徐秀云，周根水，童小燕，劉昕

(江西省兒童醫(yī)院輸血科，江西南昌330006)

·檢驗(yàn)與臨床·

南昌市ABO血型不合新生兒溶血病抗AB檢測(cè)結(jié)果分析

徐秀云，周根水，童小燕，劉昕

(江西省兒童醫(yī)院輸血科，江西南昌330006)

目的了解南昌地區(qū)母嬰ABO血型不合新生兒溶血病(HDN)中,抗AB檢出率及患兒血型分布特點(diǎn)。方法對(duì)2010年12月至2013年3月期間入院診斷為高膽紅素血癥新生兒的血液標(biāo)本進(jìn)行“三項(xiàng)試驗(yàn)”。結(jié)果在1235例ABO血型不合新生兒溶血病患者中,檢出抗AB陽(yáng)性共245例，檢出率為19.84%；其中A型患兒167例,占抗AB陽(yáng)性病例中的68.16%；B型患兒78例，占抗AB陽(yáng)性病例中的31.84%。結(jié)論南昌地區(qū)新生兒ABO溶血病患兒中抗AB陽(yáng)性的檢出率為19.84%，其中有91.43%的病例年齡集中在出生一周內(nèi)，抗AB陽(yáng)性的A型患兒明顯多于B型。

抗AB；ABO血型;新生兒溶血病

DOI∶10.3969/j.issn.1674-1129.2014.06.039

ABO新生兒溶血病(ABO-HDN)是因母嬰ABO血型不合，母親體內(nèi)IgG抗A(B)經(jīng)胎盤(pán)主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入胎兒循環(huán)，包被并破壞胎兒紅細(xì)胞所致的同族被動(dòng)免疫性溶血，常發(fā)生在患兒為A或B型，其母親為O型血時(shí)。已知新生兒血清中的抗體通常為IgG性質(zhì)的，并且來(lái)源于母親，一般嬰兒要到3個(gè)月大時(shí)，自己產(chǎn)生的IgG抗A(或B)抗體才能被檢出，以后效價(jià)持續(xù)增高，5～10歲時(shí)達(dá)到成年人水平[1]。Dodd BE等作者通過(guò)吸收放散試驗(yàn)證實(shí)O型人血清中的除抗A和抗B抗體外，還存在一種抗AB(也稱抗C或抗A+B[2]或抗A,B[3])，它并非是單獨(dú)的抗A和抗B兩種抗體的同時(shí)存在，而是一類不可分離的交叉反應(yīng)性抗體[4]。它針對(duì)的特異性是A和B抗原所共有的三糖抗原表位[5]，所以既能凝集A型又能凝集B型紅細(xì)胞。在ABO血型不合新生兒溶血病血清學(xué)檢查試驗(yàn)中我們可以觀察到，有一部分嬰兒無(wú)論是A型或B型，其紅細(xì)胞放散液中均可同時(shí)檢出抗A和抗B。有關(guān)新生兒ABO溶血病中檢出抗AB是否有一定規(guī)律與特點(diǎn),臨床未見(jiàn)報(bào)道，本文分析了近年來(lái)南昌地區(qū)新生兒ABO溶血病中抗AB的檢出情況，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源2010年12月至2013年3月期間入院，因出生后漸進(jìn)性黃疸加重，并以未結(jié)合膽紅素升高為主，母嬰ABO血型不合，經(jīng)“三項(xiàng)試驗(yàn)”檢測(cè)證實(shí)為新生兒ABO溶血癥的患兒1235例,其中檢出抗AB交叉反應(yīng)性抗體245例。

1.2 試劑ABO試劑紅細(xì)胞，抗-IgG,C3d(多特異性)，均為上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供；微柱凝膠卡，由長(zhǎng)春博迅生物有限公司提供，所有試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 儀器KA－2200專用離心機(jī)(日本久保田)；HH-W420水浴箱(金壇市醫(yī)療儀器廠)；TD-3A型血型血清學(xué)專用離心機(jī)(長(zhǎng)春博研)，F(xiàn)YQ型免疫微柱孵育器(長(zhǎng)春博研)。

1.4 方法ABO血型鑒定、直接抗人球蛋白試驗(yàn)、游離抗體試驗(yàn)、抗體放散試驗(yàn)按文獻(xiàn)[2]進(jìn)行；并采取微柱凝膠法進(jìn)行同步試驗(yàn)。

1.5 HDN實(shí)驗(yàn)診斷標(biāo)準(zhǔn)新生兒出生后血清膽紅素漸進(jìn)升高，以未結(jié)合膽紅素升高為主；母嬰ABO血型不合；新生兒溶血三項(xiàng)試驗(yàn)：患兒紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)、患兒紅細(xì)胞抗體放散試驗(yàn)、患兒血清中游離抗體測(cè)定試驗(yàn)中，有抗體放散試驗(yàn)陽(yáng)性即可確診。直接抗人球蛋白試驗(yàn)和(或)游離抗體試驗(yàn)陽(yáng)性而抗體放散試驗(yàn)陰性時(shí)，結(jié)合患兒其他檢查與臨床癥狀具體分析。

1.6 抗AB檢測(cè)與鑒定方法以A型嬰兒為例，其紅細(xì)胞上只能結(jié)合來(lái)自媽媽的IgG抗A和或抗AB，來(lái)自媽媽的IgG抗B則不會(huì)結(jié)合到紅細(xì)胞上，標(biāo)本經(jīng)過(guò)數(shù)次洗滌去除了血清中游離的IgG抗A、抗B或抗AB，只留下壓積紅細(xì)胞(致敏IgG抗A和或抗AB)，再經(jīng)過(guò)放散實(shí)驗(yàn)結(jié)合上去的IgG抗A或抗AB會(huì)被放散到放散液中。取最后一次洗滌上清液做對(duì)照，與放散液同時(shí)分別與A、B、O細(xì)胞孵育反應(yīng)，如果上清液三管均陰性，而放散液的A管、B管都陽(yáng)性，O管陰性，就能判斷抗AB的存在。B型嬰兒同理可判斷抗AB的存在。

2 結(jié)果

2.1 抗AB檢出率在1235例高膽紅素血癥并經(jīng)“三項(xiàng)試驗(yàn)”檢測(cè)證實(shí)為新生兒ABO溶血癥患兒中，檢出245例抗AB陽(yáng)性，檢出率為19.84%。其中A型患兒167例,占抗AB陽(yáng)性病例中的68.16%；B型患兒78例，占抗AB陽(yáng)性病例中的31.84%。

2.2 直接抗球蛋白試驗(yàn)在245例抗AB陽(yáng)性患兒中，直抗陰性64例，占總數(shù)的26.12%，直抗陽(yáng)性181例，占總數(shù)的73.88%。

2.3 抗體放散試驗(yàn)結(jié)果比較見(jiàn)表1。

表1 245例抗-AB陽(yáng)性HDN患兒放散試驗(yàn)結(jié)果比較

在167例A型中，凝集強(qiáng)度抗A相當(dāng)于抗B的占65.87%，抗A高于抗B的占22.16%，少數(shù)抗B高于抗A，占11.98%；在78例B型中，凝集強(qiáng)度抗B相當(dāng)于抗A的占57.69%，抗B高于抗A的占32.05%，少數(shù)抗A高于抗B，占6.41%。

2.4 血型及性別分布比率245例抗AB陽(yáng)性患兒血型及性別的百分比構(gòu)成見(jiàn)表2。

表2 245例抗AB陽(yáng)性HDN患兒血型及性別百分比

2.5 病例年齡分布特點(diǎn)見(jiàn)表3和圖1。

表3 245名抗AB陽(yáng)性HDN患兒年齡頻數(shù)分布

3 討論

新生兒ABO溶血病是母嬰血型不合溶血病中最常見(jiàn)的一種，多數(shù)發(fā)生于O型母親生出A型或B型嬰兒時(shí)，是由于O型母親體內(nèi)往往會(huì)比A型或B型母親產(chǎn)生更高效價(jià)和數(shù)量的IgG類抗A、抗B和抗AB抗體。因?yàn)榧t細(xì)胞上一般A抗原位點(diǎn)(抗原決定簇)比B抗原位點(diǎn)要多，而且本地區(qū)人群中A型血型者所占比率高于B型[6]，所以在本研究中，245例抗AB抗體陽(yáng)性患兒中A型167例，B型78例，A型嬰兒比B型嬰兒更多被觀察到發(fā)生新生兒ABO溶血病[2,7-10]。

圖1245 例抗AB陽(yáng)性HDN患兒年齡分布

抗AB抗體陽(yáng)性嬰兒中，有91.43%的病例年齡集中在出生一周內(nèi)，男性多于女性。由于新生兒ABO血型抗原表達(dá)不完全,且直抗試驗(yàn)敏感性有限，有26.12%的直抗試驗(yàn)是陰性。

由于A型嬰兒紅細(xì)胞只能被來(lái)自母體的抗A和抗AB致敏，預(yù)期抗體放散試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)為抗A凝集強(qiáng)度高于抗B或相同于抗B，同理由于B型嬰兒紅細(xì)胞只能被來(lái)自母體的抗B和抗AB致敏，抗體放散試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)為抗B凝集強(qiáng)度高于抗A或相同于抗A。結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)在167例A型中，有20例嬰兒抗B凝集強(qiáng)度高于抗A，占總數(shù)的11.98%；78例B型中，也有5例嬰兒抗A凝集強(qiáng)度高于抗B，占總數(shù)的6.41%。排除了試驗(yàn)差錯(cuò)的可能性，要解釋這種“不合常理”的現(xiàn)象，可能是因?yàn)榭笰B抗體在不同人群中也是多克隆異質(zhì)性的，它們分別與A抗原、B抗原的結(jié)合強(qiáng)度與解離能力是各不相同的。對(duì)于這種較為奇特的現(xiàn)象我們將進(jìn)一步驗(yàn)證并探尋其可能存在的理論依據(jù)。

吳遠(yuǎn)軍[3]等作者證實(shí)了O型孕婦血清IgG抗AB可通過(guò)胎盤(pán)致敏妊娠的A型及B型胎兒紅細(xì)胞，引起新生兒溶血病，但新生兒溶血的嚴(yán)重程度雖與IgG抗體效價(jià)高低相關(guān),但并不完全一致。對(duì)照臨床病史資料我們也發(fā)現(xiàn)抗AB抗體的檢出與否與新生兒溶血的嚴(yán)重程度并不完全一致。因?yàn)槿苎膰?yán)重程度除了與致敏紅細(xì)胞的抗體數(shù)量有關(guān)外,更重要的是與致敏紅細(xì)胞的抗體IgG亞類有關(guān)。

[1]李勇,馬學(xué)嚴(yán).實(shí)用血液免疫學(xué)∶血型理論和實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京∶科學(xué)出版社,2006∶141-142.

[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京∶東南大學(xué)出版社,2006∶266-268.

[3]吳遠(yuǎn)軍,朱學(xué)海.O型孕婦IgG抗A,B對(duì)新生兒紅細(xì)胞致敏作用的研究[J].中國(guó)輸血雜志,2009,22(7)∶559-561.

[4]Dodd BE.Linked anti-A and anti-B antibodies from group O sera [J].Br J Exp Pathol,1952,33(1)∶1-18.

[5]Conger JD,Chan MM,DePalma L.Analysis of the repertoire of human B-lymphocytes specific for type A and type B blood group terminal trisaccharide epitopes[J].Transfusion,1993,33(3)∶200-207.

[6]劉福昌,張清平,潘繼紅,等.南昌地區(qū)人群ABO、Rh血型分布調(diào)查[J].江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2004,44(3)∶88-89.

[7]韋光萍,楊文勇.新生兒溶血病148例臨床及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果分析[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合兒科學(xué),2014,6(1)∶67-68.

[8]李慧平,王柏麗,田建波,等.新生兒溶血病相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的結(jié)果分析[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2013,8(13)∶152-153.

[9]陳燕萍,王長(zhǎng)奇,朱金萍.新生兒溶血病血清免疫三項(xiàng)抗體檢測(cè)在臨床上應(yīng)用[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2009,27(5)∶545.

[10]楊劍,劉劍榮,黃永建,等.新生兒ABO溶血病溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2010,28(5)∶525-526.

∶R556.6+3

∶A

1674-1129(2014)06-0748-03

2014-06-20；

2014-10-20)

周根水。