廖晚珍，曾令兵，胡妮婭，胡雪飛，彭衛(wèi)華，孫愛娣，余陽，劉洋

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西南昌330006)

·論著·

布魯菌常規(guī)檢測與結(jié)果分析

廖晚珍，曾令兵，胡妮婭，胡雪飛，彭衛(wèi)華，孫愛娣，余陽，劉洋

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西南昌330006)

目的探討簡便可靠實(shí)用的布魯菌早期檢出方法，為布魯菌病的及時(shí)診治提供依據(jù)。方法應(yīng)用BACTEC 9120或BACT/ALERT 3D等系統(tǒng)進(jìn)行血或骨髓培養(yǎng)，然后取陽性瓶增菌液轉(zhuǎn)種血平板和巧克力等平板，再經(jīng)VITEK-2-Compact全自動(dòng)微生物分析儀或API 20 E鑒定系統(tǒng)進(jìn)行菌種鑒定。結(jié)果布魯菌在上述血培養(yǎng)儀的瓶中2～4d可獲得陽性生長物，經(jīng)VITEK-2-Compact儀(或API 20 E鑒定系統(tǒng))次日能得到鑒定結(jié)果。結(jié)論Compact鑒定儀(或API 20E鑒定系統(tǒng))對(duì)布魯菌的鑒定簡單、可靠、經(jīng)濟(jì)、實(shí)用，且不會(huì)漏檢和誤檢，是目前常規(guī)檢測布魯氏菌的可靠方法。

布魯菌；血培養(yǎng)；細(xì)菌鑒定儀；早期診斷

布魯菌病(Brucellosis，布病)是由布魯菌(Brucella)侵入機(jī)體引起世界性、多宿主感染的人獸共患傳染病[1]，以人類感染有關(guān)的動(dòng)物主要是牛、羊、豬(國內(nèi)則以羊?yàn)橹?。近年來，布病的人畜疫情在我國和世界部分國家、地區(qū)都出現(xiàn)了回升勢(shì)頭，據(jù)國家疾病監(jiān)測系統(tǒng)的病例統(tǒng)計(jì)顯示：人間布病病例報(bào)告逐漸上升，西北、東北某些省份、內(nèi)蒙古流行相當(dāng)嚴(yán)重，有些布病罕見的地區(qū)臨床報(bào)道也在增多，現(xiàn)已陸續(xù)覆蓋各地，而且布病所引起的臨床癥狀日趨多變，表現(xiàn)復(fù)雜，病情輕重不一，且多個(gè)系統(tǒng)受損?？傊?，特征性的病例現(xiàn)已較少見到，因而在一定程度上給臨床的早期診斷帶來不少困難。目前，布病的防控形勢(shì)越來越嚴(yán)峻。傳統(tǒng)的布魯菌或生物型鑒定主要依據(jù)CO2的生長要求、H2S、噬菌體裂解、硫堇、堿性復(fù)紅染料抑菌試驗(yàn)和單項(xiàng)特異性血清(A、M和R血清)凝集試驗(yàn)[2]，該分型方法是金標(biāo)準(zhǔn)，其缺點(diǎn)是操作復(fù)雜、時(shí)間長。近年來應(yīng)用PCR方法檢測BCSP 31屬基因與AMOS種/型基因[3，4]即獲得屬、種特異條帶，但過程比較復(fù)雜，且受條件的限制而難以廣泛應(yīng)用，不適合布病的臨床常規(guī)診斷。本研究采用美國BD公司與法國生物梅里埃公司的血培養(yǎng)系統(tǒng)先進(jìn)行血液(或骨髓液等)的增菌培養(yǎng)，再利用純培養(yǎng)物經(jīng)VITEK-2-Compact全自動(dòng)微生物分析儀或API 20 E鑒定系統(tǒng)進(jìn)行布魯菌的鑒定，該方法簡便、可靠、經(jīng)濟(jì)、鑒定周期短，其結(jié)果能為臨床診斷布魯氏菌病提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 簡要臨床資料病例1，岳XX，男，工人，35歲。主訴：反復(fù)發(fā)熱2個(gè)月，乏力1月余。2013年6月10日無明顯誘因出現(xiàn)發(fā)熱，最高時(shí)39℃，伴畏寒、咳嗽、咳痰。當(dāng)時(shí)在本地醫(yī)院給予左氧氟沙星、阿奇霉素等抗炎4d，體溫正常后出院。8月14日患者又發(fā)熱，再入當(dāng)?shù)蒯t(yī)院，給予上述同樣的藥物治療，體溫正常后出院。9月22日再次發(fā)熱，最高時(shí)40.2℃，入我院感染科。當(dāng)天給予地塞米松靜滴并送骨髓液培養(yǎng)，由于體溫仍高于38℃，又給予莫西沙星抗感染、恩替卡韋抗病毒治療，體溫正常后出院。出院后實(shí)驗(yàn)室報(bào)告骨髓液中培養(yǎng)出馬爾他(羊)布魯菌。患者出院后3d又發(fā)熱，最高時(shí)39℃，再入我院。

病例2，李XX，男，工人，66歲。主訴：反復(fù)發(fā)熱1個(gè)月。2013年7月中旬出現(xiàn)不明原因發(fā)熱，以中午、夜間為主，體溫38.5℃，伴有大汗，入我省某省級(jí)人民醫(yī)院，住院期間血培養(yǎng)陽性(但未鑒定出布氏菌)，臨床只好以一般革蘭陰性桿菌感染予以左氧氟沙星治療，體溫正常后出院。7月下旬患者又發(fā)熱，因未作任何處置，體溫一直在38℃上下，8月12日入我院中醫(yī)科，16日抽取骨髓液培養(yǎng)，22日?qǐng)?bào)告培出馬爾他布魯菌，轉(zhuǎn)感染科治療。

病例3，譚XX，男，學(xué)生，15歲。主訴：發(fā)熱40余天，淺表淋巴結(jié)腫大10余天。2013年6月初患者出現(xiàn)不明原因發(fā)熱，熱形不規(guī)則，最高時(shí)39.8℃，自行服感冒藥癥狀無改善，遂當(dāng)?shù)卦\所予以抗感染治療后體溫降至正常(用藥不詳)，但有反復(fù)。6月29日家屬發(fā)現(xiàn)患兒頸部、腋窩多個(gè)腫大淋巴結(jié)，至本縣中醫(yī)院診治，并予以抗感染治療(用藥不詳)，體溫仍反復(fù)。7月5日至我院就診，門診以“發(fā)熱待查”收入感染科。入院后曾考慮淋巴瘤(彩超證實(shí)頸部、腋下、鎖骨上、腹股溝有腫大淋巴結(jié))送淋巴結(jié)活檢和抽血液培養(yǎng)，同時(shí)給予頭孢西丁抗感染等，但患兒7月9日仍發(fā)熱，最高時(shí)39.2℃，口服退熱藥能降至正常，但易反復(fù)，7月10日送骨髓液培養(yǎng)并行頭孢噻肟治療，3天后體溫正常，7月15日淋巴結(jié)病理報(bào)告為慢性炎癥、排除淋巴瘤。7月16日再次發(fā)熱，當(dāng)日血液和骨髓液培養(yǎng)均報(bào)告為培養(yǎng)出馬爾他布魯菌。追問病史，患兒曾有羊接觸史。

病例4，李XX，女，農(nóng)民，53歲。主訴：反復(fù)發(fā)熱。2012年4月初開始連續(xù)發(fā)熱20余天，最高時(shí)39℃，治療后體溫正常(用藥不詳)。7月1日患者又發(fā)熱，最高時(shí)39℃，多數(shù)于午后或下午，可持續(xù)約10小時(shí)才能自行降至正常。因診斷不清，于7月6日以“發(fā)熱待查”收入我院感染科。入院后給予莫西沙星和安乃近與雙氯芬酸鈉栓治療，但仍有發(fā)熱。由于發(fā)熱原因不明，且三系減少、脾腫大等需要進(jìn)一步檢查，但又涉及到費(fèi)用和檢查風(fēng)險(xiǎn)，患者要求出院。出院后不久又發(fā)熱，最高時(shí)39℃，8月15日再入我院，16日送骨髓培養(yǎng)，22日?qǐng)?bào)告培養(yǎng)出馬爾他布魯菌，追問病史，患者既往有服用未消毒牛奶和羊奶史。

病例5，李XX，女，學(xué)生，22歲。主訴：發(fā)熱半個(gè)月。2012年4月18日出現(xiàn)發(fā)熱，最高時(shí)41℃，一般午后逐漸升高，伴畏寒等不適，當(dāng)時(shí)入本地縣醫(yī)院給予頭孢哌酮/他唑巴坦點(diǎn)滴，但仍發(fā)熱。5月2日入我院感染科，3日體溫39.2℃，抽取血液和骨髓液送培養(yǎng)，同時(shí)給予頭孢哌酮鈉2.0g靜脈點(diǎn)滴(Bid)，仍高熱(39.8℃)，后改用美羅培南0.5gQ8h，體溫降至38.4℃，5月10日血液和骨髓液均培養(yǎng)出馬爾他布魯菌(此前4月24日當(dāng)?shù)乜h醫(yī)院培養(yǎng)為陰性)。追問病史，患者既往有羊接觸史和食羊肉史(后來其父親和妹妹都檢出布魯菌)。

病例6，陳XX，女，52歲，工人。主訴：反復(fù)發(fā)熱4個(gè)多月。2013年6月27日突然發(fā)熱，39.5℃，畏寒。自行服感冒藥后會(huì)大量出汗，然后體溫降至正常，但停藥后又上升，再服感冒藥，體溫又下降。如此反復(fù)1周病情不見好轉(zhuǎn)后于7月4日入當(dāng)?shù)厥屑?jí)醫(yī)院并給予頭孢曲松鈉靜滴，治療無效后改用阿莫西林/克拉維酸鉀與克林霉素治療4d后熱退，此后體溫正常。8月上旬患者又發(fā)熱，39℃以上，又行上述藥物治療5d后熱退，此后體溫一直穩(wěn)定。10月上旬患者出現(xiàn)關(guān)節(jié)痛并發(fā)熱，39℃以上，繼續(xù)上述藥物治療5d后，體溫又恢復(fù)到正常。11月5日再次發(fā)熱，39℃，入我院風(fēng)濕免疫科治療，同時(shí)送骨髓液和血液培養(yǎng)，考慮到患者有關(guān)節(jié)痛和發(fā)熱，還是給予激素和抗風(fēng)濕治療，11月11日骨髓液和血液均培養(yǎng)出馬爾他布魯菌。

上述6例中男性3例、女性3例，已婚4例、未婚2例，工人3例、農(nóng)民1例、學(xué)生2例，年齡15~66歲，均有反復(fù)發(fā)熱，最長4個(gè)月、最短半個(gè)月，最初發(fā)熱時(shí)均無明顯誘因，大部分呈高熱(5例39℃~41℃，1例38.5℃)。6例中1例有羊接觸史及全身淋巴結(jié)腫大，1例有服用未消毒牛奶和羊奶史，1例有羊接觸和食羊肉史(其父親與妹妹都檢出布魯菌)。6例經(jīng)病原學(xué)確診后即按WHO的標(biāo)準(zhǔn)治療方案以多西環(huán)素、利福平治療后痊愈。

1.2 細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定由病房護(hù)士以無菌技術(shù)抽取靜脈血液注入BACTEC 9120含樹脂需氧培養(yǎng)瓶或BACT/ALERT 3D需氧中和抗生素培養(yǎng)瓶中，每瓶5~10ml(骨髓液則由醫(yī)生抽取2~3ml)，培養(yǎng)瓶送至微生物室并及時(shí)放入血培養(yǎng)儀中，待陽性報(bào)警后再抽取瓶中標(biāo)本接種血平板、巧克力等平板以及涂片革蘭染色，平板放置5%二氧化碳環(huán)境孵育24~48h，然后挑取純培養(yǎng)物進(jìn)行第二次涂片染色并調(diào)至所需濃度上機(jī)進(jìn)行菌株鑒定，儀器與相關(guān)配套材料為法國生物梅里埃公司的VITEK-2-Compact與GN-21341卡。鑒定儀按ISO 15189認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)，每月采用ATCC25922、ATCC25923、ATCC 27853、ATCC 700323、ATCC 700603、ATCC 700327對(duì)檢測儀進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。

1.3 分子生物學(xué)檢測隨機(jī)抽取6株菌中1株菌(即病例1)作為分子生物學(xué)的檢測標(biāo)本。DNA提?。撼槿〗?jīng)VITEK-2-Compact儀器鑒定為布魯菌純培養(yǎng)物接種巧克力平板，培養(yǎng)48h后采用煮沸法提取細(xì)菌核酸。BCSP 31-PCR法菌屬鑒定：采用布魯菌屬特異性基因BCSP-31作為定屬基因，按照文獻(xiàn)[5，6]提供的引物序列和參數(shù)進(jìn)行BCSP-PCR檢測。AMOS-PCR法菌種鑒定：采用文獻(xiàn)[7]提供的以布魯菌屬插入系列IS711為基礎(chǔ)建立的牛(A)、羊(M)、綿羊附睪(O)、豬(S)種布魯菌多重PCR (AMOS-PCR)進(jìn)行種鑒定(陽性對(duì)照菌株與PCR相關(guān)試劑分別購自中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所與大連寶生物工程有限公司)。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定結(jié)果血液或骨髓液接種血培養(yǎng)瓶后一般3～4d出現(xiàn)較明顯的細(xì)菌生長(儀器陽性報(bào)警)，轉(zhuǎn)種血平板、巧克力平板48h后可見大小約0．5mm、圓形、邊緣整齊、無色半透明、呈露滴狀、折光明亮、表面光滑濕潤、稍隆起、均質(zhì)樣菌落。革蘭染色為陰性短小桿菌，多為單個(gè)、少數(shù)呈雙排列，菌落、菌體形態(tài)符合布魯菌。挑取巧克力平板菌落接種GN-21341卡上機(jī)并過夜后儀器自動(dòng)判讀為馬爾他布魯菌(6株布魯菌經(jīng)江西省CDC布魯菌虎紅玻片凝集試驗(yàn)均為陽性，即試管凝集試驗(yàn)效價(jià)1：200～1：400)。

2.2 分子生物學(xué)檢測結(jié)果采用分子生物學(xué)方法對(duì)其鑒定，布魯菌屬特異BCSP-31-PCR檢測出225bp的特異條帶(圖1)，種特異AMOS-PCR鑒定為羊種布魯菌(圖2)，與上機(jī)鑒定結(jié)果完全一致。

3 討論

布魯菌病過去多見于牧區(qū)，近年來農(nóng)村和城市的病例也在增多。該病的臨床表現(xiàn)多樣，除了間斷發(fā)熱，特殊癥狀和體征較少。因此，必須與其他發(fā)熱性疾病相鑒別，從患者感染標(biāo)本中分離出布魯菌為確診的依據(jù)。漏檢和錯(cuò)報(bào)都將給診治帶來嚴(yán)重的后果。本研究中病例2、5就是兩個(gè)典型病例。病例2，2013年7月中旬在我省某省級(jí)人民醫(yī)院住院時(shí)(即第一次發(fā)熱)血培養(yǎng)呈陽性，本來很有診斷價(jià)值，但該院微生物室未能鑒定出布魯菌，只報(bào)告為“培養(yǎng)出陰性桿菌”的報(bào)告，導(dǎo)致臨床按一般革蘭陰性桿菌敗血癥治療。病例5也存在類似的問題，患者2012年4月18日開始發(fā)熱，但4月24日的血培養(yǎng)報(bào)告為陰性，該“陰性”結(jié)果是否與患者用藥(頭孢哌酮/他唑巴坦)、采血時(shí)機(jī)等因素有關(guān)，還是檢驗(yàn)人員自身的問題，現(xiàn)已不得而知。

圖1 布病患者隨機(jī)抽樣分離菌株BCSP31-PCR結(jié)果

圖2 布病患者隨機(jī)抽樣分離菌株AMOS-PCR結(jié)果

對(duì)于布病，除在發(fā)熱期應(yīng)盡早抽血液或骨髓外，其他標(biāo)本如尿液、腦脊液、乳汁等也應(yīng)盡量做細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定。而病例6，患者不明原因發(fā)熱4個(gè)多月，在當(dāng)?shù)厥屑?jí)醫(yī)院住院時(shí)，有條件做培養(yǎng)而未做血液與骨髓培養(yǎng)，結(jié)果導(dǎo)致診斷和治療不及時(shí)。從該患者在我院的血培養(yǎng)情況看，如果按照常規(guī)設(shè)置即血培養(yǎng)瓶放置血培養(yǎng)儀中5d不報(bào)警為陰性，并且不做盲傳就報(bào)告無菌生長的話，這份血標(biāo)本肯定漏檢。而實(shí)際情況是，患者11月上旬抽血做培養(yǎng)，5d中儀器無陽性報(bào)警，考慮到該患者的特殊性，仍轉(zhuǎn)種血、中國藍(lán)、巧克力平板。但2d內(nèi)血、巧克力平板未生長細(xì)菌(中國藍(lán)平板本來就不生長)。出現(xiàn)這種情況，我們推測患者較長時(shí)間、反復(fù)多次、大量使用抗生素，細(xì)菌的生長已受到了影響。因此，當(dāng)血培養(yǎng)瓶為陰性時(shí)，應(yīng)延長培養(yǎng)時(shí)間。另外，血平板、巧克力平板不長菌時(shí)也應(yīng)延時(shí)，并在1d、2d、3d甚至更長時(shí)間內(nèi)每天觀察菌落生長情況。

從病例1、3、4來看，盡管不存在病原學(xué)檢測的問題，但臨床診治上仍有不足。如病例1，該患者二、三個(gè)月內(nèi)反復(fù)出現(xiàn)高熱，并有養(yǎng)羊史，應(yīng)考慮布病，尤其是已經(jīng)懷疑患者有布病時(shí)，住院期間應(yīng)積極詢問并關(guān)注骨髓培養(yǎng)的結(jié)果和相關(guān)方面的信息，而不是體溫一下降就囑其出院，結(jié)果導(dǎo)致患者再次發(fā)熱重返醫(yī)院，增加了病人的痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，更重要的是失去最佳的治療時(shí)機(jī)。而病例3臨床主要被患者全身腫大的淋巴結(jié)所迷惑，而考慮淋巴瘤。但是，病史詢問不全面，等到淋巴結(jié)報(bào)告為炎性、血液和骨髓液培養(yǎng)都報(bào)告為馬爾他布魯菌之后才去追問患兒有無羊接觸史，似乎太晚。此外，發(fā)熱性的病種考慮得太局限也是影響診斷的一個(gè)因素。病例4主要是患者本身的問題導(dǎo)致診斷與治療受到了影響。布病最具特征性的表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)熱、尤其是高熱的特點(diǎn)，本文的6個(gè)病例其臨床表現(xiàn)也是如此，少則2次、多則5次，一般都有2～3次高熱過程。未確診前醫(yī)生都不會(huì)輕意使用對(duì)細(xì)胞壁有穿透力的藥物，一旦確診又必須使用這類藥物，因?yàn)椴剪斁导?xì)胞內(nèi)寄生性致病菌，臨床一般首選多西環(huán)素(強(qiáng)力霉素)與利福平的聯(lián)合，或利福平聯(lián)合四環(huán)素、利福平聯(lián)合鏈霉素或鏈霉素聯(lián)合多西環(huán)素。次選磺胺增效劑(TMP/SMZ)。復(fù)方磺胺甲噁唑片也有效，但復(fù)發(fā)率30%，而利福平聯(lián)合多西環(huán)素復(fù)發(fā)率僅5%，復(fù)發(fā)病例采用利福平聯(lián)合多西環(huán)素治療仍然有效。對(duì)于孕婦布病首選利福平，若無效可單獨(dú)給予四環(huán)素或甲氧芐胺嘧啶，忌用鏈霉素。由于布病病程長，無論采用上述哪種方案，用藥時(shí)間至少6周。實(shí)踐證明，布病只要正規(guī)用藥一般都能治愈。反之，使用其他抗生素治療毫無效果，本文的6個(gè)患者都先后、分別使用過青霉素類的阿莫西林/克拉維酸鉀，喹諾酮類的環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星，頭孢菌素類的頭孢西丁、頭孢哌酮、頭孢哌酮/他唑巴坦、頭孢曲松，碳青霉烯類的美羅培南，大環(huán)內(nèi)酯類的阿奇霉素，克林霉素類，激素類的地塞米松，抗病毒類的恩替卡韋，抗感冒藥和退熱藥等，無論臨床使用多長時(shí)間(如病例4莫西沙星就連續(xù)靜滴12天)、多大劑量、一次還是多次、一種單用還是多種聯(lián)用都無法殺滅布魯菌，只能暫時(shí)降低患者的體溫。一旦停用，又會(huì)反彈。布病治療的失敗往往不是布魯菌對(duì)藥物有抗性，而是選藥不當(dāng)或療程不足，尤其是因癥狀減輕而擅自終止用藥所致。本研究還證明，布病的關(guān)鍵在于診斷，診斷的關(guān)鍵在于病原學(xué)，而病原學(xué)的關(guān)鍵在于血液(或骨髓液)的培養(yǎng)與分離，然后是準(zhǔn)確的鑒定。血液是最常用的標(biāo)本，而且急性期培養(yǎng)陽性率很高。目前醫(yī)院主要依靠VITEK-2-Compact和API 20 E，而VITEK-2-Compact以外的型號(hào)，如：VITEK 32等、ATB以及BD Phoenix-100與DADE BEHRING Microscan walk-Away 40 SI系列儀器等無法檢出布魯菌。因?yàn)檫@些儀器的細(xì)菌鑒定名錄數(shù)據(jù)庫中沒有布魯菌屬，所以無法鑒定出布魯菌，而VITEK-2-Compact是新一代的全自動(dòng)快速微生物鑒定智能分析系統(tǒng)，優(yōu)化和擴(kuò)大了微生物數(shù)據(jù)庫。我們查閱了近3年國內(nèi)報(bào)道的若干布魯菌病例，均由該儀器鑒定得出。至于API系統(tǒng)，作為細(xì)菌鑒定的金標(biāo)準(zhǔn)，Dhar等[8]早就采用API 20E板條鑒定出布魯菌屬。因此，沒有VITEK-2-Compact儀或不使用API 20 E系統(tǒng)進(jìn)行檢測就有可能漏檢。一旦漏檢，臨床就無法診斷和治療，這對(duì)患者和疫情的控制都將帶來嚴(yán)重的后果。但血培養(yǎng)系統(tǒng)無論采用BACTEC 9120還是BACT/ALERT 3D等都能在3～4d培養(yǎng)出布魯菌。布魯菌屬于第2類病原體，應(yīng)在三級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行檢驗(yàn)。但上述病例的出現(xiàn)表明，在二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室的日常臨床檢驗(yàn)過程中肯定會(huì)遇到攜帶布魯菌的標(biāo)本。而在實(shí)際工作中，微生物室檢驗(yàn)人員未必能及時(shí)了解患者的病史及疫情接觸史。因此如何盡早發(fā)現(xiàn)攜帶布魯菌的標(biāo)本，這是做好檢測與防護(hù)、特別是防止實(shí)驗(yàn)室工作人員布魯菌感染發(fā)生的關(guān)鍵。結(jié)合上述病例的檢測結(jié)果，我們認(rèn)為：當(dāng)血液(或骨髓液)等標(biāo)本中的培養(yǎng)物直接涂片見到云霧狀革蘭陰性短小桿菌，轉(zhuǎn)種血平板、巧克力平板48h以上才有明顯細(xì)菌生長、且菌落無色、透明、濕潤、細(xì)小、氧化酶陽性，菌落涂片仍然為陰性短小桿菌，患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)正常或偏低、但淋巴細(xì)胞升高時(shí)，應(yīng)考慮標(biāo)本中布魯菌存在的可能性。此時(shí)應(yīng)加強(qiáng)與臨床的聯(lián)系，包括流行病學(xué)資料的收集。

對(duì)于布魯菌藥敏，目前還沒有推薦的方法，所以藥敏試驗(yàn)可不作為常規(guī)檢測，只是在十分需要時(shí)才做，并建議使用稀釋法。

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Routine detection and analysis of Brucella

LIAO Wanzhen，ZENG Lingbing，HU Niya，et al.The First Affiliated Hospital of Nan Chang Uniuersity，Nanchang 330006，China

Objective To explore a reliable early detection method of Brucella for the early diagnosis and treatment of Brucellosis.Methods Specimens were cultured in Bactec 9120 or BACT/ALERT3D system,and then turned to the blood or chocolate plate to grow.Finally,picked single colony and inoculated into GN-21341 card,then identified strain with VITEK-2-Compact system(or cultured in API20E).Results Brucella has a significant growth in 2-4 days,by culturing in the two supporting systems shown above.Conclusions VITEK-2-Compact system(or API20E)is more simple,reliable,economical and practical than molecular biological or classical identification methods.In addition,this system would not miss any positive results,and is the only one automately routine testing of equipment models at present.

Brucella;Blood cultre;VITEK-2-Compact;Early detection

R446.5

A

1674-1129(2014)06-0670-04DOI∶10.3969/j.issn.1674-1129.2014.06.007

2014-10-18；

2014-11-05)

廖晚珍，男，出生于1952年，主要從事臨床細(xì)菌、真菌與分子生物學(xué)研究。