謝 洪,劉良明,陳琳玲
(廣東省深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院藥劑科,廣東 深圳 518109)
不同儲(chǔ)藏人參及西洋參超氧化物歧化酶活力比較
謝 洪,劉良明,陳琳玲
(廣東省深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院藥劑科,廣東 深圳 518109)
目的:探討不同儲(chǔ)藏人參及西洋參超氧化物的活力。方法:分別取同一產(chǎn)地的5年生鮮人參和3年、4年生西洋參,在4℃、-20℃分別保存1、3、7、14、30d,測(cè)定樣品的蛋白含量和SOD活性。同一產(chǎn)地的5年生鮮人參3年、4年生西洋參,在常溫下避光晾干,取晾干的生曬參分別常溫貯藏1、3、7、14、30d,應(yīng)用SOD試劑盒測(cè)定SOD的活力,采用Bradford法測(cè)定蛋白質(zhì)含量。結(jié)果:鮮參隨著時(shí)間的推移,SOD活性也隨之下降,但在-20℃條件下貯藏SOD活性損失最小,當(dāng)貯藏30d時(shí),活性保留率仍在98%以上,4℃條件下人參及西洋參的SOD活性保留率在95%左右,生曬參的SOD活性較鮮參的活性有所損失,但仍可保留在90%以上。結(jié)論:不同儲(chǔ)藏人參及西洋參超氧化物歧化酶的活力穩(wěn)定。
儲(chǔ)藏條件;人參;西洋參;超氧化物歧化酶
超氧化物歧化酶(superoxide dismutase;SOD)是生物體內(nèi)存在的一種抗氧化金屬酶[1-2],超氧化物歧化酶能夠修復(fù)受損細(xì)胞,復(fù)原自由基對(duì)人及動(dòng)植物機(jī)體造成的損傷。并且在防輻射、抗腫瘤,植物抗逆性等方面也有積極的作用。我們探討了不同貯藏人參及西洋參SOD的活性變化,現(xiàn)報(bào)道如下。
材料:實(shí)驗(yàn)用5年人參購于敦化青溝子,3年、4年西洋參購于敦化額穆。經(jīng)專業(yè)人士鑒定,分別為五加科植物人參Panax ginseng C.A.Mey.和五加科植物西洋參Panax quiquefoliumL.的干燥根,符合《中國(guó)藥典》2010年版一部的規(guī)定。
儀器:LL3000型冷凍干燥機(jī)(德國(guó)Heto公司);AL204型電子天平(上海梅特勒-托利多儀器有限公司),電熱恒溫水浴鍋(北京市永光明醫(yī)療儀器廠),UVmini-1240型紫外可見分光光度計(jì)(日本Shimadzu公司),5804R冷凍型臺(tái)式高速離心機(jī)(德國(guó)艾本德公司),DS21型高速組織搗碎機(jī)(上海標(biāo)本模型廠),Multiskan MK3型酶標(biāo)儀(美國(guó)Thermo公司)。
試劑:SOD試劑盒(南京建成生物工程研究所,20110908),Bradford 蛋白質(zhì)定量試劑盒(北京Sigma公司),三羥甲基氨基乙烷(美國(guó)Sigma公司),其他試劑為分析純。
分別取同一產(chǎn)地的5年生鮮人參和3年、4年生西洋參,在4℃、-20℃分別保存1、3、7、14、30d,測(cè)定樣品的蛋白含量和SOD活性。同一產(chǎn)地的5年生鮮人參3年、4年生西洋參,在常溫下避光晾干,取晾干的生曬參分別常溫貯藏1、3、7、14、30d,測(cè)定樣品的蛋白含量和SOD活性。
SOD酶液的制備的活力測(cè)定。取樣品分別以1︰4的料液比加入一定體積預(yù)冷的0.05mol/L磷酸緩沖液(pH7.5),勻漿,4℃浸提20min,過濾,12000r/min離心10min,吸取上清液,凍干。參照SOD試劑盒說明書測(cè)定和計(jì)算樣品中SOD的活力,單位以U/g蛋白計(jì)。
不同貯藏條件下SOD活力值。鮮參隨著時(shí)間的推移,SOD活性也隨之下降,但在-20℃條件下貯藏SOD活性損失最小,當(dāng)貯藏30d時(shí),活性保留率仍在98%以上,4℃條件下人參西洋參的SOD活性保留率在95%左右,生曬參的SOD活性較鮮參的活性有所損失,但仍可保留在90%以上。見表1 。
表1 不同貯藏條件下SOD活力值
人參為五加科人參屬植物人參(Panax ginseng C.A.Mey)的根及根莖[3],具有大補(bǔ)元?dú)?、補(bǔ)脾益肺、生津止渴、安神益智的功效。西洋參為五加科植物西洋參(Pawax L.)的干燥根。具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、清熱生津等功效。人參和西洋參的功效亦有區(qū)別,人參性溫,興奮中樞、抗疲勞等作用較西洋參強(qiáng)。西洋參性寒,益氣生津、鎮(zhèn)靜解熱作用較人參強(qiáng)。目前的研究大多針對(duì)人參皂苷,對(duì)于人參蛋白尤其是SOD的研究相對(duì)較少,人參水溶性蛋白也具有很多重要的生物學(xué)活性。SOD具有抗輻射、抗病毒、抗腫瘤、抗休克等多方面的作用[4]。
SOD能有效減輕或消除超氧陰離子自由基對(duì)機(jī)體的損害。人參中具有較豐富的水溶性蛋白,具有較高的SOD活性[5],人參根中SOD活力整體維持在較高水平,在展葉期和開花期上升趨勢(shì)明顯[7],提示植物處于幼年期SOD活性較強(qiáng),處于衰老期時(shí)SOD活性較低。鮮參隨著時(shí)間的推移SOD活性也隨之下降,但在-20℃條件下貯藏SOD活性損失最小,當(dāng)貯藏30d時(shí)活性保留率仍在98%以上,4℃條件下人參西洋參的SOD活性保留率在95%左右。有報(bào)道西洋參鮮品SOD活性顯著高于西洋參干品[7],這可能與SOD酶遇熱變性、活性降低有關(guān)。生曬參的SOD活性較鮮參的活性有所損失,但仍可保留在90%以上,與相關(guān)報(bào)道一致[8]。
有報(bào)道人參中SOD具有很好的熱穩(wěn)定性[9]。在不同儲(chǔ)藏條件下人參、西洋參中超氧化物歧化酶的活力穩(wěn)定。
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1004-2814(2014)05-0470-02
2013-12-26