王 健，郭漢畫（.廣州市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科 5030；.廣東省中醫(yī)院ICU，廣州 500）

凝血酶原時(shí)間（PT）與活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）是臨床上常用的出、凝血功能檢驗(yàn)項(xiàng)目，對(duì)因凝血因子而引起的出血性、血栓性疾病進(jìn)行鑒別診斷，了解手術(shù)前患者的凝血狀態(tài)以及抗凝藥物的治療監(jiān)控等方面具有重要意義。在日常檢驗(yàn)中，膽紅素是干擾凝血檢測(cè)結(jié)果的常見因素之一。本文就不同膽紅素濃度對(duì)血漿PT和APTT檢測(cè)結(jié)果的影響作一探討。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 德國(guó)西門子德靈（Siemens Dade）公司生產(chǎn)的質(zhì)控水平1（Ci－Trol 1）凝血質(zhì)控品，批號(hào)52811722；中生北控生物科技股份有限公司膽紅素校準(zhǔn)品，批號(hào)110161。

1.2 儀器與試劑 日本希森美康醫(yī)用電子公司生產(chǎn)的SYSMEX CA7000全自動(dòng)凝血分析儀，日本日立公司生產(chǎn)的HITACHI 7600全自動(dòng)生化分析儀。德國(guó)西門子（Siemens）的PT檢測(cè)試劑、APTT檢測(cè)試劑，北京中生北控公司膽紅素檢測(cè)試劑。

1.3 方法 按照國(guó)家臨床化學(xué)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（CLSI）體外診斷試劑干擾評(píng)估指南EP7－A的要求，將蒸餾水1.0mL溶解凝血質(zhì)控品作為對(duì)照血漿；另在5瓶凝血質(zhì)控血漿加入不同濃度的膽紅素校準(zhǔn)品，混勻后作為實(shí)驗(yàn)血漿，在生化分析儀上測(cè)定對(duì)照血漿與實(shí)驗(yàn)血漿的膽紅素2次，取平均值；并在凝血分析儀上以凝固法測(cè)定每個(gè)濃度血漿PT和APTT各5次，取平均值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS Statistics 17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，不同膽紅素濃度下血漿的PT和APTT結(jié)果的均數(shù)與對(duì)照血漿的結(jié)果比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，膽紅素與血漿PT和APTT檢測(cè)的關(guān)系采用回歸方程二次項(xiàng)分析，檢驗(yàn)水平α＝0.05，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同膽紅素濃度血漿的PT和APTT檢測(cè)結(jié)果 對(duì)照血漿的膽紅素濃度為8.02μmol／L，編號(hào)為QC，實(shí)驗(yàn)組編號(hào)為A、B、C、D、E，其血漿膽紅素濃度分別為（20.10、41.38、65.12、83.56、102.24）μmol／L，比較不同濃度下血漿PT和APTT的檢測(cè)結(jié)果，見表1。

表1 不同膽紅素濃度的血漿PT和APTT檢測(cè)結(jié)果

續(xù)表1 不同膽紅素濃度的血漿PT和APTT檢測(cè)結(jié)果

2.2 不同濃度膽紅素與血漿PT、APTT的回歸分析結(jié)果 以不同膽紅素濃度為自變量，用X表示；以血漿PT和APTT對(duì)應(yīng)的檢測(cè)均值作為因變量，PT用Y1表示，APTT用Y2表示，作相關(guān)回歸分析，見表2。

表2 不同濃度膽紅素與血漿PT和APTT的回歸分析結(jié)果

3 討 論

血漿PT和APTT的檢測(cè)一般運(yùn)用凝固法，其原理為試劑或者反應(yīng)杯預(yù)溫到37℃，試劑與血漿充分混勻，在混勻的瞬間，散射光強(qiáng)度很弱，此時(shí)設(shè)定散射光強(qiáng)度為0%，隨著標(biāo)本中纖維蛋白逐漸凝固，反應(yīng)杯中樣品的散射光強(qiáng)度逐漸增加，當(dāng)樣品凝固完全時(shí)，散射光穩(wěn)定在最高的強(qiáng)度上，將此時(shí)的散射光設(shè)置為100%，在0%～100%的散射光強(qiáng)度變化為一條曲線，可設(shè)定其中的一點(diǎn)對(duì)應(yīng)的時(shí)間作為凝固時(shí)間。通過檢測(cè)樣品到達(dá)此散射光強(qiáng)度時(shí)，與對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線比較后轉(zhuǎn)化為血漿PT和APTT檢測(cè)的結(jié)果[1]。當(dāng)標(biāo)本中含有膽紅素或其他干擾物時(shí)[2]，通過影響樣品混合時(shí)的散射光強(qiáng)度，可能會(huì)對(duì)血漿PT和APTT檢測(cè)的結(jié)果造成一定的影響。黏度（磁場(chǎng)）法凝血分析有抵抗黃疸干擾的優(yōu)勢(shì)，但凝血因子活化仍不可控[3]。

健康人的血漿里含有1.71～17.1μmol／L的膽紅素，但如果紅細(xì)胞破壞過多、肝臟有病或者膽道有梗阻等病因時(shí)，會(huì)導(dǎo)致膽紅素水平超過正常值時(shí)，表明有黃疸存在，血中膽紅素水平越高，黃疸越重[4]。本研究通過加入不同濃度的膽紅素形成黃疸程度不同的血漿。檢測(cè)結(jié)果顯示，血漿PT和APTT檢測(cè)的結(jié)果隨著黃疸的嚴(yán)重程度而升高。含20μmol／L膽紅素血漿PT和APTT檢測(cè)的結(jié)果與對(duì)照血漿比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說明血漿PT和APTT檢測(cè)的結(jié)果不受輕度黃疸的影響，含41μmol／L膽紅素的血漿PT結(jié)果與對(duì)照血漿比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.06），此濃度的PT結(jié)果仍不受影響，而APTT結(jié)果與對(duì)照血漿比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.00），此時(shí)APTT受到膽紅素的影響；膽紅素濃度超過65μmol／L的血漿，PT、APTT與對(duì)照血漿的均值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），血漿PT和APTT檢測(cè)的結(jié)果受到高濃度膽紅素的影響。因此，當(dāng)標(biāo)本含高濃度膽紅素重度黃疸時(shí)，顏色變深的血漿散射光使基線上移，致使血漿PT和APTT檢測(cè)的時(shí)間延長(zhǎng)[5]。

本研究以不同濃度膽紅素為自變量，與其對(duì)應(yīng)血漿PT和APTT檢測(cè)的結(jié)果為因變量，作回歸曲線擬合估計(jì)，膽紅素濃度的增高與PT、APTT結(jié)果之間的二次項(xiàng)方程的相關(guān)系數(shù)比線性方程高，分別達(dá)到0.993與0.996，說明TBIL濃度與血漿PT、APTT檢測(cè)的相關(guān)性良好。選擇相關(guān)系數(shù)最高的曲線，得出血漿PT和APTT的檢測(cè)結(jié)果隨TBIL濃度變化的回歸方程。因此，在日常工作中，發(fā)現(xiàn)標(biāo)本血漿PT和APTT的檢測(cè)結(jié)果非正常升高時(shí)，應(yīng)當(dāng)觀察標(biāo)本有無黃疸，以排除黃疸給血漿PT和APTT檢測(cè)結(jié)果帶來的影響。此外，血漿PT和APTT檢測(cè)的結(jié)果除了受到黃疸標(biāo)本的影響外，還會(huì)受到脂血、溶血、標(biāo)本量、放置時(shí)間等因素的影響[6－7]。大劑量使用青霉素等藥物會(huì)導(dǎo)致血漿PT和APTT的檢測(cè)結(jié)果延長(zhǎng)[8]。此外，肝功能不全、重度肝炎、肝硬化等肝臟疾病患者的凝血因子和抗凝血蛋白合成減少，也會(huì)導(dǎo)致血漿PT和APTT的檢測(cè)結(jié)果延長(zhǎng)[9－14]。當(dāng)標(biāo)本排除這些因素，并且膽紅素濃度較高時(shí)，可以根據(jù)相關(guān)回歸方程得到的校正公式對(duì)黃疸標(biāo)本血漿PT和APTT檢測(cè)的結(jié)果進(jìn)行校正，以獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。

綜上所述，對(duì)重度黃疸的標(biāo)本應(yīng)加強(qiáng)與臨床溝通，如果標(biāo)本顏色深黃是由于攝入含色素的藥物引起的，應(yīng)建議停藥后適當(dāng)時(shí)間重抽；如果是患者本身原因引起，可用回歸方程校正，為臨床提供更準(zhǔn)確的凝血檢測(cè)結(jié)果。

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