（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，山東泰安　271000）

一例蛋雞馬立克病的綜合診斷

牛玉娟，馬海營，張振東，呂傳位，劉思當(dāng)

（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，山東泰安271000）

對一發(fā)病蛋雞群進(jìn)行剖檢診斷、病理組織觀察及病原學(xué)檢測，診斷為內(nèi)臟型馬立克病，并對發(fā)病原因進(jìn)行分析，以期減少養(yǎng)殖過程中馬立克病發(fā)生和流行的機(jī)會，為蛋雞生產(chǎn)實踐提供借鑒。

蛋雞；馬立克??；診斷；發(fā)病原因；調(diào)查；分析

雞馬立克?。∕arek's disease，MD）是由禽皰疹病毒2型引起的一種淋巴組織增生性傳染性腫瘤性疾病，以內(nèi)臟器官、外周神經(jīng)、虹膜、肌肉和皮膚單獨(dú)或多發(fā)性淋巴樣瘤細(xì)胞浸潤增生為特征[1]，對蛋雞的生產(chǎn)性能造成嚴(yán)重影響。MD是世界上第一種可以用疫苗預(yù)防的腫瘤病，目前對于該病的防制主要以免疫接種為主，市面上存在多種MD疫苗，但由于受母源抗體的干擾、育雛階段的早期感染、超強(qiáng)毒株的出現(xiàn)、免疫抑制性疾病的感染以及疫苗運(yùn)輸、貯存和使用不當(dāng)?shù)榷喾N因素影響，該病的免疫失敗時有發(fā)生［2］。2014年4月山東濰坊市某商品蛋雞存養(yǎng)15000只，于70日齡時部分雞只開始出現(xiàn)死亡，每天20-30只，至119日齡已死淘12%左右，病雞消瘦，病程慢性經(jīng)過。通過對發(fā)病雞剖檢診斷、病理組織學(xué)觀察及病原學(xué)檢測，診斷為內(nèi)臟型MD，并對發(fā)病原因進(jìn)行了初步分析。

1　材料與方法

1.1材料

病死雞5只，剖檢并采集病雞的心、肝、脾、肺、腎、胸腺、腺胃及卵巢等病變組織，于10%福爾馬林溶液中固定，并取肝臟腫瘤組織-20℃保存。

1.2病理組織觀察

將固定組織進(jìn)行石蠟包埋、切片，HE染色，光鏡觀察。

1.3PCR檢測

取病雞的肝臟組織研磨，提取DNA，分別對馬立克病病原、網(wǎng)狀內(nèi)皮增殖癥病原和J亞型禽白血病病原進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

2　結(jié)果

2.1臨床表現(xiàn)及剖檢變化

發(fā)病雞均表現(xiàn)消瘦、精神沉郁、羽毛松亂及發(fā)育不良。剖檢均發(fā)現(xiàn)肝臟表面和切面有孤立、大小不等、隆起的灰白色腫瘤結(jié)節(jié)，病灶切面平整有光澤（見圖1A）；脾臟腫大，表面及切面見粟粒大、灰白色、均質(zhì)的結(jié)節(jié)（見圖1B）；大部分的肺組織被增生的灰白色腫瘤組織取代，組織硬實，切面均質(zhì)致密（見圖1C）；心外膜和心冠脂肪上散在灰白色腫瘤結(jié)節(jié)（見圖1D）；腎臟腫大，表面和切面有大小不等的腫瘤結(jié)節(jié)，腎實質(zhì)幾乎被腫瘤結(jié)節(jié)替代（見圖1E）；腺胃壁顯著增厚、質(zhì)硬灰白色（見圖1F）；腸壁增厚，有結(jié)節(jié)突出的腫瘤病灶（見圖1G）；卵巢見菜花狀的腫瘤病灶（見圖1H）。

圖1剖檢變化

2.2病理組織學(xué)診斷

肝組織內(nèi)見大小不等的淋巴樣瘤細(xì)胞浸潤灶，瘤細(xì)胞為大小不等的淋巴樣細(xì)胞，多見核分裂相（見圖2A）；脾臟白髓、紅髓的正常組織結(jié)構(gòu)消失，被瘤細(xì)胞取代（見圖2B）；肺組織被彌漫性浸潤瘤細(xì)胞取代（見圖2C）；心肌纖維間見彌漫性浸潤的淋巴樣瘤細(xì)胞（見圖2D）；卵泡萎縮，周圍有大量淋巴樣瘤細(xì)胞浸潤（見圖2E）；法氏囊淋巴濾泡萎縮，淋巴細(xì)胞壞死，形成囊腔，淋巴濾泡間瘤細(xì)胞彌漫性浸潤（見圖2F、G）；腎小管周圍瘤細(xì)胞灶狀浸潤，腎組織被取代（見圖2H） ；腦組織內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞增生結(jié)節(jié)（見圖2I）；腺胃、腸道黏膜各層均見淋巴樣瘤細(xì)胞浸潤，并見核分裂相（見圖2J）。

2.3病原學(xué)PCR診斷結(jié)果

將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行1.5%瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果僅馬立克病病原核酸陽性（1200 bp），網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病毒和J亞群白血病的病原均為陰性，結(jié)果見圖3。

圖2病理組織診斷

圖3 PCR擴(kuò)增條帶圖

3　討論

根據(jù)剖檢診斷、病理組織學(xué)觀察及病原學(xué)的檢測結(jié)果，最終確定該病雞患有內(nèi)臟型MD。

近年來，蛋雞群致瘤性病毒混合感染的現(xiàn)象非常普遍，有時還會出現(xiàn)AL、MD混感，腫瘤性疾病給我國蛋雞業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，已成為制約蛋雞業(yè)健康發(fā)展的重要因素［3-4］，如何有效控制雞腫瘤性疾病的發(fā)生已成為養(yǎng)殖場（戶）面對的重大課題。

經(jīng)調(diào)查分析，本蛋雞群發(fā)生MD主要原因可能是：疫苗質(zhì)量或保存不當(dāng)，或存在漏免現(xiàn)象；該養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)管理不善，環(huán)境衛(wèi)生差，上批雞群就曾發(fā)生過MD，病原嚴(yán)重污染有關(guān)。本病發(fā)生后沒有及時確診，淘汰病殘雞，而在誤診的情況下，應(yīng)用了大量抗生素，又造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

建議種雞場要正確選用疫苗，免疫時規(guī)范操作，早期封閉性育雛，控制其他病原尤其是免疫抑制性疾病的病原感染，發(fā)現(xiàn)疑似病例時到有條件的化驗室及時確診，淘汰病殘雞，減少經(jīng)濟(jì)損失。

[1] 王守鷹．一例內(nèi)臟型雞馬立克氏病的診療報告[J].畜禽業(yè)，2010，11（12）：46．

[2] 盧榮華．一起雞馬立克氏病的診斷[J].甘肅畜牧獸醫(yī)，1996，26（4）：20-22．

[3] 曲悅，高立海.尼克珊瑚粉蛋雞馬立克氏病的病理及分子診斷[J].中國家禽，2010，32（21）：49-50.

[4] 倪偉，秦立延，孫洪磊，等. 某海蘭褐雞祖代、父母代及商品代雞血管瘤型ALV-J的分禽與鑒定[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報，2011，42（9）：1341-1345.

Comprehensive Diagnosis of Marek's Disease in a Laying Hen Flock

Niu Yujuan1，Ma Haiying1，Zhang Zhendong1，Lv Chuanwei1，Liu Sidang1

（Shandong Agricultural University，Tai’an，Shandong 271000）

A diseased laying hen fock was subjected to necropsy，histopathological examination and etiologic test，and the disease was diagnosed to be veceral Marek's disease. The causes of the disease were analyzed in order to reduce the opportunities MD occurrence during the farming，providing references for production practice of laying hens.

laying hen；Marek's disease；diagnosis；etiology；investigation

S858.31

：B

：1005-944X（2014）09-0062-03

山東省高等學(xué)?？萍加媱濏椖浚↗14LF03）

：劉思當(dāng)