張連英，傅珂，何英杰，杜靜，黃廣勇

臨床研究

妊娠期高血壓患者血管內(nèi)皮細(xì)胞功能和氧化應(yīng)激水平的變化

張連英，傅珂，何英杰，杜靜，黃廣勇

目的探討妊娠期高血壓(PIH)患者血管內(nèi)皮細(xì)胞功能和氧化應(yīng)激水平的變化。方法收集PIH患者48例為PIH組，分為妊娠期高血壓期、子癇前期及子癇期3個亞組，另選擇30例正常孕婦作為健康對照組。測定并比較血漿內(nèi)皮素(ET)、血栓烷A2(TXA2)、前列腺環(huán)素(PGI2)和氧化終產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量。結(jié)果PIH患者ET、TXA2、MDA水平明顯高于健康對照組(P<0.05)，PGI2水平明顯低于健康對照組(P<0.01)，TXA2/ PGI2比值呈上升趨勢；子癇亞組的ET水平明顯高于妊娠高血壓亞組(P<0.05)，PGI2明顯低于妊娠高血壓亞組(P<0.05)。ET、TXA2和MDA呈明顯正相關(guān)(r=0.72，0.61；P<0.01)；PGI2與MDA呈負(fù)相關(guān)(r=0.48；P<0.05)。結(jié)論氧化應(yīng)激和內(nèi)皮功能紊亂在PIH發(fā)病中起了重要的作用，氧化應(yīng)激與血管內(nèi)皮功能紊亂密切相關(guān)。

妊娠期高血壓；內(nèi)皮功能；氧化應(yīng)激

妊娠期高血壓(pregnancy induced hypertension，PIH)是孕產(chǎn)婦和圍產(chǎn)兒病死率升高的主要原因之一，嚴(yán)重影響母嬰健康。目前該病的確切病因仍不清楚。關(guān)于其病因主要有以下幾種學(xué)說：子宮螺旋小動脈重鑄不足、炎性免疫過度激活、血管內(nèi)皮細(xì)胞受損、遺傳因素、營養(yǎng)缺乏以及胰島素抵抗等[1]。

近年的研究發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮功能紊亂在PIH的發(fā)病機(jī)制中可能起重要作用，內(nèi)皮素分泌增加可能是體內(nèi)各種致病因子作用導(dǎo)致PIH的最終調(diào)節(jié)通路[2]。Heimrath等[3]研究發(fā)現(xiàn)，妊娠高血壓孕婦血液循環(huán)中的內(nèi)皮細(xì)胞及內(nèi)皮祖細(xì)胞明顯少于正常血壓的孕婦，血液循環(huán)中的內(nèi)皮細(xì)胞及內(nèi)皮祖細(xì)胞的減少消弱了內(nèi)皮的更新與恢復(fù)，與妊娠高血壓疾病的發(fā)生有關(guān)。Henriques等[4]對30例PIH患者和30例健康孕婦進(jìn)行了隊列研究，以肱動脈血流介導(dǎo)的舒張功能評價內(nèi)皮功能，發(fā)現(xiàn)PIH患者內(nèi)皮功能異常的比例明顯高于對照組，同時，PIH患者體質(zhì)量指數(shù)、收縮壓水平、低密度脂蛋白膽固醇水平及糖耐量異常的比例也明顯高于對照組。另外，國外研究顯示，子癇前期患者胎盤及母體血清中的總氧化劑水平明顯升高，胎盤總抗氧化劑水平明顯減低[5]。雖然目前在這些方面有一些研究，但這些研究一般例數(shù)較少，對于血管內(nèi)皮功能和氧化應(yīng)激在PIH發(fā)病中的確切作用以及氧化應(yīng)激與內(nèi)皮功能的關(guān)系仍未確定。

本研究對PIH患者測定了反映血管內(nèi)皮功能的血漿內(nèi)皮素(ET)、血栓烷A2(TXA2)、前列腺環(huán)素(PGI2)和氧化終產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量的變化，并與健康孕婦相比較，探討PIH 患者血管內(nèi)皮細(xì)胞功能和氧化應(yīng)激水平的變化，為PIH的防治提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 隨機(jī)選擇2013年8月—2014年2月醫(yī)院婦產(chǎn)科住院治療的PIH患者共48 例(PIH組)，平均年齡(29.3±5.6)歲，平均孕周(34.1±1.8)周；診斷以《婦產(chǎn)科學(xué)》第8版為依據(jù)[1]，均無明顯的內(nèi)外科疾病，4周內(nèi)無急、慢性感染等疾病，將患者分為妊娠期高血壓期、子癇前期及子癇期3個亞組，分別為16例、20例和12例。另隨機(jī)選擇30例同期健康孕婦作為健康對照組，平均年齡(28.6±3.7)歲，平均孕周(35.5±2.2)周。PIH組和健康對照組患者年齡和孕周比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。入選者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 內(nèi)皮功能指標(biāo)測定 測定PGI2、TXA2和ET等3種能反映內(nèi)皮功能的指標(biāo)。由于PGI2和TXA2的不穩(wěn)定性，目前難以直接測定，PGI2生物半衰期約3 min，迅速代謝為6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)，而TXA2生物半衰期約30 min，迅速代謝為活性的TXB2，故國內(nèi)外均以測定6-keto-PGF1α和TXB2作為判斷其濃度的指標(biāo)。本研究應(yīng)用放免法測定PGI2(實際測定6-keto-PGF1α)、TXA2(實際測定TXB2)和ET，血樣放-70℃低溫冰箱保存。試劑購自解放軍總醫(yī)院放免研究所。

1.3 氧化應(yīng)激指標(biāo)測定 血漿中MDA測定采用改良的熒光光度法，采集患者外周血3 ml，EDTA-K2抗凝。血液樣品相對離心力(RCF)180×g離心5 min，分離血漿，24 h內(nèi)檢測。按試劑盒說書應(yīng)用熒光光度法檢測血漿MDA水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計。計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗或F檢驗。ET、TXA2、PGI2和MDA相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組內(nèi)皮功能及氧化應(yīng)激指標(biāo)比較 PIH組患者ET、TXA2水平明顯高于健康對照組(t=8.75,P<0.01；t=2.14,P<0.05)，PGI2水平明顯低于健康對照組(t=3.76,P<0.01)，TXA2/PGI2比值呈上升趨勢(t=2.36，P<0.05)；MDA水平明顯高于健康對照組(t=4.75,P<0.05)。子癇亞組的ET水平明顯高于妊娠高血壓亞組(t=2.38,P<0.05)，PGI2明顯低于妊娠高血壓亞組(t=2.26,P<0.05)，MDA明顯高于妊娠高血壓亞組和子癇前期亞組(t=2.83、3.29，P<0.01)。見表1。

2.2 PIH患者ET、TXA2、PGI2和MDA相關(guān)分析 相關(guān)分析顯示，ET、TXA2和MDA呈明顯正相關(guān)(r=0.72、0.61；P<0.01)；PGI2與MDA呈負(fù)相關(guān)(r=-0.48；P<0.05)，顯示氧化應(yīng)激與血管內(nèi)皮功能紊亂密切相關(guān)。

3 討 論

妊娠期高血壓直接影響孕婦及圍生兒的健康，該病的確切病因仍不清楚, 早期預(yù)防及治療手段仍很有限，國內(nèi)外對該病一直進(jìn)行研究[6]。Wang等[7]研究發(fā)現(xiàn)，PIH患者血清hs-CRP、sVCAM-1、NT-proBNP水平明顯高于健康孕婦，hs-CRP、sVCAM-1、NT-proBNP水平與PIH的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。國內(nèi)研究顯示，妊娠期高血壓綜合征孕婦血清及胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶-9的表達(dá)明顯減少，基質(zhì)金屬蛋白酶-9可能參與PIH的發(fā)生和發(fā)展[8]。國內(nèi)研究顯示，PIH患者血清胱抑素C、B型尿鈉肽及尿微量白蛋白水平均明顯高于正常妊娠組，輕度、中度及重度依次遞增,監(jiān)測血清胱抑素C、B型尿鈉肽及尿微量白蛋白可以預(yù)測嚴(yán)重程度及預(yù)后,具有一定臨床意義[6]。

近年來的研究發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮功能紊亂在PIH的發(fā)病機(jī)制中可能起重要作用，血管內(nèi)皮細(xì)胞在調(diào)節(jié)血管舒縮、生長、血栓、炎性反應(yīng)等多方面具有至關(guān)重要的作用，內(nèi)皮細(xì)胞合成和釋放具有舒張血管、抗血小板聚集的PGI2和一氧化氮(NO)，同時合成和釋放具有強(qiáng)烈縮血管作用的ET等血管活性物質(zhì)。TXA2主要是由激活的血小板合成釋放的一種具有強(qiáng)烈促進(jìn)血管收縮和血小板聚集的生物活性物質(zhì)，內(nèi)皮功能失調(diào)以內(nèi)皮依賴的血管舒張功能障礙為主。由于某些病理因素引起TXA2和PGI2平衡失調(diào)，即TXA2/PGI2比值增加，是造成血小板聚集、血管痙攣收縮或血栓形成的重要原因。國內(nèi)研究顯示，妊娠期高血壓患者組血漿NO水平明顯低于正常妊娠組和健康對照組，重度妊娠期高血壓患者血漿NO水平明顯低于輕、中度妊娠期高血壓綜合征患者，妊娠期高血壓組血漿ET-1水平明顯高于正常妊娠組和正常對照組[9]。國內(nèi)研究顯示，妊娠高血壓患者的血清血管內(nèi)皮生長因子水平顯著高于健康孕婦，認(rèn)為血清血管內(nèi)皮生長因子水平與妊娠高血壓發(fā)病及病情發(fā)展有關(guān)[10]。國內(nèi)對40 例PIH 患者和30例同期入院的正常孕婦測定了血漿ET-1、NO、超氧化物歧化酶(SOD)和MDA，結(jié)果顯示PIH 患者血漿SOD/MDA 和NO/ET-1 比例失調(diào)，表明PIH 患者體內(nèi)存在氧自由基代謝和血管內(nèi)皮功能紊亂[11]。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PIH患者ET、TXA2和TXA2/PGI2明顯上升，明顯高于健康對照組，PGI2明顯低于健康對照組，并且隨著PIH病情加重，引起血管收縮和血小板聚集的ET、TXA2升高，PGI2降低。子癇亞組的ET水平明顯高于妊娠高血壓亞組，PGI2明顯低于妊娠高血壓組；子癇亞組的TXA2水平明顯高于子癇前期亞組。說明PIH患者血管舒縮功能失調(diào)，血小板聚集、血管痙攣收縮增強(qiáng)，并且隨著病情加重，血管舒縮功能失調(diào)及血小板聚集更加明顯。

注：與健康對照組比較，aP<0.05,bP<0.01；與妊娠高血壓亞組比較，cP<0.05；與子癇前期亞組比較，dP<0.05,eP<0.01

氧化應(yīng)激是指機(jī)體內(nèi)自由基的產(chǎn)生和抗氧化防御之間嚴(yán)重失衡的一種病理狀態(tài)，在體內(nèi)引發(fā)一系列脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，最終產(chǎn)物為MDA，MDA為自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)的氧化終產(chǎn)物，為常用的氧化應(yīng)激指標(biāo)。機(jī)體內(nèi)存在氧化應(yīng)激損傷和抗氧化防御的過程，細(xì)胞通過幾種途徑減少氧化應(yīng)激的損害，主要包括SOD、谷胱甘肽過氧化酶等。Watanabe等[12]研究發(fā)現(xiàn)，子癇前期孕婦血管舒張功能明顯減低、血清活性氧代謝衍生物濃度明顯升高，并于產(chǎn)后1個月左右逐漸恢復(fù)至與健康對照組相近水平；正常妊娠組則無此變化。陳朝霞[13]研究顯示，氧化應(yīng)激與妊娠高血壓相關(guān)，PIH患者M(jìn)DA水平明顯高于健康孕婦，而妊娠高血壓患者抗氧化物質(zhì)包括維生素C和維生素E水平低于健康孕婦。

本研究顯示，PIH患者與健康對照組相比，血漿MDA明顯升高，子癇亞組的MDA水平明顯高于子癇前期亞組，說明氧化應(yīng)激較強(qiáng)。進(jìn)一步對ET和MDA進(jìn)行相關(guān)分析顯示，ET和MDA呈明顯正相關(guān)(r=0.71；P<0.01)，PIH患者血管舒張功能(PGI2)與氧化應(yīng)激產(chǎn)物MDA呈負(fù)相關(guān)(r=-0.41；P<0.05)?？梢?，孕期氧化應(yīng)激的增強(qiáng)與內(nèi)皮功能紊亂密切相關(guān)，氧化應(yīng)激可能是導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能紊亂的重要因素。

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252000 山東省聊城市第四人民醫(yī)院婦產(chǎn)科(張連英、傅珂、何英杰)； 山東省聊城市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科(杜靜)， 心內(nèi)科(黃廣勇)

黃廣勇，E-mail:13346256309@163.com

10.3969 / j.issn.1671-6450.2014.08.028

2014-04-04)