高曉暉，姜唯聲，蘭煒明

(江西省寄生蟲(chóng)病防治研究所，江西南昌330046)

·經(jīng)驗(yàn)交流·

溶血樣本對(duì)血吸蟲(chóng)間接血凝試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的影響

高曉暉，姜唯聲，蘭煒明

(江西省寄生蟲(chóng)病防治研究所，江西南昌330046)

溶血；血吸蟲(chóng)抗體；間接血凝試驗(yàn)；影響

血吸蟲(chóng)間接紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)(IHA)是檢測(cè)血吸蟲(chóng)病人血清抗體常用的方法，廣泛用于疫區(qū)血吸蟲(chóng)病人的篩查[1-3]。該方法在試驗(yàn)環(huán)節(jié)中影響因素較多[4，5]。溶血為血清學(xué)試驗(yàn)疑似干擾物質(zhì)，在日常檢驗(yàn)樣本中常見(jiàn)，但目前市售血吸蟲(chóng)間接血凝試驗(yàn)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)并無(wú)相關(guān)說(shuō)明，為探討溶血樣本是否對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響，保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性，本文采用血吸蟲(chóng)間接血凝試劑對(duì)模擬溶血的血吸蟲(chóng)病人血清進(jìn)行了檢測(cè)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 血吸蟲(chóng)病病人血清來(lái)源以江西省鄱陽(yáng)縣表恩村血吸蟲(chóng)病患者12例為采血對(duì)象。血吸蟲(chóng)病人確認(rèn)以《血吸蟲(chóng)病診斷標(biāo)準(zhǔn)》[5]規(guī)定的糞檢方法(Kato-Katz法和尼龍絹集卵孵化法)，以糞檢1項(xiàng)或2項(xiàng)陽(yáng)性者作為血吸蟲(chóng)病病人診斷標(biāo)準(zhǔn)，用真空負(fù)壓管采集每名患者靜脈血5ml，分離血清。

1.2 血吸蟲(chóng)病病人溶血血清來(lái)源取1.2血吸蟲(chóng)病患者靜脈血，分離后，每位患者取2ml血清，剩余血清與紅細(xì)胞置冰箱凍融2次后，用血細(xì)胞分析儀(希森美康XS－500i型)檢測(cè)每份樣本血紅蛋白含量，再用每位患者血清稀釋各自的溶血樣本，使每份血清樣本血紅蛋白含量分別為4g/L、8g/L、16g/L、32g/L。

1.3 試劑與方法日本血吸蟲(chóng)抗體檢測(cè)試劑盒(IHA法)(江西環(huán)鄱科技有限公司產(chǎn)品，批號(hào)20121027)。試驗(yàn)操作按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，檢測(cè)所有模擬溶血血清樣本，并用無(wú)溶血血清作對(duì)照，每份樣本均作終點(diǎn)抗體滴度測(cè)試。

2 結(jié)果

對(duì)照血清與含血紅蛋白4g/L、8g/L血清樣本檢測(cè)結(jié)果一致，12例患者抗體凝集效價(jià)在1∶20～1∶160之間，抗體平均幾何效價(jià)為1∶47.32；當(dāng)血清中血紅蛋白含量為16g/L時(shí)，有5例樣本抗體效價(jià)較血清樣本下降1個(gè)滴度，12例樣本抗體平均幾何效價(jià)為1∶35.48，而血清中血紅蛋白含量為32g/L時(shí)，所有樣本抗體效價(jià)均下降，較對(duì)照血清均下降1～2個(gè)滴度，抗體平均幾何效價(jià)為1∶22.38(表1)。

表1 溶血樣本對(duì)血吸蟲(chóng)間接血凝試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的影響

3 討論

血吸蟲(chóng)間接血凝試驗(yàn)測(cè)定敏感、特異，操作簡(jiǎn)便，是目前國(guó)內(nèi)應(yīng)用最廣泛的血吸蟲(chóng)病血清學(xué)檢測(cè)方法。溶血樣本檢測(cè)結(jié)果表明，當(dāng)樣本血紅蛋白含量大于或等于16g/L，血吸蟲(chóng)抗體凝集效價(jià)隨血紅蛋白含量升高而下降，而樣本血紅蛋白含量小于16g/L時(shí)，檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照血清一致。陳健康等采用血吸蟲(chóng)病病兔溶血血清進(jìn)行血吸蟲(chóng)間接血凝試驗(yàn)，血清血紅蛋白濃度在10～80g/L范圍內(nèi)，抗體滴度隨血紅蛋白含量增加而下降，呈負(fù)相關(guān)[7]。本試驗(yàn)結(jié)果與上述結(jié)論基本一致，但所檢測(cè)的血清類型不同。

溶血是由于各種原因造成紅細(xì)胞破壞，紅細(xì)胞內(nèi)液游離入血清，對(duì)間接血凝試驗(yàn)的影響可能是溶血時(shí)細(xì)胞內(nèi)液對(duì)血清的稀釋作用。試驗(yàn)結(jié)果顯示，溶血血清樣本血紅蛋白含量大于等于16g/L時(shí)，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響，因此，樣本抗體滴度在陽(yáng)性臨界值時(shí)，出現(xiàn)大于等于16g/L血紅蛋白含量的溶血，可能會(huì)檢出陰性結(jié)果。由于臨床并無(wú)嚴(yán)格的溶血程度劃分標(biāo)準(zhǔn)[8-11]，血清中血紅蛋白含量為16g/L時(shí)，已是肉眼清晰可見(jiàn)，臨床溶血樣本溶血程度血紅蛋白含量大多在16g/L以下，因此血清中含少量血紅蛋白的溶血樣本不影響血吸蟲(chóng)間接血凝試驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果。

[1]吳福東,謝治民,袁斯蛟,等.間接血凝試驗(yàn)診斷血吸蟲(chóng)病的研究[J].中國(guó)血吸蟲(chóng)病防治雜志,1991,3(3)∶138-141.

[2]林丹丹,劉躍民,胡飛,等.中國(guó)日本血吸蟲(chóng)病常用診斷方法現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用價(jià)值的分析與評(píng)估.I.IHA篩查法評(píng)估血吸蟲(chóng)病疫區(qū)人群感染率的評(píng)價(jià)[J].中國(guó)血吸蟲(chóng)病防治雜志,2008,20(3)∶179-183.

[3]陳年高,林丹丹,謝曙英,等.日本血吸蟲(chóng)間接血凝試驗(yàn)診斷試劑盒臨床診斷效能[J].中國(guó)血吸蟲(chóng)病防治雜志,2011,23(4)∶377-379.

[4]許靜,馮婷,郭家綱,等.我國(guó)幾種日本血吸蟲(chóng)病免疫診斷試劑的綜合測(cè)評(píng)[J].中國(guó)血吸蟲(chóng)病防治雜志,2005,17(2)∶116-119.

[5]黃文長(zhǎng),馬細(xì)妹,周憲民.影響血吸蟲(chóng)蟲(chóng)卵抗原間接血凝因素的探討[J].江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1980,22(2)∶49-52.

[6]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.WS261-2006血吸蟲(chóng)病診斷標(biāo)準(zhǔn)[S].中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),2006∶7-8.

[7]陳健康,肖祥.溶血等因素對(duì)血吸蟲(chóng)抗體檢測(cè)影響的實(shí)驗(yàn)觀察[J].安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,1999,5(4)∶374－375.

[8]陳彥,王麗,孫鑫.溶血程度的劃分及其意義[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2003,18(5)∶64-65.

[9]張?jiān)?王薇,周平標(biāo).標(biāo)本溶血對(duì)TP、AST測(cè)定的干擾及糾正[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),2004,22(1)∶79.

[10]武春梅,李玲,徐麗萍,等.溶血和標(biāo)本保存條件對(duì)血清NSE檢驗(yàn)結(jié)果的影響[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013(34)∶2591-2593.

[11]張愛(ài)華,王小芳,陳桂蘭.溶血對(duì)常見(jiàn)生化指標(biāo)的影響及其校正方法的探討[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2014,32(4)∶491-492.

R446.62，R383.2+4

B

1674-1129(2014)06-0798-02

2014-08-15；

2014-10-10)

DOI∶10.3969/j.issn.1674-1129.2014.06.063