌的方式來實現(xiàn)無菌性，而過氧化氫滅菌分為干式滅菌和濕式滅菌2種。

隔離器技術(shù)應(yīng)用先進的完全屏蔽雙門快速傳遞技術(shù)和密封艙自動滅菌技術(shù)，從而保持了一個持續(xù)高效的無菌空間，無菌實驗環(huán)境的高潔凈度要求得以保證。隔離器利用隔離器技術(shù)有2個目的：一是它可以保護產(chǎn)品免遭來自環(huán)境的污染，包括來自操作人員在過濾和密封時帶來的污染；二是保護操作人員免遭在生產(chǎn)過程中有害物質(zhì)和有毒物質(zhì)帶來的傷害。

隔離器技術(shù)的原理：把無菌的物品（動植物、容器、產(chǎn)品等）放入一個無菌的環(huán)境中，由于沒有操作人員進入隔離器，也沒有非無菌物品帶入隔離器，這些物品在整個加工過程中能夠始終保持無菌性。隔離器屏障是一個絕對屏障，它不允許在受到保護的物品和未受到保護的環(huán)境之間進行交換。隔離器既可以用物理密封阻隔外部污染物的進入，也可以用保持內(nèi)部正壓的方法達到有效密封的目的。操作人員通過穿戴手套、防護服對物品進行熟練的操作。所有進入隔離器的空氣通過高效微粒空氣過濾器或UPLA過濾。排出空氣的典型出口是通過一個HEPA級過濾器過濾，通常使用過氧化氫蒸汽對隔離器組件的內(nèi)部環(huán)境進行表面滅菌。隔離器內(nèi)部和所有物品的無菌化程度通常要進行驗證，確保無菌度達到10-6級。

2 SPF隔離器的結(jié)構(gòu)

SPF隔離器的結(jié)構(gòu)如圖1所示。

2.1 上箱體

圖1 SPF隔離器的結(jié)構(gòu)

上箱體前后兩側(cè)裝有有機玻璃操作觀察窗，每一面觀察窗下方均設(shè)有3只長臂手套，便于2個人面對面協(xié)同操作。側(cè)面安裝了進風(fēng)和排風(fēng)過濾器，隔離器上安裝風(fēng)機，左側(cè)有一個傳遞窗和電源控制板。

2.2 下箱體

下箱體左面的下垂部分設(shè)有一對長袖手套，主要是用于清理糞便。另外，還設(shè)有開啟/關(guān)閉的傳遞口，用于傳遞廢棄物和糞便。在此部分的底部設(shè)有1個閥門，用于排放因操作失誤或飲水器泄露的積水。下箱體的右面突起裝有支架，主要用于安裝薄膜（每周清糞2次）。

在上、下箱體之間根據(jù)需要可放置動物行走的底網(wǎng)。

2.3 活動支架

活動支架帶有4個方向膠輪（其中2個帶剎車），便于在室內(nèi)移動隔離器或?qū)⒏綦x器置于適合的操作位置。

2.4 傳遞窗門

隔離器通過傳輸通道殺菌器可以直接將無菌的培養(yǎng)基、無菌的裝備、無菌的動物等傳遞進隔離系統(tǒng)。傳遞窗門可以把2個隔離器彼此相連，無菌的物品就能夠從一個隔離器傳遞到另一個隔離器。通過密封固件，將傳遞倉的非無菌表面連接。通過壓緊橡膠密封條來保證氣密性，避免微生物進入。

3 SPF隔離器的使用方法

3.1 使用前準(zhǔn)備

隔離器在使用前應(yīng)按下列程序進行熏蒸消毒：（1）將已安裝好的隔離器風(fēng)機取下，隔離器進出口均用塑料膜封好；（2）將需要熏蒸的備用物品、飲水管、飲水器、甲醛溶液等通過傳遞窗放入隔離器內(nèi)；（3）投入使用前24h打開風(fēng)機，使隔離器內(nèi)環(huán)境保持潔凈度A級。

3.2 安裝

將所有部件組裝在一起，并用膠帶密封。長袖手套的套袖要用膠帶固定在手套套桶上。在下箱體廢棄物傳遞窗的套筒上，應(yīng)套上一個特制的塑料袋，并用膠帶密封固定。在固定出糞口下底板前，應(yīng)將塑料薄膜卷拉伸到出糞口附近，并檢查出廢水的閥門是否漏水。進排風(fēng)高效過濾器在出廠前已檢測，只需將其平穩(wěn)地放在高效過濾器盒內(nèi)，將箱體四面的搭扣扣好即可使用。上箱體右側(cè)為進風(fēng)口，左側(cè)為排風(fēng)口。在排風(fēng)過濾器盒的下面還需安裝活動初效過濾板，并在使用過濾中視隔離器內(nèi)的粉塵情況，隨時更換保護高效過濾器。

風(fēng)機的安裝要按照正壓飼養(yǎng)或負(fù)壓飼養(yǎng)選擇安裝的方向。如用正壓飼養(yǎng)，則將風(fēng)機的出口安在進風(fēng)過濾器盒上；如進行負(fù)壓飼養(yǎng)，則將風(fēng)機的吸風(fēng)口安在排風(fēng)過濾器盒上。風(fēng)機安好后，均需要用膠帶固定封閉。如該設(shè)備采用管道送風(fēng)或排風(fēng)，則將該設(shè)備的進/排風(fēng)口與進/排風(fēng)管連接。

電源控制板安裝就位后，打開風(fēng)機、照明和采暖燈具開關(guān)，測試風(fēng)機和燈光是否完好。本隔離器還設(shè)有控溫儀，可任意調(diào)節(jié)所需溫度。

將飲水盒裝滿酸化水后放到頂部固定位置上，將輸水膠管與隔離器內(nèi)的飲水器連接，打開出水龍頭，檢查漏水與否。

3.3 物品傳遞

進出隔離器的物品均應(yīng)通過物品傳遞窗，并嚴(yán)格實行無菌操作。

3.3.1 物品進入

打開傳遞窗外門，放入帶外包裝的已消毒物品，關(guān)閉外門。打開傳遞窗上的消毒液口，往里噴入消毒液后關(guān)閉該噴口，靜置20min。打開傳遞窗內(nèi)門，通過上箱體的操作手套將物品放入隔離器內(nèi)，再關(guān)閉內(nèi)門。對于無外包裝，但能耐受消毒液的物品，在進入前，對物品進行清潔處理后置入傳遞窗內(nèi)，噴射消毒液后方可傳入。

3.3.2 物品傳出

先打開內(nèi)門，將需傳出物品放入傳遞窗后，關(guān)閉內(nèi)門。打開傳遞窗消毒液噴口，噴入消毒液后關(guān)閉噴入口，靜置20min。再打開外門，取出物品。物品取出后，將傳遞窗進行清潔處理，處理后關(guān)閉外門，通過消毒液噴口噴射消毒液。

3.4 清糞

先在出糞口處套上塑料袋，用專用膠帶封嚴(yán)。打開消毒口噴入消毒液，將消毒孔旋緊封嚴(yán)，靜置20min。然后打開糞便出口密封門，將糞卷推入出口的塑料袋內(nèi)，關(guān)閉密封門，經(jīng)消毒孔噴入消毒液，閉合20min，而后可以取下。

3.5 隔離器消毒

可直接在玻璃器皿內(nèi)加入高錳酸鉀、甲醛溶液放在隔離器內(nèi)，使二者混合產(chǎn)生氣體進行消毒。消毒時一般密閉靜置24h以上。消毒完畢后打開風(fēng)機，排風(fēng)24h再切斷電源穩(wěn)妥地取下風(fēng)機、隔離器兩端的高效濾器和其他材料。然后，將隔離器送入清洗間，摘下袖套和糞便托盤以及糞便塑料薄膜卷，用高壓清洗機清洗。拆下高效過濾器，用洗滌劑等水浴液浸泡數(shù)小時后，用清水洗滌晾干待用。取下的濾器、風(fēng)機、糞便塑料薄膜，切忌用水清洗或沾染其他液體，以免受損。一般情況下高效過濾器連續(xù)使用約1年需更換1次。

4 使用SPF隔離器的注意事項

隔離器的使用環(huán)境要求SPF設(shè)施可分為屏障系統(tǒng)內(nèi)和屏障系統(tǒng)外。屏障系統(tǒng)內(nèi)的空氣處理潔凈度為A級，一切進入屏障內(nèi)的動物和物品均應(yīng)達到微生物控制標(biāo)準(zhǔn)。隔離器的外部環(huán)境對動物試驗以及隔離器的使用壽命都有一定影響，要保持隔離器的使用環(huán)境，需做到以下幾點：

（1）非工作人員不準(zhǔn)隨便進出隔離器房舍，工作人員進出時必須更換工作服、工作帽等，工作服應(yīng)定期進行消毒。

（2）房舍內(nèi)禁止一切帶有灰塵的東西，房舍內(nèi)地面、墻壁、隔離器外表面及必備物品保持清潔、無灰塵，隔離器及房舍內(nèi)物品擺放整齊。

（3）房舍內(nèi)應(yīng)定期或不定期進行消毒，同時保持房舍內(nèi)空氣新鮮。

在使用隔離器時還需要注意以下幾點：

（1）有機玻璃隔離操作觀察避免在紫外線下長時間照射，有機玻璃表面不得使用腐蝕性清潔劑，不得用丙酮、三氯甲烷等有機溶劑擦洗其表面，不得用鋼絲球之類堅硬粗糙物質(zhì)擦拭其表面，可以使用氨類專用消毒液或洗滌靈等。

（2）隔離器高效過濾器有一定的使用期限，一般可使用1年左右，如果粉塵少，使用期限可稍長。高效過濾器應(yīng)防火、防水、防潮，不用時密閉放置干燥處，更換高效過濾器時應(yīng)關(guān)閉前后風(fēng)門。

（3）應(yīng)定期清洗自動飲水器。SPF雞引用的是酸化水，酸化水可以抑制細(xì)菌生長，但不能殺滅細(xì)菌。所以，自動飲水器要經(jīng)常清洗，以免引起飲水管的堵塞，造成漏水，長期使用容易引起細(xì)菌生長。

（4）視通風(fēng)情況，定期更換排風(fēng)口過濾器的初效濾板。內(nèi)部加熱燈及消毒加熱器使用時不得離兩側(cè)窗及其他非耐熱物品太近。

（5）隔離器有風(fēng)門拉板太緊的現(xiàn)象，旋出限位螺釘，拔出拉板，在其表面涂抹硅油即可解決問題，千萬不要涂抹機油！

（6）隔離器上下主體的接口是靠膠帶連接并密封的，除粘接時要特別仔細(xì)外，在使用中還要經(jīng)常檢查。重要實驗或?qū)ｉT管理隔離器時可在外門栓右側(cè)孔上加鎖。

5 結(jié)語

SPF不銹鋼雞隔離器同傳統(tǒng)的隔離器相比，具有更實用、更易控制、更經(jīng)濟、更安全等優(yōu)點。在使用過程中，該隔離器能夠?qū)ξ矬w完全實現(xiàn)屏蔽，密封性能好，使得滅菌性能得到提高。上位機能動態(tài)顯示工作流程及工作過程中的溫度、壓力、時間等參數(shù)，下位機采用可編程序控制器進行程序控制，使得操作更加方便、直觀，使用更加靈活。因此，SPF不銹鋼雞隔離器的應(yīng)用越來越廣泛。

［1］范向陽.SPF隔離器的使用和保養(yǎng)［J］.科技信息（科學(xué)教研），2007（19）

［2］余敏，鄭金旺.關(guān)于無菌隔離器技術(shù)［J］.機電信息，2011（26）