樊春艷，張 沂，劉秀芳，楊崢維

鹽酸法舒地爾作為一種新型、高效的血管擴(kuò)張藥，具有抑制平滑肌收縮最終階段的肌球蛋白輕鏈磷酸化，使血管擴(kuò)張。臨床上用于改善和預(yù)防蛛網(wǎng)膜下腔出血術(shù)后的腦血管痙攣及引起的腦缺血癥狀。筆者采用高效液相色譜法(high performance liquid chromatography，HPLC)測(cè)定鹽酸法舒地爾含量，結(jié)果表明HPLC法方法簡(jiǎn)單，專(zhuān)屬性強(qiáng)、靈敏度高。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥 高效液相色譜儀及檢測(cè)器為美國(guó)LAB ALLIANCE，色譜工作站ANASTAR。鹽酸法舒地爾(批號(hào) 20081001、20081002、20081003，自制)，鹽酸法舒地爾對(duì)照品(批號(hào)080920自行精制)。

1.2 色譜條件 色譜柱:phecda C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)，以1.0%三乙胺水溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值至7.0)-甲醇(50∶50)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)275 nm，流速1.0 ml/min，進(jìn)樣量20 μl，柱溫25℃;理論板數(shù)按鹽酸法舒地爾峰計(jì)算應(yīng)不低于6 600。

1.3 溶液的制備 (1)對(duì)照品溶液配制:稱(chēng)取鹽酸法舒地爾對(duì)照品30.0 mg，置100 ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻。再精密量取25 ml置50 ml量瓶中，加流動(dòng)相至刻度搖勻，作為對(duì)照品溶液。(2)供試品溶液配制:稱(chēng)取鹽酸法舒地爾樣品29.3 mg，置100 ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解配成稀釋至刻度，搖勻。再精密量取25 ml置50 ml量瓶中，加流動(dòng)相至刻度搖勻，作為供試品溶液。

1.4 方法 采用HPLC法(中國(guó)藥典)測(cè)定［1］。

1.4.1 線(xiàn)性關(guān)系考察 精密稱(chēng)取法舒地爾對(duì)照品60.5 mg，置 100 ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解配成0.605 g/L的溶液，再精密量取2、4、6、8、10 ml，分別置25 ml量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，得到系列濃度樣品，分別量取20 μl，注入高效液相色譜儀，得到各濃度的峰面積，以峰面積(A)為縱坐標(biāo)、樣品濃度(C)為橫坐標(biāo)做回歸計(jì)算。

1.4.2 重復(fù)性試驗(yàn) 取線(xiàn)性范圍內(nèi)的一種濃度(145.2 mg/L)，連續(xù)進(jìn)樣5次，測(cè)定5次的峰面積。

1.4.3 重現(xiàn)性試驗(yàn) 精密量取同一樣品 (批號(hào)081001)6份，按“供試品溶液配制”方法制成供試品溶液，按上述色譜條件分別測(cè)定其含量。

1.4.4 溶液穩(wěn)定性 取“線(xiàn)性試驗(yàn)”項(xiàng)下的樣品(濃度為145.2 mg/L)，分別在0、4、8、12、24 h測(cè)定1次，共測(cè)定5次。

1.4.5 回收率試驗(yàn) 按規(guī)格2 ml:30 mg鹽酸法舒地爾注射液的處方，稱(chēng)取鹽酸法舒地爾(100.03%)低、中、高量樣品各3份，分別置100 ml量瓶中，加入對(duì)應(yīng)的輔料，再加水至刻度，搖勻，配制成9份樣品。分別量取樣品5 ml，置50 ml量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，制成低(120%)、中(150%)、高(180%)3種濃度樣品各3份，作為供試品溶液，另精密稱(chēng)取鹽酸法舒地爾對(duì)照品適量(100.03%)，加流動(dòng)相稀釋制成約150 mg/L的溶液作為對(duì)照品溶液，取供試品和對(duì)照品溶液分別注入液相色譜儀，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算回收率。

2 結(jié)果

2.1 色譜圖 鹽酸法舒地爾對(duì)照品、供試品溶液和空白樣品色譜見(jiàn)圖1。

圖1 法舒地爾對(duì)照品、供試品和空白樣品溶液色譜圖

2.2 線(xiàn)性關(guān)系 回歸計(jì)算得標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程為A=1 604.619+15 608.345C(r=0.999 4，n=5)。

2.3 重復(fù)性試驗(yàn) 計(jì)算其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.71%。

2.4 重現(xiàn)性試驗(yàn) 平均含量為99.8%，RSD為0.75%。

2.5 溶液穩(wěn)定性 RSD為0.72%。

2.6 回收率試驗(yàn) 按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算回收率，測(cè)得低、中、高濃度鹽酸法舒地爾的平均回收率為99.4%，RSD為0.47%。

2.7 含量測(cè)定 按HPLC法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 鹽酸法舒地爾含量HPLC法測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 流動(dòng)相的選擇合理 用phecda C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)色譜柱，柱溫25℃。以1.0%三乙胺水溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值至7.0)與甲醇比例50∶50為流動(dòng)相，所得峰形對(duì)稱(chēng)，保留時(shí)間滿(mǎn)意，主峰與溶劑峰以及雜質(zhì)峰分離完全。

3.2 現(xiàn)行鹽酸法舒地爾標(biāo)準(zhǔn)采用國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)［2］采用高氯酸滴定法測(cè)定其含量，專(zhuān)屬性差，且醋酸汞試液污染環(huán)境［3］。HPLC法在專(zhuān)屬性、靈敏性等方面也優(yōu)于高氯酸滴定法［3］，可以作為鹽酸法舒地爾的含量測(cè)定方法。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版［S］.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄29.

［2］郭旭光，郭興輝.HPLC法測(cè)定鹽酸法舒地爾的含量及有關(guān)物質(zhì)［J］.中國(guó)藥事，2012，26(12):1380-1383.

［3］李金濤，干偉，鄧媛媛，等.HPLC法測(cè)定鹽酸法舒地爾的含量［J］.中國(guó)藥師，2010，13(11):1609-1611.

(本文編輯:甘輝亮)