徐文秀 孫昊量 牛秀艷 栗巧玲

黃芪提取物對(duì)牙釉質(zhì)脫礦的影響※

徐文秀 孫昊量 牛秀艷 栗巧玲

目的 探討黃芪提取物對(duì)牙釉質(zhì)脫礦的影響及其可能的防齲機(jī)制。方法乳酸膠體系統(tǒng)模擬致齲后，分別放入黃芪提取液、10% AgNO3、去離子水三組試劑中處理脫礦后的牙釉質(zhì)，再次去離子水脫礦后鏡下觀察。結(jié)果通過對(duì)各組標(biāo)本的電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，去離子水處理后，釉質(zhì)表面出現(xiàn)凹凸不平、形態(tài)不規(guī)則的凹坑，10% AgNO3處理后，可見釉質(zhì)表面出現(xiàn)細(xì)密的顆粒附著，并出現(xiàn)黑色沉淀，釉質(zhì)表面較為平坦；而經(jīng)黃芪提取液處理過的釉質(zhì)齲表面易出現(xiàn)顆粒附著，恢復(fù)平整。結(jié)論黃芪提取物具有一定的防釉質(zhì)齲能力，能與脫礦后的牙釉質(zhì)形成有效結(jié)合，從而使牙釉質(zhì)齲的進(jìn)展受到抑制，具有一定的抗脫礦能力。

黃芪；牙釉質(zhì)齲；脫礦；再礦化

牙釉質(zhì)是機(jī)體中最堅(jiān)硬、致密、礦化程度最高的組織，牙釉質(zhì)齲病變過程中無細(xì)胞參與，是一種非細(xì)胞反應(yīng)性病變，基本特征是酸滲透入牙釉質(zhì)，羥磷灰石晶體相對(duì)不易滲入，但包繞晶體的部分牙釉質(zhì)有機(jī)質(zhì)基質(zhì)含水量高，可使氫離子滲入，引起一系列微觀結(jié)構(gòu)改變。本實(shí)驗(yàn)對(duì)人工致齲釉質(zhì)塊進(jìn)行定性及定量分析，考查樣本經(jīng)黃芪提取液處理后的再礦化情況，探討黃芪作為天然防齲藥物的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 材料黃芪提取液[以市售黃芪按1:1煎5成水煎液（1g黃芪煎成1m l藥液）]、10% AgNO3、去離子水、熒光光度計(jì)、恒溫水浴箱等。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)樣本的分組設(shè)計(jì) 選取36顆無齲離體中切牙隨機(jī)分為三組（黃芪組、AgNO3組、去離子水組），每組12顆，樣本經(jīng)乳酸膠體系統(tǒng)模擬致齲、藥物處理、去離子水再脫礦處理后進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.2 標(biāo)本處理 將36顆離體中切牙去除表面污染物，超聲清洗、干燥，體式顯微鏡下觀察無齲損、氟斑、裂痕。用硬組織切割機(jī)將離體中切牙牙冠唇面制備成6mm×6mm×1mm厚的釉質(zhì)塊，流水沖洗下金相拋光機(jī)及碳化硅砂紙依次打磨、拋光，去除唇面釉質(zhì)表層，光鏡下觀察表面均勻一致，制備完成平滑面牙釉質(zhì)磨片標(biāo)本。釉質(zhì)塊表面開窗4mm× 4mm大小，其余部位涂2層抗酸指甲油。標(biāo)本置于0.1mol/L乳酸人工唾液[0.1mol/L乳酸，1%瓊脂，pH=4.5，加入少量制霉菌素（每50m l不少于100單位）]內(nèi)48h，脫礦[1-2]。藥物處理方法：脫礦后釉質(zhì)塊分別用黃芪提取液、10% AgNO3、或去離子水三組試劑完全浸泡5h，37℃恒溫保存；脫礦處理方法：藥物處理完畢后，標(biāo)本用去離子水沖洗，脫礦48h。1.2.3 對(duì)試驗(yàn)后的標(biāo)本進(jìn)行熒光測(cè)量和電鏡觀察。

2 結(jié)果

2.1 光敏熒光分析三組試樣藥物處理前后熒光量比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。黃芪組與AgNO3組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。黃芪組、AgNO3組與去離子水組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 掃描電鏡觀察電鏡觀察顯示，正常牙齒釉質(zhì)表面較為平整；經(jīng)人工脫礦處理形成釉質(zhì)齲模型后，表面可見大小不等、深度不一的凹坑；在人工釉質(zhì)齲的基礎(chǔ)之上，經(jīng)10% AgNO3處理后，可見釉質(zhì)表面出現(xiàn)細(xì)密的顆粒附著，并出現(xiàn)黑色沉淀，釉質(zhì)表面較為平坦；而經(jīng)黃芪提取液處理過的釉質(zhì)齲表面亦出現(xiàn)顆粒附著，恢復(fù)平整。

3 討論

隨著人們對(duì)齲病認(rèn)識(shí)的不斷深入，口腔生態(tài)平衡與齲病發(fā)生的關(guān)系逐漸受到重視，尋找既無毒副作用，又有防齲功能的天然物質(zhì)進(jìn)行生態(tài)防齲成為齲病預(yù)防的一個(gè)重要的研究方向。研究顯示，黃芪在較低濃度時(shí)即可抑制變形鏈球菌、粘性放線菌和血鏈球菌的生長(zhǎng)，而且在不影響細(xì)菌生長(zhǎng)的最低抑菌濃度下，對(duì)血鏈球菌與粘性放線菌的產(chǎn)水不溶性多糖也有明顯的抑制作用[3]。對(duì)變異鏈球菌在唾液獲得性膜的黏附也有一定抑制作用[4]，為黃芩成為防齲天然藥物的臨床研究奠定了良好的基礎(chǔ)。但多數(shù)研究主要集中在藥物對(duì)致齲菌的作用方面，由于齲病發(fā)生是包括致齲菌、宿主和飲食等多因素共同作用的結(jié)果，因此，更加深入和全面地了解天然藥物在預(yù)防齲病方面的作用和作用機(jī)制是其進(jìn)入臨床應(yīng)用前必須解決的問題。

本實(shí)驗(yàn)通過熒光測(cè)量和電鏡觀察進(jìn)行定量及定性研究發(fā)現(xiàn)，黃芪的藥效與臨床防齲藥物 AgNO3相當(dāng)，能夠抑制釉質(zhì)齲脫礦并促進(jìn)再礦化，使得溶解晶體繼續(xù)增長(zhǎng)礦化，恢復(fù)釉質(zhì)表面平整。且黃芪的有效成分黃芪苷，屬葡萄糖醛酸苷類，水解后產(chǎn)生黃芪素和葡萄糖醛酸，具有抗菌、抗炎、降壓、利尿、抗變態(tài)反應(yīng)等多方面的作用[5]。綜上所述，黃芪在口腔防齲、抑菌等方面有著較大的優(yōu)勢(shì)，值得更深入研究。

[1] Dayan D.A preliminary study of activation of collagase in carious human dentine matrix[J].a Rchs Oral Biol,1983,28(2):189-189.

[2] 劉正,邊專.口腔生物學(xué)[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:43-43.

[3] 周學(xué)東.黃芪對(duì)三種主要致齲菌生長(zhǎng)、產(chǎn)酸及產(chǎn)胞外多糖的影響[J].華西醫(yī)大學(xué)報(bào),2002,33(3):391-393.

[4] 周學(xué)東.齲病學(xué)[M].1版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2011:162-163.

[5] 張喜平,田華,程琪輝.黃芪苷的藥理作用研究現(xiàn)狀[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2003,19(11):1212-1215.

R284.2

A

1673-5846(2014)05-0236-02

牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬紅旗醫(yī)院口腔科，黑龍江牡丹江 157000

黑龍江省衛(wèi)生廳科研課題，課題編號(hào)：2012-304