沈 寧

（河海大學(xué)體育系，江蘇 南京 210098）

補(bǔ)充天然蝦青素對(duì)遞增負(fù)荷訓(xùn)練大鼠骨骼肌自由基代謝的影響

沈 寧

（河海大學(xué)體育系，江蘇 南京 210098）

目的：探討補(bǔ)充天然蝦青素和游泳訓(xùn)練對(duì)大鼠骨骼肌抗氧化能力的影響。方法：32只7周齡健康雄性SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后按體重隨機(jī)分為4組。即對(duì)照組（C）、運(yùn)動(dòng)組（T）、服藥組（M）和運(yùn)動(dòng)服藥組（TM）。T組和TM組進(jìn)行6周的遞增負(fù)荷游泳運(yùn)動(dòng)，M組和TM組每天灌服天然蝦青素，劑量為400mg/Kg BW。6周后，分別測(cè)定各組大鼠血液中肌酸激酶和乳酸脫氫酶含量，測(cè)定骨骼肌細(xì)胞中超氧化物歧化酶、丙二醛、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和過(guò)氧化氫酶含量。結(jié)果：長(zhǎng)期遞增負(fù)荷訓(xùn)練使大鼠血清LDH（P＜0.01）和CK（P＜0.01）水平顯著上升，骨骼肌SOD活性、SOD/MDA比值、GSH-PX、T-AOC和CAT顯著降低。補(bǔ)充天然蝦青素顯著降低了長(zhǎng)期遞增負(fù)荷訓(xùn)練大鼠血清的LDH、CK濃度和骨骼肌MDA的含量，同時(shí)顯著提高骨骼肌SOD活性、SOD/MDA比值，GSH-PX、T-AOC和CAT活性。結(jié)論：①長(zhǎng)期遞增負(fù)荷訓(xùn)練使骨骼肌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性遭到了破壞，主要表現(xiàn)為血清LDH和CK濃度的增加。②補(bǔ)充天然蝦青素顯著降低了長(zhǎng)期遞增負(fù)荷訓(xùn)練大鼠血清的LDH、CK濃度和骨骼肌MDA的含量。骨骼肌SOD活性、SOD/MDA比值，GSH-PX、T-AOC和CAT顯著增高，這可能是天然蝦青素保護(hù)運(yùn)動(dòng)機(jī)體骨骼肌的細(xì)胞膜功能和結(jié)構(gòu)完整性的機(jī)制。

天然蝦青素；骨骼肌；自由基代謝；抗氧化能力

大量的實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)天然蝦青素因其獨(dú)特的化學(xué)分子結(jié)構(gòu)而具有超強(qiáng)的抗氧化性，且是一種非維生素A原的類胡蘿卜素。天然蝦青素對(duì)一些與生活方式有關(guān)的慢性病及神經(jīng)退行性疾病等方面具有良好的治療和預(yù)防作用。據(jù)大量文獻(xiàn)報(bào)道，天然蝦青素具有著色、抗氧化、保護(hù)肝臟、保護(hù)神經(jīng)、控制炎癥、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗腫瘤作用、預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化和心肌梗死、抗缺氧、抗高血壓、抗癌抑癌等多種生理功能，并且天然蝦青素已被廣泛地應(yīng)用在化妝品和保健品上，在日常生活中已被人們肯定。然而，天然蝦青素在運(yùn)動(dòng)領(lǐng)域的應(yīng)用并不廣泛，因此，本研究將初步探討補(bǔ)充天然蝦青素對(duì)大強(qiáng)度所運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)的自由基增多的影響，期望能為天然蝦青素在運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中開(kāi)發(fā)和應(yīng)用提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物7周齡健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠32只，體重為160.05±3.45g，由徐州醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。實(shí)驗(yàn)大鼠分籠飼養(yǎng)，常規(guī)飼料，自由飲食，自由飲水，飼料由徐州醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。動(dòng)物房自然采光，通風(fēng)條件良好。溫度維持在18℃-24℃，相對(duì)濕度為45％-55％。游泳訓(xùn)練水溫為33±2℃，游泳池高110cm，直徑80cm無(wú)毒塑料圓桶，水深大約為80cm。

1.2實(shí)驗(yàn)分組和運(yùn)動(dòng)方案實(shí)驗(yàn)大鼠購(gòu)回適應(yīng)性喂養(yǎng)三天后，按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的要求將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為：對(duì)照組（C組）、運(yùn)動(dòng)組（T組）、服藥組（M組）和運(yùn)動(dòng)服藥組（TM組）。

適應(yīng)性游泳：在正式實(shí)驗(yàn)，T組和TMR組進(jìn)行適應(yīng)性游泳：第一天10min，第二天20min，第三天30 min，以此類推直達(dá)第6天60min。正式訓(xùn)練方案：T組和TM組大鼠，第一周不負(fù)重游泳40 min，以后每周遞增10 min，到第四周游泳時(shí)間為60 min，負(fù)重1％，第五周負(fù)重2％，第六周負(fù)重3％，第四、五、六周時(shí)間均為60 min。每周訓(xùn)練六天，周日休息并稱量大鼠體重。本實(shí)驗(yàn)的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練方式為游泳。參照喬玉成編著的《體育生物科學(xué)研究方法與技術(shù)》［1］中關(guān)于訓(xùn)練大鼠游泳運(yùn)動(dòng)“控制運(yùn)動(dòng)量的方法”和朱金等《大鼠游泳訓(xùn)練在運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用方法》［2］，確定本實(shí)驗(yàn)的運(yùn)動(dòng)

時(shí)間和運(yùn)動(dòng)負(fù)重量。游泳訓(xùn)練時(shí)間安排在每天16：00至17：00。

1.3蝦青素灌服方案本研究灌服蝦青素的劑量為400mg/kg BW（根據(jù)天然蝦青素官方網(wǎng)站專家的建議，此劑量相當(dāng)于人體推薦量的20倍），因?yàn)榇笫髮?duì)天然蝦青素的吸收效果比較差。天然蝦青素配合豆油溶劑，天然蝦青素實(shí)際含量為20 mg/kg。服藥組灌服蝦青素，天然蝦青素購(gòu)于湖北荊州，對(duì)照組灌服豆油。

1.4動(dòng)物取材和指標(biāo)測(cè)試所有大鼠在末次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后禁食12小時(shí)，禁食期間自由飲水。后各組大鼠根據(jù)體重采用腹腔注射20％氨基甲酸乙酯麻醉，劑量為5ml/Kg（約2m l/只），腹主動(dòng)脈取血，并迅速將血液放入-20℃冰箱中保存以進(jìn)行指標(biāo)的測(cè)定。迅速取出骨骼肌放在冰冷的生理鹽水中洗凈血液，并用濾紙將其吸干，用鋁箔紙包裹好裝入密封袋中，迅速放入-80℃的冰箱中保存、待測(cè)。所有指標(biāo)的測(cè)試均按試劑盒的操作說(shuō)明嚴(yán)格執(zhí)行。

1.4.1 組織勻漿的制備 從超低溫冰箱中取出骨骼肌組織塊，自然解凍，用濾紙拭干，稱取0.4g骨骼肌組織放入小燒杯中。量取預(yù)冷的勻漿介質(zhì)（0.86％的生理鹽水），量取重量為骨骼肌重量9倍的生理鹽水，制備濃度為10％骨骼肌勻漿。將制備好的組織勻漿用低溫離心機(jī)3000r/min左右離心10-15min后吸取上清液，放入4℃冰箱中冷藏待測(cè)。

1.4.2 指標(biāo)檢測(cè) 酶標(biāo)法檢測(cè)超氧化物歧化酶（SOD）活性、TBA法檢測(cè)丙二醛（MDA）含量、比色法檢測(cè)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）活性、比色法檢測(cè)總抗氧化能力（T-AOC）、比色法測(cè)定過(guò)氧化氫酶（CAT）活性，利用考馬斯亮蘭法進(jìn)行蛋白定量。所有指標(biāo)的檢測(cè)方法都嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書操作，試劑盒均購(gòu)于南京建成生物工程研究所。

1.5 數(shù)據(jù)處理 本實(shí)驗(yàn)所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，對(duì)所有數(shù)據(jù)求平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±SD），并作單因素方差分析進(jìn)行組間多重比較。以P＜0.05，具有顯著性差異，以P＜0.01，具有極顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1大鼠體重變化從圖1可以看出，各組大鼠的體重隨時(shí)間的變化總體都呈上升的趨勢(shì)。與C組相比，TM組大鼠體重（第五周末）顯著低于C組（P＜0.05）；與C組相比較，M組大鼠體重（第六周末）顯著低于C組（P＜0.05）；與C組相比，TM組大鼠體重顯著低于C組，且具有顯著性差異（P＜0.05）；與T組相比，TM組大鼠體重具有顯著性差異（P＜0.05）。

圖1 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中各組大鼠體重變化趨勢(shì)圖

2.2各組大鼠血液中LDH和CK的變化從表2可以看出：與C組相比較，T組和TM組大鼠血清中LDH活性顯著高于C組，其中T組具有極顯著性差異（P＜0.01），TM組有顯著性差異（P＜0.05）。與TR組相比較，M組和TM組血清中LDH活性顯著低于T組（P＜0.01）。各組大鼠血清中CK指標(biāo)的變化：與C組相比，T組和TM組都顯著升高，T組具有極顯著性差異（P＜0.01），TM組有顯著性差異（P＜0.05）。與T組相比，M組和TM組血中LDH活性顯著低于T組，均有非常顯著性差異（P＜0.01）。見(jiàn)表1。

表1 大鼠血液中LDH和CK指標(biāo)的比較

2.3骨骼肌細(xì)胞中SOD、MDA及SOD/MDA比值的變化SOD活性：與C組相比較，T組大鼠骨骼肌細(xì)胞中SOD活性顯著下降（P＜0.05），M組SOD活性顯著上升，TM組SOD活性有下降趨勢(shì)，但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.053）。與T組相比，M組SOD活性顯著高于T組（P＜0.01），TM組SOD活性顯著高于T組（P＜0.05）。

表2 大鼠骨骼肌SOD、MDA及SOD/MDA比值指標(biāo)的變化

MDA含量：與C組相比較，T組大鼠骨骼肌細(xì)胞中MDA的含量顯著高于C組（P＜0.05），M組MDA含量顯著低于C組（P＜0.01）。TM組MDA含量雖高于C組，但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。TM組骨骼肌細(xì)胞中MDA的含量顯著低于T組，（P＜0.05）。

SOD/MDA比值：與C組相比較，T組顯著低于C組（P＜0.01），M組顯著高于C組（P＜0.01），TM組顯著低于C組（P＜0.01）；與T組比較，M組常顯著高于T組（P＜0.01），TM組高于T組（P＜0.01）。

2.4骨骼肌細(xì)胞中CAT、GSH-PX及T-AOC的變化由表3可知，CAT的比較：與C組相比較，T組CAT活性和C組具有顯著性差異（P＜0.01），M組、TM組CAT活性與C組具有顯著性差異（P＜0.05）；與T組相比較，M組和TM組CAT活性均顯著高于T組（P＜0.01）。

表3 大鼠骨骼肌CAT、GSH-PX及T-AOC指標(biāo)的比較

GSH-PX的比較：與C組相比，T組GSH-PX活性顯著低于C組（P＜0.01），M組GSH-PX活性顯著高于C組，TM組GSH-PX活性顯著低于C組（P＜0.01）；與T組相比，M組活性顯著高于T組（P＜0.01），TM組GSH-PX活性顯著高于T組（P＜0.05）。

T-AOC的比較：與C組相比較，T組T-AOC活性顯著性低于C組（P＜0.01），M組T-AOC活性顯著高于C組（P＜0.01），TM組T-AOC活性顯著低于C組；與T組相比較，M組活性顯著高于T組（P＜0.01），TM組T-AOC活性顯著高于T組。（P＜0.01）。此外TM組T-AOC活性雖顯著低于C組，卻顯著高于TM組（P＜0.01）。

3 分析與討論

3.1補(bǔ)充天然蝦青素對(duì)長(zhǎng)期遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)大鼠天然蝦青素及游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠體重的影響大量實(shí)驗(yàn)研究已證實(shí)，運(yùn)動(dòng)可以促進(jìn)體內(nèi)脂肪的消耗，使機(jī)體內(nèi)儲(chǔ)備的脂肪的含量減少，體重相對(duì)有下降的趨勢(shì)。也有相關(guān)報(bào)導(dǎo)天然蝦青素能減輕機(jī)體體重，引起機(jī)體的組成成分發(fā)生改變。Saravanan Bhuvaneswari等研究稱，天然蝦青素能限制大鼠體重的增加［3］。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)；M組大鼠體重下降，這可能與蝦青素能減輕機(jī)體體重，引起機(jī)體的組成成分發(fā)生改變有關(guān)。TM組大鼠體重下降的原因一方面與大鼠長(zhǎng)期遞增負(fù)荷訓(xùn)練使機(jī)體出現(xiàn)了負(fù)氮平衡有關(guān)，另一方面是與天然蝦青素的補(bǔ)充產(chǎn)生了協(xié)同作用。

3.2補(bǔ)充天然蝦青素對(duì)長(zhǎng)期遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)大鼠血清LDH和CK水平的影響乳酸脫氫酶（LDH）是催化丙酮酸和乳酸之間相互轉(zhuǎn)化的酶，廣泛存在于各組織中，其中以骨骼肌、心肌、肝臟和腎臟中含量最豐富，血液中的LDH主要來(lái)源于骨骼肌，為肌型LDH（MLDH）。當(dāng)組織細(xì)胞更新或被破壞時(shí)，LDH從細(xì)胞內(nèi)溢出進(jìn)入組織間液再進(jìn)入血液，引起血液中LDH活性升高［4］，因此通過(guò)檢測(cè)血液中的LDH活性的高低，可以反映組織細(xì)胞的損傷程度及對(duì)運(yùn)動(dòng)的適應(yīng)能力。血液中LDH活性提高，提示組織細(xì)胞損傷嚴(yán)重或機(jī)體難以適應(yīng)當(dāng)前的運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)：經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后大鼠血清LDH含量顯著升高，證實(shí)6周遞增游泳運(yùn)動(dòng)增加了血液中LDH的含量。對(duì)長(zhǎng)期遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)大鼠補(bǔ)充天然蝦青素發(fā)現(xiàn)大鼠血清LDH濃度降低，提示服天然蝦青素對(duì)細(xì)胞膜完整性產(chǎn)生一定的保護(hù)作用。

肌酸激酶（CK）廣泛分布在人體心臟、骨骼肌、大腦和平滑肌中，其中含量最高的組織是與運(yùn)動(dòng)密切相關(guān)的骨骼肌。在正常情況下，肌細(xì)胞中CK的含量大大多于血液中的，極少透過(guò)肌細(xì)胞膜，然而在運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練過(guò)程中，由于運(yùn)動(dòng)的刺激會(huì)產(chǎn)生自由基，自由基會(huì)攻擊肌細(xì)胞膜上的不飽和脂肪酸，使細(xì)胞膜發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，肌細(xì)胞膜發(fā)生損害，通透性增加，肌細(xì)胞膜中的CK就會(huì)透過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入血液中，使血液中CK活性升高，因此，血液中的CK活性的高低反映了骨骼肌細(xì)胞損傷程度及對(duì)運(yùn)動(dòng)的適應(yīng)程度，血液中CK活性可作為評(píng)定肌肉承受刺激和了解骨骼肌微細(xì)損傷及適應(yīng)與修復(fù)的重要敏感的生化指標(biāo)［5］。本實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)：6周遞增負(fù)荷游泳訓(xùn)練使了大鼠血清CK的含量增加。補(bǔ)充天然蝦青素可以顯著降低遞增負(fù)荷游泳訓(xùn)練大鼠血清CK的含量，提示天然蝦青素能清除運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的自由基產(chǎn)生，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)自由基的清除能力，保護(hù)細(xì)胞膜免受損傷，降低脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，保護(hù)細(xì)胞膜的完整性。

3.3天然蝦青素協(xié)同遞增負(fù)荷游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌細(xì)胞中SOD和MDA及比值的影響超氧化物歧化酶（SOD）被譽(yù)為機(jī)體內(nèi)抗自由基第一道防線，是機(jī)體內(nèi)抗氧化酶系統(tǒng)中的重要組成部分，它的作用是歧化超氧陰離子（O2-·）生成H2O2和O2，從而阻斷了毒性更強(qiáng)的羥自由基（OH·）的生成。研究證實(shí)，8周有氧跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)大鼠其腦中SOD的活性明顯高于4周有氧跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)組和安靜組，這說(shuō)明了長(zhǎng)期的有氧運(yùn)動(dòng)能增加大鼠腦中抗氧化系統(tǒng)酶的抗氧化能力，降低脂質(zhì)過(guò)氧化水平［6］本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，T組大鼠在長(zhǎng)期遞增負(fù)荷訓(xùn)練后SOD活性顯著下降。本研究也發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充天然蝦青素能顯著抑制長(zhǎng)期遞增運(yùn)動(dòng)負(fù)荷所致的大鼠骨骼肌細(xì)胞SOD活性的降低。提示，蝦青素加速了自由基的清除速率，從而大大降低機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)。

丙二醛（MDA）是脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)所生成的各種脂質(zhì)過(guò)氧化物中最重要的一種，MDA在機(jī)體中的含量變化直接反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的速率和強(qiáng)度［7］。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，6周遞增負(fù)荷游泳訓(xùn)練降低了大鼠骨骼肌MDA的含量。補(bǔ)充蝦青素協(xié)同遞增負(fù)荷游泳訓(xùn)練使大鼠骨骼肌細(xì)胞（MDA）含量顯著性下降。提示蝦青素協(xié)同6周遞增游泳運(yùn)動(dòng)能提高大鼠骨骼肌中抗氧化酶系的活性，提高了機(jī)體清除自由基的速率，提高機(jī)體抗氧化能力。

SOD是機(jī)體內(nèi)清除自由基的主要抗氧化酶之一，測(cè)定其活性可以反映機(jī)體清除自由基的能力，而MDA是反映機(jī)體內(nèi)自由基脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的代表產(chǎn)物，其含量的多少可以反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度。SOD/MDA的比值可以更加全面的反映機(jī)體內(nèi)抗氧化能力。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，補(bǔ)充蝦青素協(xié)同遞增負(fù)荷游泳訓(xùn)練大鼠骨骼肌細(xì)胞SOD/MDA比值顯著上升，提示蝦青素協(xié)同遞增負(fù)荷游泳訓(xùn)練加速機(jī)體清除自由基的速率，提高了機(jī)體抗氧化的能力。

3.4補(bǔ)充天然蝦青素協(xié)同遞增負(fù)荷游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌細(xì)胞GSH-PX、CAT及T-AOC的影響谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要的催化過(guò)氧化氫分解的酶，主要存在于細(xì)胞質(zhì)中，在線粒體及胞漿中所產(chǎn)生的H2O2?？縂SH-PX來(lái)清除。它還可以催化脂質(zhì)氫過(guò)氧化（LOOH）或過(guò)氧化氫（H2O2）與還原型谷胱甘肽（GSH）反應(yīng)生成氧化型谷胱甘肽（GSSH），起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整的作用。因此，測(cè)定谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSHPX）的活性可以衡量組織抗脂質(zhì)過(guò)氧化的能力以及防止DNA、RNA的損傷。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：6周遞增負(fù)荷游泳運(yùn)動(dòng)顯著提高大鼠骨骼肌細(xì)胞GSH-PX含量，證明6周遞增游泳運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練能提高大鼠骨骼肌中GSH-PX的活性，提高機(jī)體抗氧化能力。補(bǔ)充天然蝦青素協(xié)同遞增負(fù)荷游泳運(yùn)動(dòng)能顯著提高大鼠骨骼肌中GSH-PX的活性，提高機(jī)體的抗氧化能力，增加機(jī)體對(duì)運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的過(guò)氧化氫的清除，減少了過(guò)氧化氫對(duì)機(jī)體的損傷。

CAT廣泛存在各種生物體內(nèi)，清除H2O2是CAT的主要功能，它通過(guò)催化過(guò)氧化氫（H2O2）轉(zhuǎn)變成為H2O和O2。上文已提及GSH-PX也能清除H2O2，但這兩種酶清除的H2O2不是來(lái)自同一個(gè)部位。CAT主要集中在過(guò)氧化氫體（微體）中，組織內(nèi)酶反應(yīng)所產(chǎn)生的H2O2可被CAT清除，而線粒體中產(chǎn)生的H2O2則由GSH-PX來(lái)清除，未清除的H2O2可透過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入胞漿中，在過(guò)氧化氫體中被CAT清除。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示：T組大鼠骨骼肌細(xì)胞中CAT活性明顯低于C組，提示6周遞增負(fù)荷游泳運(yùn)動(dòng)可以顯著降低大鼠骨骼肌細(xì)胞中CAT的活性，降低機(jī)體消除H2O2能力。補(bǔ)充天然蝦青素可以有效提高遞增負(fù)荷游泳運(yùn)動(dòng)大鼠骨骼肌細(xì)胞CAT的活性。提示補(bǔ)充蝦青素可以顯著提高運(yùn)動(dòng)大鼠骨骼肌細(xì)胞CAT的活性。

機(jī)體防御體系的總抗氧化能力（Total Anti oxide Capacity，T-AOC）的強(qiáng)弱與健康程度之間存在著密切的聯(lián)系。機(jī)體內(nèi)T-AOC水平越高，提示機(jī)體內(nèi)利用非酶類抗氧化物質(zhì)能力增強(qiáng)或抗氧化酶合成越多。反之，機(jī)體內(nèi)抗氧化酶的合成越少或利用非酶類抗氧化物質(zhì)能力減弱和（或）活性氧（ROS）生成過(guò)多，破壞了氧化-抗氧化的這一平衡狀態(tài)。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，補(bǔ)充蝦青素和6周遞增負(fù)荷游泳運(yùn)動(dòng)均能提高大鼠骨骼肌細(xì)胞T-AOC活性。補(bǔ)充蝦青素能顯著提高6周遞增負(fù)荷游泳運(yùn)動(dòng)大鼠骨骼肌細(xì)胞中總的抗氧化水平，提高酶促系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)的防御能力，增強(qiáng)機(jī)體清除自由基的能力。

4 結(jié)論

（1）長(zhǎng)期遞增負(fù)荷訓(xùn)練使骨骼肌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性遭到了破壞，主要表現(xiàn)為血清LDH和CK濃度的增加。

（2）補(bǔ)充天然蝦青素顯著降低了長(zhǎng)期遞增負(fù)荷訓(xùn)練大鼠血清的LDH、CK濃度和骨骼肌MDA的含量，骨骼肌SOD活性、SOD/MDA比值，GSH-PX、T-AOC和CAT顯著增高，這可能是天然蝦青素保護(hù)運(yùn)動(dòng)機(jī)體骨骼肌的細(xì)胞膜功能和結(jié)構(gòu)完整性的機(jī)制。

［1］喬玉成.體育生物科學(xué)研究方法與技術(shù)［M］.北京：中國(guó)科學(xué)文化出版社，2002.11：144.

［2］朱金，浦鈞宗.大鼠游泳訓(xùn)練在運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用方法［J］.中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志，1996，15（2）：125-129.

［3］Saravanan Bhuvaneswari，Elumalai Arunkumar，etal.Astaxanthin restricts weight gain，promotes insulin sensitivity and curtails fatty liver disease in mice fed a obesity-promoting diet［J］. Process Biochemistry，2010，（45）：1406-1414.

［4］彭莉，王啟榮，畢秋蕓.補(bǔ)充大豆多肽對(duì)遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)大鼠血清LDH、ALT、AST活性的影響［J］.北京體育大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，2，31（2），199-201.

［5］蘇全生，唐戎.遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)對(duì)人體血清一氧化氮、肌酸激酶等指標(biāo)的影響［J］.中國(guó)臨床康復(fù)，2003，6，12（7）：1848-1849.

［6］顧麗艷，趙娜娜，梁丹丹.運(yùn)動(dòng)對(duì)SD大鼠MDA、SOD、NGF含量的影響［J］.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2010，10，（7）：1277-1279.

［7］郭海英，許豪文.耐力訓(xùn)練對(duì)大鼠肝臟、股四頭肌氧化系統(tǒng)降活性的影響［J］.中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志，1999，15（1）：55-58.

Iinfluence of Natural Astaxanthin Supplementation on the Increasing Load Training Filtration Skeletal M uscle M etabolism of Free Radicals

SHEN Ning
（Hohai Universit，Nanjing Jiangsu 210098）

Purpose：The purpose of the research is to discuss the effect of gavaging astaxanthin combined with quantitative load swimming training on antioxidant capacity in rats′skeletalmuscle.Methods；32 healthymale SD rats of 7 weeks old are selected and fed adaptively for three days and divided into 4 groups randomly：control group（C），exercise group（T），medication group（M）and exercise medicine-taking group（TM）.The exercise group and exercise medicine-taking group undergo progressive load swimming exercise for 6 weeks，The treated group and the control group were gavaged natural astaxanthin daily，a dose of400mg/kg.Detection of ratblood Creatine kinase，lactate dehydrogenase content，skeletal muscle tissue superoxide dismutase，malondialdehyde，glutathione peroxidase，catalase content is conducted after 6 weeks swimming exercise.Results：long-term increasing load training significantly increases rats′serum LDH（P＜0.01）and CK（P＜0.01）levels，while skeletalmuscle SOD activity，SOD/MDA ratio，GSH-PX，T-AOC and CAT decrease significantly.Gavaging natural astaxanthin reduces serum LDH，CK concentration and skeletalmuscle MDA content induced by long-term increasing load training，but at the same time significantly increases the skeletalmuscle SOD activity，SOD/MDA ratio，GSH-PX，T-AOC and CAT.Conclusions：（1）long-term increasing load training damages the structure，function and integrity of the skeletalmuscle cellmembrane，which ismainly reflected in the increase of concentration of serum LDH and CK.（2）Gavaging natural astaxanthin reduces serum LDH，CK concentration and skeletalmuscle MDA content induced by long-term increasing load training. The SOD activity in skeletalmuscles，SOD/MDA ratio，GSH-PX，T-AOC and CAT increase significantly，which might be themechanism of natural astaxanthin to protect the function and structural integrity of the cellmembrane inmovement skeletalmuscles

natural astaxanthin；skeletalmuscle；free radicalmetabolism；antioxidant

G804.23

：A

：1001-9154（2014）02-0075-05

G804.23

A

1001-9154（2014）02-0075-05

江蘇省教育廳自然科學(xué)基金項(xiàng)目（IK040192）。

沈?qū)帲?977-）男，江蘇徐州人，講師，碩士，主要從事體育教育訓(xùn)練學(xué)研究。

2013-10-20