尤秀麗，池路花，曹蕓梅，鄭建忠，譚昌會(huì)（閩南師范大學(xué)化學(xué)與環(huán)境學(xué)院，福建漳州363000）

響應(yīng)面法優(yōu)化微波超聲雙輔助提取金銀花綠原酸工藝

尤秀麗，池路花，曹蕓梅，鄭建忠，譚昌會(huì)
（閩南師范大學(xué)化學(xué)與環(huán)境學(xué)院，福建漳州363000）

以金銀花為原料，采用微波超聲雙輔助提取綠原酸。通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)對(duì)乙醇濃度、超聲溫度、超聲時(shí)間、料液比、微波功率、微波時(shí)間等工藝參數(shù)進(jìn)行研究，并通過(guò)響應(yīng)面法優(yōu)化提取工藝，建立二次多項(xiàng)數(shù)學(xué)模型。結(jié)果表明，單因素和響應(yīng)面優(yōu)化金銀花綠原酸的最優(yōu)工藝參數(shù)為：微波功率400W、微波時(shí)間94s、液料比42∶1mL/g、乙醇濃度70%、超聲溫度為60℃、超聲時(shí)間60min，此條件下金銀花綠原酸提取率為5.45%。

響應(yīng)面法，微波超聲雙輔助提取，金銀花，綠原酸

金銀花，又名銀花、金花、忍冬花、金藤花等，為忍冬科常綠纏繞藤本忍冬的花蕾，主要分布在我國(guó)的山東、河南、河北等地，是國(guó)家首批頒布的既是食品又是藥品的60種中藥之一[1]，具有清熱解毒，涼散風(fēng)熱等功效[2-3]。金銀花的主要有效成分之一為綠原酸，是植物體在有氧呼吸過(guò)程中經(jīng)莽草酸途徑代謝產(chǎn)生的一種苯丙素類化合物。綠原酸是一種強(qiáng)抗氧化性的新型活性物質(zhì)，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利膽、抗腫瘤、降血壓、降血脂、清除自由基和興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)等藥理作用[4-7]?，F(xiàn)代科學(xué)對(duì)綠原酸生物活性的研究已深入到食品、保健、醫(yī)藥和日用化工等多個(gè)領(lǐng)域[8-10]。因此，眾多科學(xué)家對(duì)綠原酸的應(yīng)用價(jià)值與其提取方法具有濃厚的興趣。

傳統(tǒng)提取綠原酸的方法有水提法[11]、醇提法[12]，其被廣泛應(yīng)用，但存在耗時(shí)長(zhǎng)、提取率低等缺點(diǎn)。近年來(lái)，隨著微波技術(shù)和超聲波提取技術(shù)的發(fā)展，因設(shè)備簡(jiǎn)單、操作快捷、適用范圍廣、提取率高、溶劑用量少、節(jié)時(shí)、節(jié)能、安全污染小等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛用于天然植物有效成分的提取[13-22]。但使用響應(yīng)面法優(yōu)化微波-超聲雙輔助從金銀花中提取綠原酸的工藝研究還鮮有報(bào)道[23-25]。因此，本文采用微波-超聲雙輔助乙醇提取金銀花中的綠原酸，采用單因素及響應(yīng)面法實(shí)驗(yàn)分析的方法，以綠原酸提取率為考察指標(biāo)，以回歸分析確定金銀花綠原酸的最佳工藝條件，為綠原酸的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

金銀花 漳州紫金藥店，避光保存罐備用；綠原酸標(biāo)準(zhǔn)樣品 中國(guó)生物制品研究所；無(wú)水乙醇 分析純。

P70D20TP-C6（WO）微波爐 廣東格蘭仕微波爐電器制造有限公司；BS110S電子天平 北京賽多利斯天平有限公司；UV-1800 PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 上海美譜達(dá)儀器有限公司；XFB-200藥材粉碎機(jī) 吉首市中湘制藥機(jī)械廠；

SJIA-10N真空冷凍干燥器 寧波市鄞州雙嘉儀器有限公司。

1.2 綠原酸標(biāo)準(zhǔn)樣品的曲線繪制

準(zhǔn)確稱取綠原酸標(biāo)準(zhǔn)樣品5.0mg，用50%乙醇定容至50mL，配制成0.1mg/mL綠原酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別準(zhǔn)確量取0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5、1.8mL的綠原酸標(biāo)準(zhǔn)溶液于10mL比色皿中，用等濃度的乙醇定容。用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，在波長(zhǎng)328nm處測(cè)定溶液的吸光度，并以綠原酸質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3 金銀花中綠原酸的微波超聲雙輔助提取

將所購(gòu)的金銀花置于60℃恒溫干燥箱中，待烘干后，用藥材粉碎機(jī)粉碎，過(guò)80目篩，得金銀花粉末。稱取金銀花粉末1.0000g，置于微波容器內(nèi)，加入一定量乙醇溶液作溶劑，浸泡12h，然后設(shè)定一定的微波功率、微波時(shí)間，將處理后的微波容器置于超聲波器皿中，在一定的超聲溫度、超聲時(shí)間、液料比提取，后冷后過(guò)濾提取液，濾液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，加相應(yīng)濃度乙醇定容。精密吸取濾液0.2mL用乙醇定容至10mL的比色管中，在波長(zhǎng)328nm下測(cè)其吸光度，然后由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出待測(cè)樣品的綠原酸提取率。

式中：C—標(biāo)準(zhǔn)曲線綠原酸的濃度（μg/mL）；n—稀釋倍數(shù)；V—配成溶液體積（mL）；W—金銀花的質(zhì)量（g）。

1.4 單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

以綠原酸提取率為指標(biāo)，準(zhǔn)確稱取金銀花粉末1.0000g，選取乙醇濃度、超聲溫度、超聲時(shí)間、料液比、微波功率和微波時(shí)間作為影響金銀花綠原酸微波超聲雙輔助提取的單因素，每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)5次，取其平均值。

1.5 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

根據(jù)Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，選擇影響銀花綠原酸提取率的3個(gè)主要影響因素：微波功率、微波時(shí)間和料液比進(jìn)行響應(yīng)面組合實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)自變量因素編碼及水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。

表1 Box-Behnken實(shí)驗(yàn)自變量因素水平表Table 1 Variables and levels for the Box-Behnken experimental design

1.6 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Design Expert 7.0軟件和Origin 7.5 Professional軟件處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 綠原酸標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，在波長(zhǎng)328nm處測(cè)定溶液的吸光度，并以綠原酸質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.0620x+0.0225，R2=0.9998。

圖1 綠原酸標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Standard curve of chlorogenic acid

2.2 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 乙醇濃度對(duì)金銀花綠原酸提取率的影響 當(dāng)微波功率400W，微波時(shí)間30s，超聲溫度60℃，超聲時(shí)間60min，液料比40∶1mL·g-1，考察乙醇濃度50%、60%、70%、80%、90%對(duì)綠原酸提取率的影響。結(jié)果見(jiàn)圖2。

圖2 乙醇濃度對(duì)綠原酸提取率的影響Fig.2 Effect of ethanol concentration on the extraction yield of chlorogenic acid

從圖2可以看出，在乙醇濃度為50%～70%之間，綠原酸的提取率隨乙醇濃度的增大而增加，當(dāng)乙醇濃度為70%時(shí)提取率達(dá)到最大為4.48%，這可能是因?yàn)榻疸y花中綠原酸的極性更接近濃度為70%的乙醇的極性；隨著乙醇濃度的進(jìn)一步增大，綠原酸提取率反而下降，可能因?yàn)榫G原酸結(jié)構(gòu)中含有多個(gè)親水性的羥基基團(tuán)，隨著乙醇濃度的增大，含水量減少，綠原酸的溶解度反而下降。因此，實(shí)驗(yàn)選取乙醇的最佳濃度為70%。

2.2.2 超聲溫度對(duì)金銀花綠原酸提取率的影響 當(dāng)微波功率400W，微波時(shí)間30s，超聲時(shí)間60min，液料比40∶1mL·g-1，乙醇濃度70%，考察超聲溫度30、40、50、60、70℃對(duì)綠原酸提取率的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖3。

圖3 超聲溫度對(duì)綠原酸提取率的影響Fig.3 Effect of ultrasonic treatment temperature on the extraction yield of chlorogenic acid

從圖3可見(jiàn)，金銀花綠原酸的提取率隨著超聲溫度的升高而增大，當(dāng)超聲溫度為60℃時(shí)，金銀花綠原酸的提取率達(dá)到最大值；提取溫度大于60℃后，金銀花綠原酸的提取率開(kāi)始下降。其原因是隨著溫度升高，加快分子運(yùn)動(dòng)速度，從而使溶出物增多、綠原酸釋放加快，提取率增大；若是超聲溫度過(guò)高，綠原酸的鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，易被氧化分解，而使提取率下降。因此，實(shí)驗(yàn)選定60℃為最佳超聲溫度。

2.2.3 超聲時(shí)間對(duì)金銀花綠原酸提取率的影響 當(dāng)微波功率400W，微波時(shí)間30s，液料比40∶1mL·g-1，乙醇濃度70%，超聲溫度60℃，考察超聲時(shí)間40、50、60、70、80min對(duì)綠原酸提取率的影響。結(jié)果見(jiàn)圖4。

圖4 超聲時(shí)間對(duì)綠原酸提取率的影響Fig.4 Effect of ultrasonic treatment time on the extraction yield of chlorogenic acid

由圖4可知，隨著超聲時(shí)間的延長(zhǎng)，綠原酸提取率也隨之升高，當(dāng)超聲時(shí)間大于60min后，提取率反而呈下降的趨勢(shì)，這可能是因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間的提取會(huì)使綠原酸物質(zhì)發(fā)生部分降解，因此，選取最佳超聲時(shí)間為60min。

2.2.4 液料比對(duì)金銀花綠原酸提取率的影響 當(dāng)微波功率400W，微波時(shí)間30s，乙醇濃度70%，超聲溫度60℃，超聲時(shí)間60min，考察液料比20∶1、30∶1、40∶1、50∶1、60∶1mL·g-1對(duì)綠原酸提取率的影響。結(jié)果見(jiàn)圖5。

由圖5可以看出，隨著液料比從20∶1增加到40∶1，綠原酸的提取率增加幅度較大，這可能是因?yàn)殡S著溶劑用量的增加，兩相間的濃度差增大，傳質(zhì)推動(dòng)力提高，使金銀花的綠原酸充分溶出，提高提取率。當(dāng)液料比大于40∶1時(shí)，提取率反而下降，可能是因?yàn)槿軇┝窟^(guò)大金銀花中的親水物質(zhì)大量溶出而影響綠原酸提取率，而且溶劑量過(guò)大會(huì)增加成本及后續(xù)液體濃縮的難度，因此，實(shí)驗(yàn)選取液料比40∶1較為適合。

圖5 液料比對(duì)綠原酸提取率的影響Fig.5 Effect of olid-to-solvent ratio on the extraction yield of chlorogenic acid

2.2.5 微波功率對(duì)金銀花綠原酸提取率的影響 當(dāng)微波時(shí)間30s，乙醇濃度70%，超聲溫度60℃，超聲時(shí)間60min，液料比40∶1mL·g-1，考察微波功率100、150、400、550、700W對(duì)綠原酸提取率的影響。結(jié)果見(jiàn)圖6。

圖6 微波功率對(duì)綠原酸提取率的影響Fig.6 Effect of microwave power on the extraction yield of chlorogenic acid

由圖6可知，隨著微波功率從100W增加到400W，綠原酸的提取率增加幅度較大，這可能是因?yàn)殡S著微波功率的增大，強(qiáng)大的內(nèi)壓及分子間的摩擦力使金銀花細(xì)胞破裂，綠原酸溶解速度加快，提取率升高；微波功率過(guò)大，溫度較高，不穩(wěn)定的綠原酸的鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)易被氧化分解，從而使提取率下降。因此，實(shí)驗(yàn)選取最佳微波功率為400W。

2.2.6 微波時(shí)間對(duì)金銀花綠原酸提取率的影響 當(dāng)微波功率400W，乙醇濃度70%，超聲溫度60℃，超聲時(shí)間60min，液料比40∶1mL·g-1，考察微波時(shí)間30、60、90、120、150s對(duì)綠原酸提取率的影響。結(jié)果見(jiàn)圖7。

由圖7可知，隨著微波時(shí)間的延長(zhǎng)，綠原酸提取率也隨之升高，當(dāng)微波時(shí)間大于90s后，提取率反而呈下降的趨勢(shì)?？赡苁且?yàn)殡S著時(shí)間的增加，體系溫度會(huì)不斷升高，由于乙醇溶液沸點(diǎn)較低，體系溫度的不斷升高將導(dǎo)致爆沸，溶劑氣化回流量加大，最終導(dǎo)致溶劑揮發(fā)加劇，從而使綠原酸提取率降低，故實(shí)驗(yàn)選取微波時(shí)間90s較為適合。

圖7 微波時(shí)間對(duì)綠原酸提取率的影響Fig.7 Effect of microwave time on the extraction yield of chlorogenic acid

2.3 響應(yīng)面法實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

利用Design Expert 7.0軟件中的Box-Behnken設(shè)計(jì)[26]的實(shí)驗(yàn)條件及實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。對(duì)表2中實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析，得到回歸方程為：Y=5.35+0.15X1+ 0.16X2+0.23X3-0.05X1X2-0.077X1X3-0.16X2X3-0.66X12-0.43X22-0.41X32。再對(duì)該模型進(jìn)行響應(yīng)面分析，得出二次響應(yīng)回歸模型的方差分析結(jié)果見(jiàn)表3。

表2 RSM實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果Table 2 Experimental design and corresponding results for RSM

由表3的ANOVA方差分析可知，模型的p值＜0.01，差異極顯著，說(shuō)明回歸模型擬合程度較好，實(shí)驗(yàn)誤差小，可以用該模型對(duì)乙醇微波超聲雙輔助提取金銀花綠原酸的提取率進(jìn)行分析和預(yù)測(cè)。從F值可知，各因素對(duì)金銀花綠原酸提取率的影響順序?yàn)椋篨3＞X2＞X1，即液料比＞微波時(shí)間＞微波功率；一次項(xiàng)X1、X2和X3極顯著，二次項(xiàng)X12、X22和X32極顯著，交互項(xiàng)X2X3顯著，X1X3、X1X2不顯著，說(shuō)明二次項(xiàng)響應(yīng)值對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響很大，不是簡(jiǎn)單的一次線性關(guān)系。

對(duì)表3的分析結(jié)果作回歸優(yōu)化響應(yīng)曲面，見(jiàn)圖8。

表3 二次響應(yīng)模型方差分析Table 3 ANOVA results of the fitted quadratic regression model

圖8 X1X2、X1X3和X2X3分別對(duì)綠原酸提取率影響的響應(yīng)面Fig.8 The response surface of X1X2，X1X3and X2X3on extraction yield of chlorogenic acid

由圖8可知，響應(yīng)面都是開(kāi)口朝下的拋物曲面，其中心位于實(shí)驗(yàn)考察的區(qū)域范圍內(nèi)，說(shuō)明在實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)所考察指標(biāo)存在最大值。

利用Design Expert 7.0軟件進(jìn)行工藝參數(shù)的優(yōu)化組合，可得金銀花綠原酸提取的最佳工藝條件為微波功率418.69W、微波時(shí)間93.90s、液料比42.52∶1mL/g，在該條件下金銀花綠原酸提取率預(yù)測(cè)值為5.40%。

為了檢驗(yàn)響應(yīng)面法的可靠性，在上述最佳工藝條件進(jìn)行金銀花中綠原酸微波超聲雙輔助提取的實(shí)驗(yàn)，平行5次，同時(shí)考慮實(shí)際操作情況，將金銀花綠原酸最佳工藝條件修正為：微波功率400W、微波時(shí)間94s、液料比42∶1mL/g，實(shí)際得到金銀花綠原酸提取率的平均值為5.45%，與預(yù)測(cè)值基本吻合，從而證實(shí)該模型可用于金銀花綠原酸的提取。與水煎煮法[11]、乙醇回流法[12]、超聲提取法[10]、微波法[7]相比，微波超聲雙輔助提取金銀花綠原酸的提取率高，提取時(shí)間短。

3 結(jié)論

以金銀花為原料，采用微波超聲雙輔助提取綠原酸，通過(guò)單因素和Box-Behnken響應(yīng)面法實(shí)驗(yàn)得到優(yōu)化的工藝參數(shù)：微波功率400W、微波時(shí)間94s、液料比42∶1mL/g、乙醇濃度70%、超聲溫度為60℃、超聲時(shí)間60min，在該條件下驗(yàn)證金銀花綠原酸提取率的平均值為5.45%。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：第一部[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2000：177.

[2]陳秋竹，林瑞超，王鋼力，等.金銀花提取物化學(xué)成分研究[J].中藥材，2010，33（6）：920-922.

[3]章曉驊.金銀花活性成分提取及顆粒制劑工藝研究[D].長(zhǎng)沙：中南大學(xué)，2004.

[4]周慧燕，陳玨.金銀花提取物中綠原酸含量測(cè)定[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2011，18（11）：61-62.

[5]鄧良，袁華.綠原酸的研究進(jìn)展[J].化學(xué)與生物工程，2005，14（7）：426-428.

[6]趙群莉.微波預(yù)處理提取植物細(xì)胞中有效成分的研究[D].南寧：廣西大學(xué)，2003.

[7]王輝，田呈瑞，馬守磊，等.綠原酸的研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技，2009，30（5）：341-345.

[8]吳江濤.綠原酸的生物活性及其應(yīng)用[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2009（19）：349-350.

[9]陳少洲，呂飛杰，臺(tái)建祥.葵粕中綠原酸的研究進(jìn)展與應(yīng)用前景[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2002，28（11）：51-55.

[10]鄧良，袁華.綠原酸的研究進(jìn)展[J].化學(xué)與生物工程，2005，14（7）：426-428.

[11]李榮，胡成穆，鐘明媚，等.正交設(shè)計(jì)研究金銀花綠原酸煎提工藝[J].安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，25（1）：39-40.

[12]武達(dá)，關(guān)澍男.金銀花提取工藝[J].黑龍江醫(yī)藥，2005，18（2）：38-40.

[13]胡愛(ài)軍，鄭捷.食品工業(yè)中的超聲提取技術(shù)口[J].食品與機(jī)械，2004，20（4）：57-60.

[14]周如金，顧立軍，黎周國(guó)，等.超聲強(qiáng)化提取核桃仁油的研究[J].食品科學(xué)，2003，24（10）：113-117.

[15]秦?zé)?，鄭濤，原永輝，等.超聲場(chǎng)對(duì)姜黃素提取過(guò)程的強(qiáng)化[J].清華大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，1998，38（6）：46-48.

[16]曹淵，李創(chuàng)舉，夏之寧，等.金銀花中綠原酸的超聲提取工藝優(yōu)化[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2002，19（12）：2857-2858.

[17]府旗中，王伯初，許祥武.應(yīng)用超聲波法提取金銀花中的綠原酸[J].重慶大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，30（1）：123-125.

[18]陳業(yè)高，海麗娜，畢先均.微波輻射在天然藥用活性成分提取分離中的應(yīng)用[J].微波學(xué)報(bào)，2003，20（2）：85-89.

[19]郭振庫(kù)，金欽漢，范國(guó)強(qiáng)，等.微波幫助提取中藥金銀花中有效成分的研究[J].中國(guó)中藥雜志，2002，27（3）：189-192.

[20]Fishman ML，Chan H K，Hoagland P D，et al.Microwaveassisted extraction of lime pectin[J].Food Hydrocolloids，2006，20（8）：1170-1177.

[21]Martino E，Ramaiola E，Urbano M，et al.Microwave-assisted extraction of coumarin and related compoundsfrom Melilotus officinallis（L.）Pallas as an alternative to soxhlet and ultrasoundassisted extraction[J].Journal of Chromatography A，2006，1125（2）：147-151.

[22]李燕婷，周文富.金銀花中綠原酸的微波輔助提取工藝研究[J].化學(xué)與生物工程，2011（10）：65-69.

[23]王文昕，董全.響應(yīng)面法優(yōu)化超聲輔助提取花生紅衣多酚工藝[J].食品科學(xué)，2012，33（22）：1-5.

[24]劉益紅，周建軍，徐頂巧，等.響應(yīng)面分析法優(yōu)化艾葉中綠原酸提取工藝[J].食品工業(yè)科技，2012，33（9）：263-267.

[25]王瑛，張本印，江進(jìn)，等.響應(yīng)面分析法優(yōu)化乳白香青中綠原酸提取工藝[J].食品工業(yè)科技，2013，34（2）：238-241.

[26]王欽德，楊堅(jiān).食品實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與統(tǒng)計(jì)分析[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2003.

Optimization of microwave-ultrasonic-assisted extraction of chlorogenic acid from Flos Lonicerae using response surface methodology

YOU Xiu-li，CHI Lu-hua，CAO Yun-mei，ZHEN Jian-zhong，TAN Chang-hui
（Colllege of Chemistry and Environment，Minnan Normal University，Zhangzhou 363000，China）

The microwave-ultrasonic-assisted extraction of chlorogenic acid from Flos Lonicerae was optimized using response surface methodology.The extraction yield of chlorogenic acid was investigated with respect to six process parameters including ethanol concentration，temperature，ultrasonic treatment time，solvent-to-solid ratio，microwave power and microwave time.As a result，a quadratic polynomial mathematical model was built. The optimal extraction conditions of RSM were determined as follows：Flos Lonicerae were suspended in microwave power of 400W，microwaves 94s，70%ethanol concentration at solvent-to-solid ratio 42∶1mL/g and then subjected to ultrasonic treatment for 60min at temperature of 60℃.Under the modified conditions，the extraction yield of polyphenols was 5.45%.

response surface methodology；microwave-ultrasonic-assisted extraction；Flos Lonicerae；

TS201.1

B

1002-0306（2014）12-0272-05

10.13386/j.issn1002-0306.2014.12.051

2013－08－05

尤秀麗（1978-），女，碩士研究生，講師，主要從事天然產(chǎn)物的提取、手性識(shí)別機(jī)理方面的研究。

福建省教育廳科技項(xiàng)目（JA12218）；漳州師范學(xué)院新世紀(jì)優(yōu)秀人才支持計(jì)劃（SX1101）。

chlorogenic acid