孫藝斐 楊忠毅 張勇平 王明偉 姚之豐 薛靜

鮑曉1 楊文濤2 沈鎮(zhèn)宙3 邵志敏3 章英劍1

1.復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海 200032；2.復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海 200032；3.復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺外科，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海 200032

18F-FES在乳腺癌患者體內(nèi)攝取與病理免疫組化的關(guān)系

孫藝斐1 楊忠毅1 張勇平1 王明偉1 姚之豐1 薛靜1

鮑曉1 楊文濤2 沈鎮(zhèn)宙3 邵志敏3 章英劍1

1.復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海 200032；2.復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海 200032；3.復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺外科，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海 200032

背景與目的：16α-18F-17β-雌二醇(18F-FES)作為雌激素受體(estrogen receptor, ER)特異性顯像劑，可在活體內(nèi)反映ER的表達(dá)狀況。本研究主要探討乳腺癌患者體內(nèi)18F-FES攝取結(jié)果與病理免疫組化的相關(guān)性。方法：自行制備18F-FES，入組26例乳腺癌患者(17例原發(fā)性乳腺癌，9例復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移性乳腺癌)，分別進(jìn)行18F-FES及18F-FDG PET/CT顯像，對每例患者進(jìn)行空心針穿刺或手術(shù)治療，對比相應(yīng)病灶的免疫組化和18F-FES、18F-FDG攝取結(jié)果。結(jié)果：96.15%(25/26)的患者18F-FES結(jié)果與ER病理免疫組化一致，以18F-FES SUVmax≥1.5為ER陽性，18F-FES PET/CT顯像診斷乳腺癌病灶ER陽性的靈敏度為93.33%，特異度為100%。ER、PR的免疫組化結(jié)果與18F-FES的SUVmax呈明顯的正相關(guān)；HER-2/Neu的免疫組化結(jié)果與18F-FES的SUVmax呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論：18F-FES有望用于全面反映乳腺癌患者全身病灶的ER表達(dá)情況，為臨床個體化治療方案的制定提供幫助。

雌激素受體；免疫組化；18F-FES；18F-FDG；ER亞型

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率呈不斷上升趨勢。臨床通常采用手術(shù)、放化療和內(nèi)分泌等綜合治療。內(nèi)分泌治療是否有效很大程度取決于乳腺癌病灶雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)的表達(dá)情況［1-2］。目前臨床及科研檢測ER和PR最常用的方法為免疫組化法。但該種檢測方法為有創(chuàng)、離體測定，無法反映全身所有病灶的ER表達(dá)情況。隨著分子影像技術(shù)的不斷發(fā)展，PET/CT顯像在乳腺癌中的應(yīng)用日益增多，16α-18F-17β-雌二醇(18F-FES)作為ER特異性顯像劑，可在活體內(nèi)反映ER的表達(dá)狀況，從而指導(dǎo)臨床選擇個體化的治療方案［3］。本研究主要探討乳腺癌病灶攝取18F-FES程度與病理免疫組化的相關(guān)性，為進(jìn)一步開展臨床研究提供客觀指標(biāo)。

1 資料和方法

1.1 研究對象

入組2010年8月—2012年9月于復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院就診的乳腺癌患者26例。入組標(biāo)準(zhǔn)：①近2個月未行放療或化療；②如服用ER拮抗劑類內(nèi)分泌藥物者須停用5周，芳香化酶抑制劑類藥物可以正常使用；③患者病灶最長徑≥0.8 cm。對每例患者都進(jìn)行空心針穿刺或手術(shù)切除，了解相應(yīng)病灶的PR、HER-2、ER及Ki-67的表達(dá)情況。入組患者都分別簽署了18F-FES和18F-FDG PET/CT顯像的知情同意書。

1.2 顯像藥物和設(shè)備

18F-FES和18F-FDG均由本院核醫(yī)學(xué)科自行制備，放射化學(xué)純度＞95%。其中18F由Siemens Eclips ST回旋加速器制備；18F-FES使用Siemens Explora GN多功能合成模塊和Explora LC液相色譜分離模塊，同時結(jié)合自制的固相萃取裝置，采用“一鍋法”完成合成和分離［4］；18F-FDG由Explora FDG4合成模塊生產(chǎn)。顯像儀器為Siemens biograph 16HR。

1.3 PET/CT顯像

患者在1周內(nèi)分別進(jìn)行18F-FES和18F-FDG PET/CT顯像，以18F-FDG PET/CT的顯像結(jié)果確定病灶的部位及大小。

18F-FES PET/CT顯像前靜脈注射6 mCi(222 MBq)的18F-FES，2 min內(nèi)緩慢推注，1 h后上機(jī)檢查。

18F-FDG PET/CT顯像前禁食4 h以上，血糖必須控制在10 mmol/L以下。按7.4 MBq/kg(0.2 mCi/kg)靜脈注射后安靜休息45～60 min，顯像前排空膀胱，再飲水600～1 000 mL以充盈胃。

PET/CT顯像時，先采集CT圖像，掃描范圍從顱底至股骨中段，掃描參數(shù)：電壓120 kV，電流80～250 mA，螺距3.6。在同一范圍用三維模式采集PET圖像，每床位2～3 min，然后自動利用CT數(shù)據(jù)對PET圖像進(jìn)行衰減校正，進(jìn)行圖像重建和融合。圖像采用有序子集最大期望值法(OSEM)迭代重建。

1.4 圖像分析

重建圖像以冠狀、水平、矢狀三方向斷層像和三維容積像電影方式顯示，由2位核醫(yī)學(xué)科醫(yī)師獨立視覺判斷，并對病灶行最大標(biāo)準(zhǔn)攝取值(SUVmax)半定量分析。參考國外一些18F-FES PET/CT的研究［5-6］，本研究以1.5為閾值，SUVmax≥1.5的病灶定為ER陽性，反之為ER陰性。

1.5 免疫組化ER分析方法

本院病理科對ER/PR的判斷標(biāo)準(zhǔn)采用Allred score方法，根據(jù)染色陽性細(xì)胞的比例和染色強(qiáng)度，陽性細(xì)胞比例＜1%為(-)；1%≤陽性細(xì)胞比例＜10%為(+)；10%≤陽性細(xì)胞比例＜50%為(++)；陽性細(xì)胞比例≥50%為(+++)；染色強(qiáng)度分為弱、中、強(qiáng)，若染色強(qiáng)度弱，則陽性級別下降一級。如：陽性細(xì)胞比例為40%判定為(++)，但染色強(qiáng)度為弱，則判定為(+)。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 16.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，采用Spearman做相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 患者的基本情況

26例患者皆為女性，平均年齡(55.6±9.3)歲(2 8～6 5歲)，絕經(jīng)后患者1 5例，病理類型皆為浸潤性導(dǎo)管癌，腫塊平均為(2.8±2.0)cm(0.8～10.2 cm)，病理免疫組化顯示ER陽性共15例。26例患者中，17例為原發(fā)性乳腺癌，5例胸壁復(fù)發(fā)，4例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

2.2 18F-FES顯像表現(xiàn)

靜脈注射18F-FES，1 h后顯像，正常器官組織中，膽囊處可見最高的生理性放射性分布(SUVmax：55.8～98.5)。除膽囊外，放射性分布較高的臟器組織依次為：膽管(SUVmax：26.0～37.5)、膀胱(SUVmax：17.0～24.3)、回腸(SUVmax：13.4～22.3)、肝臟(SUVmax：14.2～19.4)、子宮(SUVmax：5.6～9.9)、腎盂(SUVmax：4.6～8.5)、空腸(SUVmax：4.0～8.3)、腎實質(zhì)(SUVmax：2.8～3.3)、胰腺(SUVmax：1.8～3.6)、心肌(SUVmax：1.9～2.3)。骨骼、肌肉、肺、乳腺等處均未見明顯放射性分布(SUVmax：0.5～1.1)。ER陽性的患者圖像中，除了上述所見外，在病灶部位可見均勻分布的放射性攝取，而非局灶性的放射性攝取。

2.3 18F-FES顯像診斷ER表達(dá)價值

26例患者中，25例18F-FES結(jié)果與ER病理免疫組化一致，符合率達(dá)96.15%(表1)。以免疫組化結(jié)果為ER診斷金標(biāo)準(zhǔn)，以FES SUVmax≥1.3為ER陽性，假陽性1/16，假陰性0/10，靈敏度為100%，特異度為90.91%,陽性預(yù)測值為93.75%,陰性預(yù)測值為100%，ROC曲線下面積為0.955；以FES SUVmax≥1.5為ER陽性，則假陽性0/14，假陰性1/12，靈敏度為93.33%，特異性為100%，陽性預(yù)測值為100%，陰性預(yù)測值為91.67%，ROC曲線下面積為0.967。免疫組化ER陽性、18F-FES PET/CT顯像亦陽性患者見圖1，兩者均為陰性的患者見圖2，18F-FES SUVmax處于1.3這一臨界值、免疫組化分別為陽性和陰性的2例患者PET/CT圖像見圖3。

表1 病灶PET/CT顯像結(jié)果與免疫組化結(jié)果Tab. 1 Lesions on PET/CT and ER assays

圖1 免疫組化ER陽性(+++，編號25)患者18F-FES PET/CT顯像Fig. 1 Patient No.25 with ER positive (+++) detected by18F-FES PET/CT

圖2 免疫組化ER陰性(編號1)患者18F-FES PET/CT顯像Fig. 2 Patient No.1 with ER negative (-) detected by18F-FES PET/CT

圖3 18F-FES PET/CT顯像結(jié)果不確定患者(SUVmax均處臨界值1.3)Fig. 3 The controversial results of18F-FES PET/CT imaging (SUVmaxwas 1.3)

2.4 18F-FES與病理免疫組化關(guān)系

通過分析26例患者的數(shù)據(jù)，本研究發(fā)現(xiàn)ER、PR的免疫組化結(jié)果與18F-FES的SUVmax呈明顯的正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)分別為r=0.724，P＜0.001及r=0.776，P＜0.001)；HER-2/Neu的免疫組化結(jié)果與18F-FES的SUVmax呈負(fù)相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r=-0.587，P=0.002)；Ki-67指標(biāo)與18F-FDG的SUVmax呈正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r=0.578，P=0.004)；腫塊的大小與18F-FDG SUVmax呈明顯正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r=0.564，P=0.003，表2)。

表2 PET/CT顯像結(jié)果與免疫組化關(guān)系Tab. 2 The concordance between PET/CT imaging and immunohistochemical assays.

3 討 論

FES是一種雌激素類似物，與雌激素有相似的結(jié)合特性，能夠特異地與ER結(jié)合。FES與其他類固醇激素類似，靜脈注入后很快被肝臟攝取代謝，并通過消化道排泄，膽汁中的代謝產(chǎn)物又經(jīng)過小腸重吸收，所以FES在肝臟、小腸等處有很高的生理性攝取。由于注射FES后肝內(nèi)快速聚集，所以血中清除很快，在注射后20 min，僅20%非代謝狀態(tài)的FES存在于血液循環(huán)中，血液濃度在注射后20～30 min達(dá)到峰值。本研究結(jié)果與文獻(xiàn)一致［7-8］。個別患者見注射側(cè)血管有條索狀放射性分布，這可能與2 min的緩慢靜脈推注有關(guān)，兩者之間的關(guān)系還有待進(jìn)一步研究。

FES與ER特異性結(jié)合，其攝取客觀反映了患者體內(nèi)ER的分布及其生物活性，故可以被用來預(yù)測乳腺腫瘤ER的表達(dá)。Dehdashti等［9］對21例轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者進(jìn)行研究，對比了粗針活檢測定ER與18F-FES PET結(jié)果，符合率為88%，低于本研究結(jié)果。原因可能與該研究所使用的儀器為不帶CT的早期PET有關(guān)，不能進(jìn)行厚度衰減校正與定位，而且以SUVmax≥1.0來判定病灶ER陽性。

進(jìn)一步分析本次入組的26例患者顯像結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)編號為12、15的患者，病理免疫組化證實其病灶ER表達(dá)為陽性(++)及強(qiáng)陽性(+++)，而18F-FES的SUVmax僅為1.3及1.5；出現(xiàn)此結(jié)果的原因可能是部分容積效應(yīng)所致，因為這2例患者病灶最長徑僅為1.0 cm及0.8 cm，可使SUVmax低于真實值。

ER有兩種亞型：一種為傳統(tǒng)的ERα，另一種為新近研究發(fā)現(xiàn)的ERβ，兩者的配體結(jié)合區(qū)60%同源，這就意味著兩者對雌激素的親和力是不同的。不同病灶中由于兩種受體亞型的組成比例不同，就會導(dǎo)致病灶對雌激素的結(jié)合能力不盡相同［10-11］。18F-FES作為一種雌激素類似物，與雌激素有相似的結(jié)構(gòu)性，所以其對ER的兩種亞型也應(yīng)具有不同的親和力。Tsujikawa等［12］的研究結(jié)果提示，在子宮內(nèi)膜癌患者中，F(xiàn)ES的攝取與ERα亞型呈明顯的正相關(guān)，ERα比例越高，F(xiàn)ES的攝取程度越高。同時本院病理免疫組化檢測的ER也是ERα，可以推論FES攝取程度與免疫組化的陽性程度應(yīng)有良好的相關(guān)性。本研究發(fā)現(xiàn)，編號17患者的病理免疫組化結(jié)果為強(qiáng)陽性(+++)，18F-FES的SUVmax為2.9，編號26患者病理免疫組化結(jié)果為陽性(++)，18F-FES的SUVmax卻為9.0，而兩者腫塊均超過2.0 cm。出現(xiàn)這種FES攝取程度與免疫組化陽性程度不一致的原因，從病理免疫組化的角度來分析，可能與活檢時取材有限有關(guān)。由于活檢取材的局限性，未能完全反應(yīng)整個腫塊的ER受體情況。

在乳腺癌的發(fā)展進(jìn)程中，ERα與ERβ究竟扮演何種角色尚無定論。多數(shù)研究表明，ERβ對正常乳腺組織具有保護(hù)作用，可對抗ERα的促腫瘤生長作用，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞增殖，其表達(dá)缺失可能對乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展具有極其重要的意義［13-16］。然而，也有研究發(fā)現(xiàn)，ERβ過度表達(dá)對乳腺癌細(xì)胞增殖具有促進(jìn)作用［17-18］。因此，ERα和ERβ各自的表達(dá)狀態(tài)及兩者的相互作用對腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特性的影響值得進(jìn)一步探討。這也許可以成為核醫(yī)學(xué)今后在乳腺癌顯像方面的發(fā)展方向。

在復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者中，復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移灶的ER表達(dá)與原發(fā)灶不完全一致。Mortimer等［19］發(fā)現(xiàn)24%(4/17)的轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者在不同部位病灶之間FES攝取存在差異性；Amir等［20］報道約12.6%的ER陽性的原發(fā)乳腺癌患者，其復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移病灶與原發(fā)病灶的ER表達(dá)不同；此外，Simmons等［21］發(fā)現(xiàn)40%的乳腺癌患者轉(zhuǎn)移灶的ER/PR表達(dá)與原發(fā)灶不一致。綜上所述，由于18F-FES與病理免疫組化結(jié)果有良好的一致性，其在腫瘤組織中的分布與E R有關(guān)，有望用于全面反映乳腺癌腫瘤患者全身病灶的E R表達(dá)情況，為臨床個體化治療方案的制定提供幫助。

本科自行制備的FES與免疫組化ER的符合率達(dá)96.15%，能很好顯示ER陽性病灶，有望進(jìn)一步用于臨床應(yīng)用。

［1］ROSE C, THORPE S M, ANDERSEN K W, et al. Beneficial effect of adjuvant tamoxifen therapy in primary breast cancer patients with high estrogen receptor values ［J］. Lancet, 1985, 1(8419): 16-19.

［2］BERTELSEN C A, GIULIANO A E, KEM D H, et al. Breast cancers: estrogen and progesterone receptor status as a predictor of in vitro chemotherapeutic response ［J］. J Surg Res, 1984, 37(4): 257-263.

［3］ALMUBARAK M, OSMAN S, MARANO G, et al. Role of positron emission tomography scan in the diagnosis and management of breast cancer ［J］. Oncology (Williston Park), 2009, 23(3): 255-261.

［4］張勇平, 章英劍, 王明偉, 等. 基于Explora GN/LC雙模塊的16α-［18F］氟-17β-雌二醇全自動化合成 ［J］. 中華核醫(yī)學(xué)雜志, 2011, 31(3): 196-200.

［5］PETERSON L M, MANKOFF D A, LAWTON T, et al. Quantitative imaging of estrogen receptor expression in breast cancer with PET and 18F-fluoroestradiol ［J］. J Nucl Med, 2008, 49(3): 367–374.

［6］KRUCHTEN M, GLAUDEMANS A W, VRIES E F, et al. PET imaging of estrogen receptors as a diagnostic tool for breast cancer patients presenting with a clinical dilemma［J］. J Nucl Med, 2012, 53(2): 182-190.

［7］KIESEWETTER D O, KILBOUM M R, LANDVATTER S W, et al. Preparation of four fluorine- 18-labeled estrogens and their selective uptakes in target tissues of immature rats ［J］. J Nucl Med, 1984, 25(11): 1212-1221.

［8］LAVANYA S, HANNAH M L, JEANNE M L, et al. 18F-Fluoroestradiol ［J］. Semin Nucl Med, 2007, 37(6): 470-476.

［9］DEHDASHTI F, MORTIMER J E, SIEGEL B A, et al. Positron tomographic assessment of estrogen receptors in breast cancer:comparison with FDG- PET and in vitro receptor assays ［J］. J Nucl Med, 1995, 36(10): 1766-1774.

［10］SPEIRS V. Oestrogen recept or in breast cancer: good, bad or still too early to tell ［J］. J Pathol, 2002, 197(2): 143-147.

［11］ZHAO C, DAHLMAN W K, GUSTAFSSON J A. Estrogen signaling via estrogen receptor beta ［J］. J Biol Chem, 2010, 285(51): 39575-39579.

［12］TSUJIKAWA T, YOSHIDA Y, KIYONO Y, et al. Functional oestrogen receptor α imaging in endometrial carcinoma using 16α-［18F］fluoro-17β-oestradiol PET ［J］. J Nucl Med, 2011, 38(1): 37-45.

［13］ROGER P, SAHLA M E , MAKELA S, et al. Decreased expression of estrogen receptor beta protein in proliferative preinvasive mammary tumors ［J］. Cancer Res, 2001, 61(6): 2537-2541.

［14］PARUTHIYIL S, PARMAR H, KEREKATTE V, et al. Estrogen receptor beta inhibits h uman breast cancer cell proliferation and tumor formation by causing a G2 cell cycle arrest ［J］. Cancer Res, 2004, 64(1): 423-428.

［15］STROM A, HARTMAN J, FOSTER J S, et al. Estrogen receptor beta inhibits 17 beta-estradiol-stimulated proliferation of the breast cancer cell line T47D ［J］. Proc Nat l Acad Sci U SA, 2004, 101(6): 1566-1571.

［16］牛秀瓏, 王奕飛, 孫奕, 等. 雌激素受體亞型對人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7生物學(xué)特性的影響［J］. 中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2011,18(7): 711-716.

［17］HOU Y F, YUAN S T, LI H C, et al. ER beta exerts multiple stimulative effects on human breast carcinoma cells ［J］. Oncogene, 2004, 23(34): 5799-5806.

［18］侯意楓, 袁勝濤, 李鶴成, 等. 雌激素受體β對人乳腺癌細(xì)胞株生物學(xué)特性的影響［J］. 中華腫瘤雜志, 2005,27(7): 389-392.

［19］MORTIMER J E, DEHDASHTI F, SIEGEL B A, et al. Positron emission tomography with 2-［18F］Fluoro-2-deoxy-D-glucose and 16alpha-［18F］fluoro-17betaestradiol in breast cancer: correlation with estrogen receptor status and response to systemic therapy［J］. Clin Cancer Res, 1996, 2(6): 933-939.

［20］AMIR E, CLEMONS M, PURDIE C A, et al. Tissue confirmation of disease recurrence in breast cancer patients: pooled analysis of multicentre, ultidisciplinary prospective studies［J］. Cancer Treat Rev, 2012, 38(6): 708-714.

［21］SIMMON S C, MILLER N, GEDDIE W, et al. Does confirmatory tumor biopsy alter the management of breast cancer patients with distant metastases? ［J］. Ann Oncol, 2009, 20(9): 1499-1504.

The correlation of18F-fluoroestradiol uptake in patients with breast cancer to in vitro immunohistochemical assay of ER status

SUN Yi-fei1, YANG Zhong-yi1, ZHANG Yong-ping1, WANG Ming-wei1, YAO Zhi-feng1, XUE Jing1, BAO Xiao1, YANG Wen-tao2, SHEN Zhen-zhou3, SHAO Zhimin3, ZHANG Ying-jian1(1.Department of Nuclear Medicine, Fudan University Shanghai Cancer Center; Department of Oncology, Shanghai Medical College, Fudan University, Shanghai 200032, China; 2. Department of Pathology, Fudan University Shanghai Cancer Center; Department of Oncology, Shanghai Medical College, Fudan University, Shanghai 200032, China; 3. Department of Breast Surgery, Fudan University Shanghai Cancer Center; Department of Oncology, Shanghai Medical College, Fudan University, Shanghai 200032, China)

ZHANG Ying-jian E-mail: yjzhang111@aliyun.com

Background and purpose:16α-[18F] fl uoroestradiol (18F-FES) is an in vivo speci fi c imaging agent for estrogen receptor (ER). We investigated the concordance between tumor ER status as determined by FES-PET and in vitro immunohistochemical assays.Methods:18F-FES was prepared by ourselves. Twenty-six patients were enrolled (17 primary and 9 metastatic/recurrent). Patients underwent both18F-FES and18F-FDG PET/CT.Results:We found good overall agreement (96.15%) between in vitro ER assays and FES-PET. The ER status diagnosis sensitivity of18F-FES was 93.33% and the speci fi city was 100% when using cut-off value of SUVmax≥1.5. There was a positive correlation between in vitro ER, PR assays and the SUVmaxof18F-FES while in vitro HER-2/neu assays correlatived negatively with18F-FES SUVmax.Conclusion:These results suggested18F-FES may be useful for studying the ER expression of all malignant lesions in patients with breast cancer and guiding individual therapy.

Estrogen receptor; Immunohistochemistry;18F-FES;18F-FDG; ER subtype

10.3969/j.issn.1007-3969.2014.02.008

R737.9

A

1007-3639(2014)02-0128-07

2013-10-17

2014-01-23）

章英劍 E-mail:yjzhang111@aliyun.com