顧文松，葛洪偉

（1.鎮(zhèn)江天和生物技術(shù)有限公司，江蘇 揚(yáng)中 212214；2.廣西富鳳集團(tuán)，南寧 530001）

仙人掌提取物對(duì)斷奶仔豬豬瘟抗體水平及其生長(zhǎng)性能的影響

顧文松1，葛洪偉2

（1.鎮(zhèn)江天和生物技術(shù)有限公司，江蘇 揚(yáng)中 212214；2.廣西富鳳集團(tuán)，南寧 530001）

仙人掌提取物是一種新型中草藥提取物，為研究其對(duì)斷奶仔豬的免疫促進(jìn)及其生產(chǎn)性能的作用，試驗(yàn)選用21日齡杜×長(zhǎng)×大三元雜交斷奶仔豬96頭，隨機(jī)分成4組，分別為對(duì)照組和3個(gè)試驗(yàn)組，試驗(yàn)期為42 d。在免疫前及免疫后第14、21、28、35和42天從前腔靜脈采血，分離血清，間接方法測(cè)定豬瘟抗體，于第14天稱重。采用在整個(gè)保育期飼料中添加不同劑量的仙人掌提取物和豬瘟疫苗頸部接種斷奶仔豬，研究豬瘟兔化弱毒疫苗與不同劑量仙人掌提取物處理后對(duì)斷奶仔豬免疫機(jī)能及生長(zhǎng)性能的影響。結(jié)果表明，仙人掌提取物按400 mg·kg-1劑量添加與豬瘟疫苗使用，能夠顯著提高斷奶仔豬豬瘟抗體水平，促進(jìn)疫苗的免疫效果。同時(shí)發(fā)現(xiàn)不同劑量的仙人掌提取物組均能不同程度提高斷奶仔豬生長(zhǎng)性能。

仙人掌提取物；豬瘟兔化弱毒疫苗；豬瘟抗體；日增重

仙人掌為仙人掌科仙人掌屬植物，主要分布在南美、非洲、中國(guó)及東南亞和南亞等熱帶和亞熱帶地區(qū)，我國(guó)野生分布的仙人掌主要有仙人掌、梨果仙人掌、綠仙人掌等。本試驗(yàn)所采用的仙人掌廣泛分布在我國(guó)南方沿海各地區(qū)。仙人掌莖含有蛋白質(zhì)、維生素、有機(jī)酸、樹脂、礦物質(zhì)及豐富的黃酮類物質(zhì)，中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，仙人掌味淡、性寒，可行氣活血，清熱解毒，消腫止痛，健脾止瀉，安神利尿，是民間廣泛使用的一種傳統(tǒng)藥材[1-3]。

豬瘟（HC）是由豬瘟病毒（HCV）引起的一種急性、高度接觸性和致死性傳染病，目前世界上有40多個(gè)國(guó)家和地區(qū)有豬瘟流行，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失[4]。近年來(lái)由于多種原因造成豬群免疫功能低下，豬接種豬瘟疫苗后不能產(chǎn)生良好的免疫應(yīng)答，使我國(guó)一些地區(qū)的隱性豬瘟發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。本試驗(yàn)在斷奶仔豬保育階段飼料中添加不同劑量的仙人掌提取物與豬瘟兔化弱毒疫苗接種，然后定期采血、稱重，ELISA試劑測(cè)定豬瘟抗體的動(dòng)態(tài)變化并記錄豬的生長(zhǎng)性能狀況，探索不同劑量仙人掌提取物對(duì)豬瘟疫苗免疫效果的影響，為研究仙人掌提取物作為豬的免疫增強(qiáng)劑提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與豬瘟疫苗

選擇同一品種、胎次基本一致、體重相近的21 d杜×長(zhǎng)×大斷奶仔豬96頭（未免疫過(guò)豬瘟疫苗），隨機(jī)分為4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8頭仔豬。對(duì)照組仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧（不含仙人掌提取物），處理Ⅰ組飼喂基礎(chǔ)日糧+仙人掌提取物400 mg·kg-1，處理Ⅱ組飼喂基礎(chǔ)日糧+仙人掌提取物500 mg·kg-1，處理Ⅲ組飼喂基礎(chǔ)日糧+仙人掌提取物600 mg·kg-1。從仔豬21 d開始試驗(yàn)，試驗(yàn)期為42 d。斷奶仔豬由廣西富鳳集團(tuán)提供。豬瘟兔化弱毒疫苗由中牧南京藥械廠生產(chǎn)。仔豬基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.2 仙人掌提取物的制備

仙人掌提取物為在印度尼西亞Satwa Boga Sam?purna研究所采用新鮮仙人掌通過(guò)乙醇提取和乙醚萃取技術(shù)制取的干粉，該干粉仙人掌苷（分子式：C13H18O9）含量≥4.68%。

1.3 試劑

豬瘟ELISA診斷抗原，豬瘟標(biāo)準(zhǔn)陰性、陽(yáng)性血清由揚(yáng)州大學(xué)微生物實(shí)驗(yàn)室提供；辣根過(guò)氧化物-葡萄球菌A蛋白、牛血清白蛋白購(gòu)自南京建成生物工程研究所，其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純[5]。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)

每組于免疫之前選擇試驗(yàn)豬8頭，記錄好欄號(hào)與耳標(biāo)，分別于免疫當(dāng)天、免疫后第14、21、28、35、42天從前腔靜脈采血，分離血清。間接ELISA方法測(cè)定豬瘟抗體[6]。所有試驗(yàn)斷奶仔豬在免疫當(dāng)天及免疫后每隔兩周于早晨空腹稱重，計(jì)算每組每頭仔豬的平均日增重。準(zhǔn)確記錄每天每個(gè)重復(fù)中仔豬腹瀉頭數(shù)、發(fā)病頭數(shù)、死亡頭數(shù)，計(jì)算發(fā)病率及死亡率。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2003進(jìn)行初步整理，用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用單因子方差分析（One-Way ANOVA）進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，并采用LDS法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 斷奶仔豬豬瘟抗體檢測(cè)

4組斷奶仔豬豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。

由表2可知，在豬瘟兔化弱毒疫苗未免之前，豬瘟平均抗體水很高，達(dá)到1.52～1.71，差異不顯著（P＞0.05），表明剛斷奶的仔豬在母乳中獲得充分的豬瘟抗體。豬瘟疫苗免疫后的1～14 d內(nèi)，豬瘟抗體水平整體下降，到第14天時(shí)抗體水平下降到最低，為1.21～1.32（P＞0.05），這可能是仔豬斷奶不能獲得母乳中抗體，導(dǎo)致母源抗體下降，但從試驗(yàn)數(shù)據(jù)看，處理組比對(duì)照組下降速度慢，幅度小，說(shuō)明仙人掌提取物對(duì)母源抗體有一定維持作用。但到接種21 d后，4個(gè)組的抗體水平均開始上升。到接種后的42 d，發(fā)現(xiàn)處理組的豬瘟抗體水平均高于對(duì)照組，比對(duì)照組顯著提高8.62%～22.41%（P＜0.05），同時(shí)發(fā)現(xiàn)處理Ⅰ組抗體水平最高，比對(duì)照組顯著提高22.41%（P＜0.05）。

表2 4組斷奶仔豬豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2 仙人掌提取物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能測(cè)定結(jié)果

2.2.1 生產(chǎn)性能

試驗(yàn)期間各組平均日增重見(jiàn)表3。

表3 試驗(yàn)期間各組平均日增重 g

由表3可知，飼喂仙人掌提取物的斷奶仔豬日增重在使用仙人掌提取物后14 d內(nèi)高于對(duì)照組（P＞0.05）；28 d，處理Ⅰ、Ⅱ組日增重比對(duì)照組提高5.40%和6.25%，差異顯著（P＜0.05）；42 d，試驗(yàn)組日增重比對(duì)照組提高9.38%～24.44%，差異顯著（P＜0.05），且仙人掌提取物500 mg·kg-1提高最顯著，比對(duì)照組極顯著提高24.44%（P＜0.01）。

2.2.2 疾病控制

試驗(yàn)豬的發(fā)病率與死淘率見(jiàn)表4。

表4 試驗(yàn)豬的發(fā)病率與死淘率 %

由表4可知，在42 d試驗(yàn)期內(nèi)，處理組的仔豬發(fā)生腹瀉情況要比對(duì)照組少，斷奶仔豬精神狀況好于對(duì)照組。所有處理組發(fā)病率和死淘率都比對(duì)照組顯著降低，說(shuō)明仙人掌提取物能夠增強(qiáng)斷奶仔豬的免疫力，從而提高機(jī)體抗病能力。

3 討論

3.1 對(duì)斷奶仔豬豬瘟免疫水平的影響

仙人掌多糖可增加S180荷瘤小鼠腫瘤紅細(xì)胞花環(huán)率，提高紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)促進(jìn)率，降低紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)抑制率，提高紅細(xì)胞表面唾液酸含量，進(jìn)而影響C3b受體來(lái)達(dá)到增強(qiáng)機(jī)體免疫力的效果[7]。顧文松等試驗(yàn)表明，仙人掌提取物可以顯著提高斷奶仔豬的非特異性免疫和腸道中溶菌酶的活性[5]。

本試驗(yàn)也表明，仙人掌提取物與豬瘟疫苗配合使用可顯著增強(qiáng)疫苗的免疫效果，豬瘟疫苗接種42 d后，仙人掌提取物400 mg·kg-1組比對(duì)照組提高24.44%，差異極顯著（P＜0.01）。

3.2 對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響

仙人掌提取物無(wú)毒，能夠顯著提高育肥豬的體重，改善動(dòng)物生產(chǎn)性能[8-11]。本試驗(yàn)表明，仙人掌提取物能夠改善動(dòng)物腸道的菌群落，增加動(dòng)物的采食量，降低動(dòng)物的發(fā)病率[12-14]。仙人掌提取物500 mg·kg-1組平均日增重比對(duì)照組提高22.41%，差異極顯著（P＜0.01），同時(shí)也高于其他各組。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，仙人掌提取物飼喂斷奶仔豬能夠提高豬瘟兔化弱毒疫苗免疫特異性抗體水平，并伴有顯著的增重效果，為提高豬免疫預(yù)防效果提供一條新途徑。

[1]陳朝銀,趙聲蘭,曹建新.仙人掌莖營(yíng)養(yǎng)成分的分析[J].營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),1998,20（1）:111-114.

[2]薛穎,宋曙輝,趙興德,等.食用仙人掌的營(yíng)養(yǎng)成分分析[J].天然產(chǎn)物研究與開放,2000,12（5）:8-13.

[3]陳曉萍,趙湘,付承新,等.仙人掌的藥用研究進(jìn)展[J].中國(guó)中醫(yī)藥科技,1998,5（5）:335-336.

[4]蔡寶祥.家畜傳染病學(xué)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2001.

[5]顧文松,Li W H,劉建,等.仙人掌提取物對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能、抗氧化能力及免疫功能的影響[J].飼料工業(yè),2011,32（15）:23-26.

[6]蘇小運(yùn),許立華,徐學(xué)清,等.豬瘟兔化弱毒株E2蛋白A/D抗原區(qū)基因的原核表達(dá)[J].農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào),2004,12（1）: 71-75.

[7]蘇小運(yùn),繆德年,許立華,等.豬瘟兔化弱毒E2蛋白A/D區(qū)的高效表達(dá)和蛋白純化及其應(yīng)用[J].中國(guó)病毒學(xué),2003,18（2）: 164-168.

[8]Saleem R,Ahmad M,Azmat A,et al.Hypotensive activity,toxicol?ogy and histopathology of opuntioside-I and methanolic extract of Opuntia dillenii[J].Biol Pharm Bull,2005,28（10）:1 844-1 851.

[9]季宇彬,汲晨鋒,鄒翔,等.2種仙人掌多糖對(duì)S180小鼠紅細(xì)胞免疫功能影響的研究[J].中國(guó)中藥雜志,2005,30（9）:690-693.

[10]顧文松,Li W H.仙人掌提取物飼喂大鼠的試驗(yàn)[J].畜牧與獸醫(yī),2013,45（11）:44-46.

[11]顧文松,葛洪偉,褚德民,等.仙人掌提取物對(duì)肥育豬生長(zhǎng)性能及用藥成本的影響[J].養(yǎng)豬,2012（5）:49-50.

[12]顧文松.仙人掌提取物對(duì)肉雞生產(chǎn)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用和腸道微生物區(qū)系的影響[J].中國(guó)飼料,2009（21）:14-16,21.

[13]顧文松,Li W H.仙人掌提取物對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋性能、抗氧化能力、免疫功能及血液生化指標(biāo)的影響[J].中國(guó)飼料,2012（6）: 31-33.

[14]余中華,趙超,賈德峰.仙人掌不同提取物的抑菌效果[J].熱帶作物學(xué)報(bào),2008,29（2）:237-242.

Effect of Cactus Extract for Weaned Swine Fever Antibody Levels and Growth Performance

GU Wensong1,GE Hongwei2

（1.Zhenjiang Tianhe Bio-technology,Co.,Ltd.,Yangzhong 212214,Jiangsu China;2.Guangxi Fufeng Group,Nanning 530001,China）

In order to study the enhanced immune effect on the use of the cactus PE,96 piglets aged 21 days were adding of the different doses of cactus PE and vaccinated with the live attenuated virus vaccine of Hog Cholera simultaneously.The piglets were assigned to four groups,one was the trial group,the others were control groups.The test period was 42 days.The blood was sampled before vaccination and in a period of 42 days postvaccination with an interval of 14,21,28,35 and 42 days to monitor the titter of antibody against Hog Cholera Virus(HCV),and in a period of 14 days to weigh all of the piglets swine.The results indicated that the cactus PE was not only safe but en?hanced the ability of producing antibody against HCV as well for piglets inoculated,and that the optimum dose for use in pigs was 400 mg·kg-1.And the cactus PE groups significantly improved the daily weight gain.

cactus PE;hog cholera lapinized virus vaccine;antibody level;body growth

S816.8；S823

A

1001-0084（2014）08-0044-04

2014-05-08

顧文松（1980-），男，江蘇揚(yáng)中人，碩士研究生，主要從事中草藥對(duì)畜禽疾病的防控和飼料添加劑的研制。