李望華+歐陽(yáng)強(qiáng)

摘要] 目的 探討凋亡調(diào)控因子Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB在卵巢上皮性腫瘤的表達(dá)。 方法 選取2009年3月～2013年3月在我院進(jìn)行手術(shù)切除的卵巢上皮性腫瘤標(biāo)本59例，采用免疫組化SP法，對(duì)卵巢良性腫瘤、卵巢交界性腫瘤、卵巢癌中凋亡調(diào)控因子X(jué)IAP、轉(zhuǎn)錄因子c-Jun、NF-κB的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。 結(jié)果 卵巢癌組Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB陽(yáng)性表達(dá)率分別為74.29%、71.43%、82.86%及82.86%，均高于卵巢良性腫瘤組和卵巢交界性腫瘤組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。卵巢癌組織中XIAP、Survivin、c-Jun均與NF-κB表達(dá)呈正相關(guān)（P < 0.05）。 結(jié)論 臨床上檢測(cè)上皮性卵巢腫瘤中的Survivin、XIAP、c-Jun、NF-κB，對(duì)預(yù)防、治療上皮性卵巢腫瘤有十分重要的價(jià)值。

[關(guān)鍵詞] 凋亡調(diào)控因子；Survivin；XIAP；c-Jun；NF-κB；卵巢上皮性腫瘤

[中圖分類(lèi)號(hào)] R737.31 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）02-0021-03

Expression and its significance of apoptosis regulatory factors Survivin， c-Jun， XIAP and NF-κB in ovarian epithelial tumors

LI Wanghua1 OUYANG Qiang2

1.Department of Gynaecology，Dingcheng Maternal and Child Care Service Centre of Changde City in Hunan Province， Changde 451001， China； 2.Department of Gynaecology， Hunan Provincial Tumor Hospital， Changsha 410013， China

[Abstract] Objective To explore the expression and significance of apoptosis regulatory factors Survivin， c-Jun， XIAP and NF-κB in ovarian epithelial carcinoma. Methods A total of 59 patients of operation excision of ovarian epithelial tumor specimens were collected in our hospital from March 2009 to March 2013. The immunohistochemical SP method was used to detect the ovarian benign tumor， ovarian cancer， ovarian cancer， apoptosis of XIAP transcription factor AP-1 （c-Jun） and the expression of NF-κB in detection. Results The positive expression rate of survivin， XIAP， c-jun and NF-κB of ovarian cancer group were 74.29%，71.43%，82.86%，82.86% respectively， and all were higher than that in benign ovarian tumors group and borderline ovarian tumors group， and the difference was statistically significant（P < 0.05）； The XIAP， Survivin， c-Jun of ovarian cancer tissue were positively correlated with NF-κB expression （P < 0.05）. Conclusion The clinical detection of Survivin， XIAP， c-Jun， NF-κB in epithelial ovarian tumor is very important to the prevention and treatment of epithelial ovarian tumors.

[Key words] Apoptosis regulatory factors； Survivin； XIAP； c-Jun； NF-κB； Epithelial ovarian tumor

細(xì)胞凋亡的失衡與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。XIAP蛋白在正常組織中低表達(dá)，而在多種惡性腫瘤中呈現(xiàn)高表達(dá)。Survivin在多種腫瘤組織和人類(lèi)胚胎組織中廣泛表達(dá)，其可以抑制細(xì)胞凋亡和有絲分裂。卵巢腫瘤是婦科常見(jiàn)腫瘤。目前凋亡調(diào)控因子X(jué)IAP、Survivin、Caspase-3和轉(zhuǎn)錄因子c-Jun、NF-κB在卵巢上皮性腫瘤中表達(dá)報(bào)道很少[1]。本研究通過(guò)檢測(cè)卵巢上皮性腫瘤中XIAP、Survivin、c-Jun及NF-κB表達(dá)，來(lái)探討其在卵巢腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及與臨床病理的聯(lián)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年3月～2013年3月在我院就診的卵巢上皮性腫瘤患者59例，所有患者均行手術(shù)切除?；颊吣挲g最小23歲，最大75歲，平均（43.67±7.38）歲。其中卵巢癌35例，卵巢良性腫瘤12例，卵巢交界性腫瘤12例。endprint

1.2 方法

采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連結(jié)法（SP法），對(duì)卵巢交界性腫瘤、卵巢良性腫瘤、卵巢癌中凋亡調(diào)控因子X(jué)IAP、轉(zhuǎn)錄因子AP-1（c-Jun）、NF-κB的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。方法：烤片，68℃，20 min；常規(guī)二甲苯進(jìn)行脫蠟，酒精梯度脫水；滅活其內(nèi)源性過(guò)氧化物酶；抗原修復(fù)；滴加適當(dāng)稀釋濃度的一抗：XIAP/Survivin（1∶300）和AP-1（c-Jun）（1∶50），NF-κB p65（1∶200），滴加生物素標(biāo)記二抗，37℃孵育半小時(shí)，PBS沖洗3次，每次5 min；滴加鏈霉素卵白素工作液（辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記），37℃孵育30 min，PBS沖洗3次，每次5 min；DAB/H2O2反應(yīng)染色，自來(lái)水充分沖洗后，用蘇木素進(jìn)行復(fù)染，常規(guī)脫水，透明，干燥，封片。

1.3 結(jié)果判讀

首先要確定免疫組化技術(shù)是否合格，合格的染色結(jié)果應(yīng)該是背景顏色淺淡或無(wú)著色，而陽(yáng)性標(biāo)志物清晰和定位明確，細(xì)胞呈棕黃色著色，陽(yáng)性信號(hào)應(yīng)與被測(cè)抗原所在的部位一致。按細(xì)胞染色強(qiáng)度分：弱陽(yáng)性（+），陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<10%，淡黃色顯色或僅個(gè)別細(xì)胞呈黃至棕黃色；強(qiáng)陽(yáng)性（+++），即陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)>60%以上，多數(shù)細(xì)胞呈黃色至棕黃色染色；中度陽(yáng)性（++），陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及顯色程度介于弱陽(yáng)性與強(qiáng)陽(yáng)性之間。陰性染色結(jié)果是組織內(nèi)預(yù)期特定區(qū)域中未見(jiàn)抗原表達(dá)[2]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，各組間陽(yáng)性表達(dá)率比較采用χ2檢驗(yàn)，各指標(biāo)表達(dá)相關(guān)性采用相關(guān)性分析，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB陽(yáng)性表達(dá)率比較

各組Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=11.379、7.983、14.168、10.139，P均<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 卵巢癌組織中XIAP、Survivin和c-Jun與NF-κB表達(dá)的相關(guān)性分析

卵巢癌組織中XIAP、Survivin、c-Jun和NF-κB分別為0.2413±0.0178、0.2381±0.0168、0.2390±0.0217和0.2476±0.0251。XIAP、Survivin、c-Jun均與NF-κB表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.5231、0.4873、0.4389，P均<0.05）。

3 討論

近年來(lái)，卵巢癌發(fā)病呈現(xiàn)年輕化、增高的趨勢(shì)。卵巢癌發(fā)病隱匿，部分患者臨床有癥狀去就診時(shí)，大部分己發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，死亡率高，給婦女生命健康帶來(lái)極大威脅[3]。原因主要是：早期診斷方法不完善的卵巢癌；卵巢癌早期癥狀隱匿，其位于盆腔的深部；就診時(shí)已發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，病灶不能完全切除。

研究顯示，腫瘤發(fā)生、發(fā)展與細(xì)胞凋亡的失衡有密切關(guān)系。卵巢腫瘤是常見(jiàn)的腫瘤之一，卵巢癌致死率高，占女性生殖器官腫瘤第一位，嚴(yán)重危及患者的生命。XIAP作為凋亡抑制蛋白，在正常組織中很少表達(dá)，而在卵巢腫瘤中高表達(dá)，參與細(xì)胞增殖與惡性轉(zhuǎn)化。Survivin屬于凋亡抑制蛋白家族，在人類(lèi)胚胎組織、腫瘤組織及極少數(shù)正常組織中均有表達(dá)，具有抑制有絲分裂及細(xì)胞凋亡功能。XIAP與Survivin蛋白均通過(guò)直接抑制Caspase-3、7、9的活性，使細(xì)胞凋亡得到抑制。作為核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的NF-κB，在靜息狀態(tài)下，NF-κB與其抑制性蛋白IκB（抑制性蛋白）結(jié)合，起到調(diào)控細(xì)胞增殖、凋亡等作用。

細(xì)胞增殖及凋亡平衡對(duì)維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)起著重大作用，卵巢癌的發(fā)生是細(xì)胞凋亡激活因子受到Survivin抑制的結(jié)果[4，5]。Survivin屬于凋亡抑制蛋白（IAP）家族成員，是現(xiàn)在為止發(fā)現(xiàn)的最小IAP蛋白。其通過(guò)抑制蛋白水解酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)過(guò)程中位于下游的Caspaae-3、Caspase-7活性，發(fā)揮抗凋亡作用，促進(jìn)細(xì)胞增殖。在卵巢腫瘤中，Survivin過(guò)表達(dá)可以預(yù)測(cè)卵巢上皮細(xì)胞癌[6，7]。

NF-κB活性的失控與哺乳動(dòng)物腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，NF-κB的異常表達(dá)及活化在許多腫瘤中均可見(jiàn)到。卵巢組織中NF-κB基因擴(kuò)增常見(jiàn)于多重內(nèi)外因素作用于機(jī)體，其編碼的蛋白在細(xì)胞漿和細(xì)胞核中表達(dá)，細(xì)胞內(nèi)多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路被激活，惡性細(xì)胞異常增生，最終導(dǎo)致癌癥發(fā)生[8，9]。

c-Jun是一種順序特異性轉(zhuǎn)錄激活因子，或激活轉(zhuǎn)錄因子家族成員組成。c-Jun的活性增加與乳腺癌、結(jié)腸癌等腫瘤相關(guān)。本研究中，卵巢癌組Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB陽(yáng)性表達(dá)率均顯著高于卵巢良性腫瘤組和卵巢交界性腫瘤組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。表明NF-κB和c-Jun、Survivin、XIAP對(duì)卵巢癌的發(fā)生發(fā)展可能起著促進(jìn)作用[10，11]。

本研究中，卵巢癌組織中XIAP、Survivin、c-Jun和NF-κ分別為（0.2413±0.0178）、（0.2381±0.0168）、（0.2390±0.0217）和（0.2476±0.0251）。XIAP、Survivin、c-Jun均與NF-κB表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.5231、0.4873、0.4389，P均<0.05）。說(shuō)明凋亡調(diào)控因子X(jué)IAP、Survivin的表達(dá)與轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的表達(dá)具有相關(guān)性，這提示NF-κB對(duì)XIAP、Survivin的表達(dá)可能具有促進(jìn)作用。轉(zhuǎn)錄因子c-Jun和轉(zhuǎn)錄因子NF-κB在卵巢癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)，提示二者在卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中可能起著相互促進(jìn)的作用。

綜上所述，在上皮性卵巢腫瘤中對(duì)Survivin、XIAP、c-Jun、NF-κB的表達(dá)進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，不僅有助于闡明上皮性卵巢腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，對(duì)預(yù)防、治療上皮性卵巢腫瘤也有重要價(jià)值。

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（收稿日期：2013-08-16）endprint

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