任鳳蘭

（河南省周口市中醫(yī)院不孕不育癥科，周口466000）

金匱腎氣丸聯(lián)合主動免疫法治療封閉抗體不足患者38例

任鳳蘭

（河南省周口市中醫(yī)院不孕不育癥科，周口466000）

目的觀察金匱腎氣丸聯(lián)合主動免疫法治療封閉抗體不足患者的臨床療效。方法將封閉抗體不足患者76例分為治療組、對照組，各38例。對照組采用淋巴細(xì)胞主動免疫法治療，每2周重復(fù)一次，4次為1個療程；治療組在對照組治療基礎(chǔ)上口服金匱腎氣丸，8丸，一日三次。兩組均治療3個療程，觀察兩組封閉抗體在不同療程變化情況。結(jié)果第1個療程結(jié)束后，治療組與對照組封閉抗體陽性率分別為42.1%、18.4%；第2個療程結(jié)束后，治療組與對照組封閉抗體陽性率分別為55.3%、28.9%；第3個療程結(jié)束后，治療組與對照組封閉抗體陽性率分別為81.6%、57.9%；治療組封閉抗體陽性率均顯著高于對照組（P＜0.05）。結(jié)論金匱腎氣丸聯(lián)合主動免疫法治療封閉抗體不足，有縮短療程，提高療效的功能。

金匱腎氣丸；主動免疫；封閉抗體；中西醫(yī)結(jié)合治療

封閉抗體（Blocking antibodies，BA）是一種人類白細(xì)胞抗原（HLA），系滋養(yǎng)層及淋巴細(xì)胞交叉反應(yīng)抗原（TLX）等刺激母體免疫系統(tǒng)，所產(chǎn)生的一類IgG抗體[1]，能夠通過與胎兒胎盤滋養(yǎng)葉抗原結(jié)合或母體淋巴細(xì)胞結(jié)合而防止胚胎父系抗原被母體免疫系統(tǒng)識別和殺傷[2]。研究表明，流產(chǎn)是因為母胎之間免疫狀態(tài)失衡，發(fā)生免疫排斥所致，約占總?cè)焉飻?shù)的0.5%～3%，原因不明者約占41.18%～60%，其中80%與免疫因素有關(guān)[3]。部分不明原因的不孕、生化妊娠、先兆流產(chǎn)、習(xí)慣性流產(chǎn)等均與封閉抗體不足有關(guān)，臨床上用金匱腎氣丸聯(lián)合主動免疫法治療封閉抗體不足，效果顯著，現(xiàn)報告如下：

1 資料及方法

1.1 一般資料我院2013年7月至2014年2月所治療不孕癥患者76例，在女方非月經(jīng)期同時抽取夫婦雙方空腹血，經(jīng)流式細(xì)胞法檢查提示CD3、CD4、CD8封閉抗體至少有一項缺乏，確診為封閉抗體不足。將其隨機(jī)分為兩組，各38例。治療組年齡（28.55±2.12）歲，其中發(fā)生1次早期流產(chǎn)史4例，2次早期流產(chǎn)史2例，3次或3次以上早期流產(chǎn)史3例。對照組年齡（27.78±2.39）歲，其中發(fā)生1次早期流產(chǎn)史3例，2次早期流產(chǎn)史2例，3次或3次以上早期流產(chǎn)史2例。對兩組研究對象的基本臨床資料進(jìn)行統(tǒng)計，無顯著差異性(P＞0.05)，具有可比性。

患者排除染色體異常、生殖器官解剖異常、內(nèi)分泌等異常，其丈夫排除染色體異常、精液常規(guī)檢查異常。治療前常規(guī)檢查，排除患者丈夫或無關(guān)第三者血常規(guī)、尿常規(guī)、肝功能、腎功能異常及甲肝、乙肝、丙肝、HIV、梅毒等傳染病。

1.2 治療方法對照組予淋巴細(xì)胞主動免疫法治療，具體方法如下：選擇在患者非經(jīng)期，抽取患者丈夫或無關(guān)健康第三者空腹靜脈血30ml，與Hank液1∶1混合，分別沿管壁緩慢鋪在2管30ml Ficoll淋巴分離液面上，以2000轉(zhuǎn)/分鐘轉(zhuǎn)速水平離心30分鐘，吸取單核淋巴細(xì)胞層，再以生理鹽水洗滌2次，棄上清，最后用生理鹽水稀釋淋巴細(xì)胞，調(diào)節(jié)細(xì)胞數(shù)為（20～30)×106/ml，在患者左前臂分8～10點接種，每2周重復(fù)一次，4次為1個療程。治療組在對照組治療基礎(chǔ)上予金匱腎氣丸，8丸，一日三次口服。兩組均治療3個療程，每一療程結(jié)束后7天檢測封閉抗體。

1.3 療效評估標(biāo)準(zhǔn)分為有效和無效兩個等級：有效：對患者進(jìn)行血清檢測，治療后封閉抗體為陽性；無效：治療后患者封閉抗體仍然為陰性。陽性率=有效病例/病例總數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理將兩組患者的臨床數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計，并用SPSS17.0統(tǒng)計軟件分析，采用χ2檢驗。

2 結(jié)果

第1個療程結(jié)束后，治療組與對照組封閉抗體陽性率分別為42.1%、18.4%；第2個療程結(jié)束后，治療組與對照組封閉抗體陽性率分別為55.3%、28.9%；第3個療程結(jié)束后，治療組與對照組封閉抗體陽性率分別為81.6%、57.9%；治療組封閉抗體陽性率均顯著高于對照組（P＜0.05）。可見金匱腎氣丸聯(lián)合主動免疫法治療封閉抗體，有縮短療程，提高療效的功能。

3 討論

妊娠時滋養(yǎng)層是胎兒與母體直接接觸的部分，現(xiàn)代研究認(rèn)為，成功妊娠依賴于封閉抗體與滋養(yǎng)層上表達(dá)的父系抗原結(jié)合，阻止將滋養(yǎng)層當(dāng)作異體組織識別和排斥。母胎組織相容性增大，即母胎共享2～3個組織相容性抗原，導(dǎo)致母體對胎兒抗原呈低識別、低反應(yīng)，或如果孕婦對胚胎半同種抗原（父母基因各一半）識別能力和反應(yīng)低下，孕期無法產(chǎn)生適當(dāng)?shù)姆忾]抗體和保護(hù)性抗體，使胚胎遭受排斥而流產(chǎn)（稱同種免疫病性流產(chǎn)），有報道約88%反復(fù)性早期自然流產(chǎn)（ERSA）者封閉抗體陰性[4]。

目前臨床主要采用淋巴細(xì)胞主動免疫治療封閉抗體不足，其原理是：主要是利用丈夫或健康第三人淋巴細(xì)胞注射給妻子，刺激妻子免疫系統(tǒng)，使其產(chǎn)生封閉抗體。這樣當(dāng)妻子妊娠時，這些封閉抗體就能識別胚胎上來自丈夫的抗原，并與之結(jié)合，繼而產(chǎn)生封閉作用，可使胚胎得到保護(hù)并生長發(fā)育[5]，提高患者的妊娠成功率[6]。目前多認(rèn)為配偶淋巴細(xì)胞主動免疫治療，對子代的影響與同齡兒童無差異，同時也應(yīng)注意到主動免疫可能導(dǎo)致過敏、輸入傳染源（如肝炎、梅毒、艾滋等）及可能導(dǎo)致潛在的自身免疫疾病加重等風(fēng)險[7]。且有治療周期長、治療費(fèi)用高的缺點。

因封閉抗體不足患者常表現(xiàn)為不明原因的不孕、生化妊娠、先兆流產(chǎn)、習(xí)慣性流產(chǎn)等，故屬于中醫(yī)“不孕”、“胎漏”、“胎動不安”、“滑胎”等范疇。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，腎為先天之本，水火之臟，五臟六腑之本，主藏精、主生殖，腎氣盛則五臟得養(yǎng)，腎氣衰則五臟陰陽失調(diào)，封藏失職，胎失所系，而發(fā)本病?！陡登嘀髋啤诽岬健鞍}者系于腎”，更指出腎與妊娠的重要關(guān)系。故本病應(yīng)治以溫腎化氣，助孕養(yǎng)胎。

金匱腎氣丸是臨床治療腎氣虛弱、命火不足證候的代表方劑。方中重用干地黃滋陰補(bǔ)腎為君藥。臣以山茱萸、山藥補(bǔ)肝脾而益精血；加以附子、桂枝之辛熱藥，助命門以溫陽化氣。君臣相伍，補(bǔ)腎填精，溫腎助陽，乃陰中求陽之治。從用量分析，補(bǔ)腎藥居多，溫陽藥較輕，其立方之旨，又在微微生火，鼓舞腎氣，取“少火生氣”之義，而非峻補(bǔ)。又配澤瀉、茯苓利水滲濕泄?jié)?，丹皮清瀉肝火，三藥于補(bǔ)中寓瀉，使邪去則補(bǔ)乃得力，并防滋陰藥之膩滯。諸藥合用，溫而不燥，滋而不膩，助陽之弱以化水，滋陰之虛以生氣，使腎陽振奮，氣化復(fù)常，則諸證自除?，F(xiàn)代藥理實驗研究亦證明，金匱腎氣丸有調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞亞群的作用，與激素的調(diào)節(jié)作用相似[8]。金匱腎氣丸對、、以及均有一定的調(diào)節(jié)作用，能有效糾正患者的T淋巴細(xì)胞亞群紊亂，顯著改善患者的細(xì)胞免疫功能[9]。

總之，金匱腎氣丸聯(lián)合主動免疫法治療封閉抗體不足患者，中西醫(yī)結(jié)合，共同增強(qiáng)患者免疫反應(yīng)，使節(jié)患者免疫功能平衡，可能是其作用機(jī)理。其有縮短療程，提高療效的功能，值得進(jìn)一步研究和推廣。

[1]Pandey MK，Saxena V，Agreawal S．Characrerization of mixed lymphocyte reaction blocking antibodies(MLR-Bf)inhumanpregnancy[J].BMC Pregnancy Childbirth，2003，3(1):2．

[2]陳玲，陳曉勇.不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的免疫學(xué)研究進(jìn)展[J].江西醫(yī)藥，2012，47（7）：650-652．

[3]汪丹，李偉莉.封閉抗體與反復(fù)自然流產(chǎn)的研究進(jìn)展[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志，2009，17（11）：124-125．

[4]金志春.實用不孕不育診斷與治療技術(shù)[M].武漢：湖北科學(xué)技術(shù)出版社，1999：304．

[5]歐陽能勇，黃松音，鄭澄宇.反復(fù)自然流產(chǎn)患者免疫治療后封閉抗體與調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞變化[J].現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)，2010，36(5):332-334．

[6]黃劍婷.免疫治療封閉抗體不足習(xí)慣性流產(chǎn)36例臨床分析[J].西部醫(yī)學(xué)，2011，23(5)：880-881．

[7]曾瓊連，姚美玉.常見免疫因素所致復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的中西醫(yī)治療進(jìn)展[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2010，30(6):669-671．

[8]劉妍，王蕾，趙暉，等.六味地黃和金匱腎氣丸對實驗性自身免疫性腦脊髓炎小鼠淋巴細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞的影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2009，15（4）：42-47．

[9]梁華，朱明雪，孫燕佩，等.六味地黃丸金匱腎氣丸的免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥學(xué)報，2012，40（2）:79．

Clinical Effect Observation of Combining Jin Gui Shen Qi Wan and Active Immunization Therapy to Treat the Patients with Blocking Antibody-negative

Ren Fenglan
（Infertility department,Zhoukou city hospital of TCM,Hebei province,Zhoukuo 466000,China）

Objective To observe the clinical effect of combining Jin Gui Shen Qi Wan and active immunization therapy to treat the patients with blocking antibody-negative.Methods 76 patients were randomly divided into the treatment group and the control group,38 cases in each group.The treatment in the control group was given the lymphocyte active immune therapy,every 2 weeks,4 times was regarded as 1 course.The treatment of the treatment group was given the oral administration of Jin Gui Shen Qi Wan based on the control group,8 pills for one time,3 times a day.Both two groups were treated for 3 courses and observed the change of blocking antibody in different course of treatment.Results After the first course of treatment,the antibody positive rate of the treatment group and the control group were 42.1%and 18.4%respectively.After the second course of treatment,the antibody positive rate of the treatment group and the control group were 55.3%and 28.9%respectively.After the third course of treatment,the antibody positive rate of the treatment group and the control group were 81.6%and 57.9%respectively.The blocking antibody positive rate of the treatment group were significantly all higher than that of the control group(P＜0.05).Conclusion Combining Jin Gui Shen Qi Wan and active immunization therapy to treat the patients with blocking antibody-negative had the function of shortening the course of treatment,and could improve the curative effect.

Jin Gui Shen Qi Wan;lymphocytes;active immunotherapy;blocking antibody;integrative medicine therapy

10.3969/j.issn.1672-2779.2014.24.022

1672-2779（2014）-24-0043-02

楊杰 本文校對：張培麗

2014-09-22）