王 慧，劉永明，王勝義，齊志明，李勝坤，黃美洲

（中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州畜牧與獸藥研究所，農(nóng)業(yè)部獸用藥物創(chuàng)制重點實驗室，甘肅省新獸藥工程重點實驗室，甘肅省中獸藥工程技術研究中心，蘭州 730050）

復合微量元素營養(yǎng)舔磚對藏羊血清抗氧化能力和免疫功能的影響

王 慧，劉永明，王勝義，齊志明，李勝坤，黃美洲

（中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州畜牧與獸藥研究所，農(nóng)業(yè)部獸用藥物創(chuàng)制重點實驗室，甘肅省新獸藥工程重點實驗室，甘肅省中獸藥工程技術研究中心，蘭州 730050）

試驗旨在研究復合微量元素營養(yǎng)舔磚對藏羊血清抗氧化能力和免疫功能的影響。分別于兩牧戶家選擇體況良好、年齡體重相近、飼養(yǎng)管理相同的放牧藏羊30只，一組為對照組（放牧），另一組為試驗組（放牧加補飼復合微量元素營養(yǎng)舔磚），每組3個重復，每個重復10只。試驗組補飼復合微量元素營養(yǎng)舔磚，試驗期6個月。結(jié)果表明：復合微量元素營養(yǎng)舔磚可以顯著提高放牧藏羊血清總抗氧化能力和總超氧化物歧化酶活性（P＜0.05），極顯著提高血清IgM（P＜0.01）及顯著提高IgA含量（P＜0.05）。說明復合微量元素營養(yǎng)舔磚可以在一定程度上提高放牧藏羊的抗氧化能力，增強其免疫功能。

復合微量元素營養(yǎng)舔磚；藏羊；抗氧化能力；免疫功能

微量元素是動物維持生命和生產(chǎn)必不可少的營養(yǎng)素之一，主要以酶的必需組成部分或激活劑形式直接或間接地參與機體幾乎所有生理和生化過程，與動物的物質(zhì)代謝、生長發(fā)育、繁殖、免疫功能等密切相關［1］。微量元素缺乏或過量都會導致動物生物化學的、結(jié)構的和功能性的病理學變化。青藏高原擁有世界上獨一無二的高寒草地，具有典型的高原大陸性氣候特點，草地放牧是該地區(qū)最主要的土地利用方式，草地畜牧業(yè)是該地區(qū)可持續(xù)發(fā)展的支柱產(chǎn)業(yè)［2］。然而，在傳統(tǒng)放牧系統(tǒng)中常存在牧草和家畜礦物元素缺乏和不平衡問題［3-5］。礦物元素的缺乏和不平衡不僅嚴重影響牛羊的生長發(fā)育以及該地區(qū)家畜生產(chǎn)力水平的提高，而且還降低了經(jīng)濟效益［2］。復合微量元素營養(yǎng)舔磚含有多種微量元素、保健促生長劑等成

分。飼喂舔磚是給牛羊等草食家畜補充礦物質(zhì)元素、非蛋白氮、可溶性糖等易缺乏養(yǎng)分的一種有效方式，彌補了天然牧草和秸稈飼料的營養(yǎng)不足，從而提高了飼料利用率，也可有效防治牛羊營養(yǎng)不平衡所引發(fā)的疾病。目前，國內(nèi)外關于舔磚的研究主要集中在疾病防治、促生長等方面，有關抗氧化和免疫方面的研究報道還較少。為此，本試驗以青藏高原放牧藏羊為研究對象，旨在通過研究復合微量元素營養(yǎng)舔磚對抗氧化能力及免疫功能的影響，為復合微量元素營養(yǎng)舔磚在實際生產(chǎn)中的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗放牧藏羊來自甘肅省肅南縣皇城鎮(zhèn)（東經(jīng)101° 60′19″～101°95′92″，北緯37°62′88″～38°00′15″，海拔2 500～5 254 m）。該地區(qū)屬青藏高原，草地類型主要以高寒山地溫性草原類為主，高寒草甸區(qū)域植物生長期短，草叢低矮，生物量低；冬春草場屬于山地干旱草原［3］。試驗用復合微量元素營養(yǎng)舔磚由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州畜牧與獸藥研究所提供（批準文號：甘飼預字（2012）034003）。

1.2 試驗處理

分別于兩牧戶家選擇年齡體重相近、體質(zhì)健康、飼養(yǎng)管理條件相同的放牧藏羊30只，一組為試驗組，另一組為對照組，每組設3個重復，每個重復10只（公母各半）。供試藏羊白天處于全放牧狀態(tài)，自由采食，自由飲水，收牧后，試驗組補飼復合微量元素營養(yǎng)舔磚，自由舔食，對照組不補飼，試驗期6個月。試驗結(jié)束后，于清晨空腹頸靜脈采血10mL，分離血清，所得血清樣品-70℃保存待用。

1.3 測試指標和方法

1.3.1 抗氧化能力 血清總抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）含量、總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性及谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性的測定均采用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒，測定方法均按說明書要求進行。

1.3.2 免疫功能 ELISA（雙抗體夾心法）測定血清免疫球蛋白IgM、IgG、IgA，白細胞介素-2（IL-2），白細胞介素-12（IL-12）及腫瘤壞死因子-α（TNF-α），試劑盒均購自美國Sigma公司。

1.4 數(shù)據(jù)處理試驗數(shù)據(jù)應用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件中 One Way ANOVA進行分析，顯著水平為P＜0.05，所有結(jié)果用“平均值±標準差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 復合微量元素營養(yǎng)舔磚對藏羊抗氧化能力的影響

由圖1可見，在試驗結(jié)束時，與對照組相比，復合微量元素營養(yǎng)舔磚組藏羊血清抗氧化酶T-AOC活性升高了66.87%（P<0.05），T-SOD活性升高了30.51%（P<0.05）；但MDA、GSH-Px活性無顯著性差異（P>0.05）。復合營養(yǎng)舔磚在一定程度上提高了放牧藏羊的抗氧化能力。

圖1 復合微量元素營養(yǎng)舔磚對藏羊血清抗氧化能力的影響

2.2 復合微量元素營養(yǎng)舔磚對藏羊血清免疫功能的影響

由圖2可以看出，試驗結(jié)束時，復合微量元素營養(yǎng)舔磚組放牧藏羊血清IgM含量與對照組相比提高了91.93%，差異極顯著（P<0.01）；IgA含量提高了36.16%，差異顯著（P<0.05）；IL-2、IL-12、IgG及TNF-α含量比對照組有所提高，但差異均不顯著（P>0.05）。

圖2 復合微量元素營養(yǎng)舔磚對藏羊免疫功能的影響

3 討論

生物體對元素的代謝（吸收、轉(zhuǎn)運、分布和排泄）都與疾病的發(fā)生發(fā)展情況密切相關，元素對許多基本的生命過程諸如信號傳導、基因表達和代謝起著至關重要的作用。微量元素缺乏會引發(fā)各種疾?。?］，日糧中平衡微量元素對反芻動物的營養(yǎng)優(yōu)化非常重要［7］。復合微量元素營養(yǎng)舔磚含有鐵、銅、錳、鋅、硒等，能維持牛羊等反芻家畜機體的電解質(zhì)平衡，補充、調(diào)控礦物質(zhì)營養(yǎng)，防治家畜礦物質(zhì)營養(yǎng)缺乏癥。

SOD是機體清除O2-自由基的一種重要酶，保護細胞免受損傷，T-SOD活性的高低間接反映了機體清除自由基的能力。GSH-Px可特異地催化還原型谷胱甘肽（GSH）對過氧化物的還原反應，催化H2O2及其他過氧化物轉(zhuǎn)變?yōu)闊o毒性產(chǎn)物，從而保護細胞膜的結(jié)構和功能不受過氧化物的干擾及損害［8］。MDA是脂質(zhì)過氧化的主要產(chǎn)物之一，血清中MDA含量的高低間接反映了機體細胞受到自由基攻擊的嚴重程度。T-AOC是衡量機體抗氧化功能的綜合性指標，表現(xiàn)為體內(nèi)抗氧化酶體系和抗氧化物質(zhì)體系抗氧化能力的總和，主要作用是分解和清除代謝過程中所產(chǎn)生的活性氧［9］。因此，SOD、GSH-Px、MDA和T-AOC常被用于指示生物體受氧化損傷的程度［10］。本試驗結(jié)果表明，放牧藏羊在舔食復合微量元素營養(yǎng)舔磚一段時間后，血清T-SOD活性、T-AOC活性顯著升高，表明舔磚可在一定程度上提高放牧藏羊的抗氧化能力。

微量元素是參與動物機體生長發(fā)育和免疫過程的重要物質(zhì)，缺乏或過多都會影響生長發(fā)育及免疫機能。免疫球蛋白是具有抗體活性或化學結(jié)構上與抗體相似的

球蛋白，是一類重要的免疫效應分子，能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應。其中IgG、IgM是介導體液免疫的主要效應分子，IgA具有抗菌、抗病毒作用，是黏膜免疫反應產(chǎn)生的主要效應分子，在機體的防御機制中發(fā)揮重要作用，這三類抗體水平是反應機體免疫狀況的重要指標。在本試驗中，復合微量元素營養(yǎng)舔磚組放牧藏羊血清IgM含量在試驗結(jié)束時極顯著高于對照組（P<0.01），IgA也顯著高于對照組（P<0.05），作為體液免疫中重要的免疫球蛋白，IgM、IgA含量的提高表明補飼復合微量元素營養(yǎng)舔磚可以增強放牧藏羊體液免疫功能。

IL-2是由輔助性T淋巴細胞產(chǎn)生的一種重要的免疫調(diào)節(jié)因子，是T細胞生長因子，可以長期維持T、B細胞生長增殖并促進B細胞產(chǎn)生抗體，因此它在細胞及體液免疫平衡中均發(fā)揮調(diào)節(jié)作用［11］。IL-12主要由樹突狀細胞、巨噬細胞、B淋巴細胞以及其他抗原遞呈細胞產(chǎn)生，能促進T輔助細胞1（Th1）的增殖；誘導NK細胞和T細胞產(chǎn)生干擾素；提高NK細胞的細胞毒性作用；促進細胞毒性T細胞的形成等［12］。TNF-α是一種由活化的巨噬細胞、單核細胞、NK細胞等合成及分泌的細胞因子，具有調(diào)節(jié)免疫應答，促進細胞生成分化等多種生物學功能［1 3］。本研究結(jié)果表明，補飼復合微量元素營養(yǎng)舔磚并未對放牧藏羊血清IL-2、IL-12及TNF-α產(chǎn)生顯著影響。

總之，對放牧藏羊補飼復合微量元素營養(yǎng)舔磚，能在一定程度上提高藏羊的抗氧化能力，減少自由基和脂質(zhì)過氧化物對細胞膜完整性的破壞，也可以在一定程度上增強放牧藏羊體液免疫功能。

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《中國草食動物科學》雙月刊

《中國草食動物科學》是由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部主管、中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州畜牧與獸藥研究所主辦的國家級科技核心期刊。于2012年4月由《中國草食動物》更名而成?！吨袊菔硠游锟茖W》為美國《化學文摘》（CA）收錄期刊，中國科技核心期刊，中國農(nóng)業(yè)核心期刊，RCCSE中國核心（擴展板）學術期刊；是中國科學引文數(shù)據(jù)庫（CSCD）、中國科技論文與引文數(shù)據(jù)庫、中國學術期刊綜合評價數(shù)據(jù)庫（CAJCED）和中國生物學文獻數(shù)據(jù)庫統(tǒng)計源期刊。

《中國草食動物科學》在原《中國草食動物》的基礎上，立足西部，充分利用研究所的區(qū)位優(yōu)勢，提高期刊核心競爭力，建立適應市場經(jīng)濟體制的與國際接軌的全新辦刊理念，及時、準確地反映草食動物科技進步的方向，增強在國內(nèi)外同行中的影響力和競爭力，更好地滿足廣大科研、教學與畜牧生產(chǎn)者的需求，服務我國節(jié)糧型動物養(yǎng)殖和畜牧業(yè)發(fā)展。

《中國草食動物科學》主要刊登牛、羊、馬、駱駝、鹿、兔、鴨、鵝、駝鳥、魚等各種節(jié)糧型草食動物的最新科研成果和科技成就。主要欄目：遺傳育種，繁殖與生理，營養(yǎng)與飼料，草地與牧草，疾病防控，專論與綜述。

《中國草食動物科學》為雙月刊，大16開，80頁碼，彩色封面，每期定價8.00元，全年48.00元，雙月1日出版。國內(nèi)統(tǒng)一刊號：CN 62-1206/Q，國際標準刊號：ISSN 2095-3887,郵發(fā)代號:54—57,國外代號:BM5133。全國郵局和本刊編輯部均可訂閱。

地址：甘肅省蘭州市七里河區(qū)鹼溝沿335號 郵編：730050

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Effects of Multinutrient Blocks on the Antioxidant Capacity and Immune Function in Serum of Tibetan Sheep

WangHui，Liu Yong-ming，WangSheng-yi，et al
（KeyLaboratoryofVeterinaryPharmaceutical Development ofMinistryofAgriculture，KeyLaboratoryofNewAnimal Drug Project ofGansu Province，Engineering&TechnologyResearch Center ofTraditional Chinese VeterinaryMedicine ofGansu Province，Lanzhou Institute ofHusbandryand Pharmaceutics Sciences ofCAAS，Lanzhou 730050，China）

The study was conducted to investigate the effects of multinutrient blocks on antioxidant capacity and immune function in Tibetan sheep.The 60 Tibetan sheep with the similar age，body weight，feeding and management were elected from two herdsmen.The sheep were randomly divided into control group and experimental group，and there were 3 replicates per group and 10 sheep per replicate.The control group was only grazing.The experiment group was grazing and feeding multinutrient blocks.The experiment period was lasted for 6 months.The results showed that multinutrient blocks supplementary feeding significantly increased total antioxidant capacity and total superoxide dismutase activity（P<0.05）；the IgM content was very significantly increased（P<0.01），and IgA content was significantly increased（P<0.05）in experiment.In conclusion，the supplementation of multinutrient blocks can`enhance antioxidant capacityand immune function tosome extent in Tibetan sheep.

multinutrient blocks；antioxidant capacity；immune function；Tibetan sheep

S826.5

A

2095-3887（2014）04-0042-04

10.3969/j.issn.2095-3887.2014.04.010

2014-06-21

農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項目（2010GB23260564）；中央級科研院所基本科研業(yè)務費（1610322013003）

王慧（1985-），男，碩士，研究實習員。

劉永明（1957-），男，研究員，碩士生導師，主要從事中獸藥開發(fā)和微量元素代謝病研究。E-mail：myslym@sina.com