駱海波，李世升，李德超，賀從安

（武漢市蔬菜科學(xué)研究所，430065）

短葉13號(hào)蘿卜加代技術(shù)研究

駱海波，李世升，李德超，賀從安

（武漢市蔬菜科學(xué)研究所，430065）

通過低溫處理蘿卜干種子、萌動(dòng)種子及幼苗，以期從中篩選出更適合短葉13號(hào)蘿卜加代研究的材料，尋找更快、更方便的蘿卜加代方法。試驗(yàn)結(jié)果表明，相比其他兩類材料，蘿卜干種子不易完成春化而開花；而在蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗兩類材料中，前者加代操作相對(duì)簡便且低溫處理定植后開花比例較高。因此，將萌動(dòng)種子作為蘿卜加代材料可縮短育種進(jìn)程、提高育種效率。

春化；加代；發(fā)育時(shí)期；開花；短葉13號(hào)蘿卜

蘿卜是種子春化型作物，低溫是其開花的必要條件。自然低溫條件需要較長時(shí)間才能實(shí)現(xiàn)，因此利用自然條件讓蘿卜開花結(jié)實(shí)周期長、耗時(shí)多。利用人工條件模擬自然低溫促進(jìn)蘿卜提早開花，可大大縮短研究時(shí)間，加快蘿卜育種進(jìn)程[1]。加代技術(shù)是利用二年生作物低溫春化的植物學(xué)習(xí)性，通過低溫處理或激素處理幼苗，人為促進(jìn)植物抽薹、開花及結(jié)籽的技術(shù)，每年至少可完成2～4代。本研究在先前蘿卜人工加代技術(shù)的基礎(chǔ)上[2]，利用恒定低溫條件處理干種子、萌動(dòng)種子及幼苗等不同時(shí)期的短葉13號(hào)常規(guī)蘿卜材料，通過比較上述不同蘿卜材料經(jīng)人工低溫處理后開花情況及種子形成情況，篩選更方便、快捷的蘿卜加代方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料來自武漢市蔬菜研究所十字花科研究室純化的短葉13號(hào)常規(guī)蘿卜品種。

1.2 試驗(yàn)方法

分別對(duì)短葉13號(hào)蘿卜品種的3個(gè)不同發(fā)育時(shí)期（處于休眠狀態(tài)干種子、萌動(dòng)種子及處于子葉時(shí)期幼苗）的材料進(jìn)行處理。干種子直接放置于2～4℃冰箱進(jìn)行低溫處理；另外將短葉13號(hào)干種子放入玻璃平皿浸種，分別將浸種2 d左右剛露白萌動(dòng)的種子及浸種7 d已發(fā)育至子葉期的幼苗移入裝有有機(jī)基質(zhì)的穴盤中，并置于2～4℃冰箱進(jìn)行低溫處理，均處理20 d。每個(gè)材料設(shè)置3個(gè)重復(fù)，處理期間需要人工澆水以保持適當(dāng)濕度，待處理完后直接移苗于露地，作好標(biāo)記，具體操作過程如圖1。田間調(diào)查每個(gè)處理的定植時(shí)間、開花時(shí)間、花器官形態(tài)及結(jié)莢情況等。

圖1 蘿卜加代過程

表1 不同類型蘿卜材料開花比例統(tǒng)計(jì)

1.3 蘿卜胚胎分離及花藥觀察

手工從蘿卜角果中分離胚珠，然后再利用解剖針在解剖鏡（江南JSZ5B）下分離得到蘿卜不同發(fā)育時(shí)期的胚胎，花藥形態(tài)及蘿卜胚胎利用體式顯微鏡（Olympus SCX-12）及CCD觀察并拍照。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及制圖

數(shù)據(jù)獲取后利用Excel進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)分析，然后利用Coreldraw12作圖。

圖2 低溫處理后短葉13號(hào)蘿卜開花情況

2 結(jié)果與分析

圖3 短葉13號(hào)蘿卜莢果及種子胚胎發(fā)育情況

2.1 不同蘿卜材料開花情況比較

表1結(jié)果表明，除蘿卜干種子開花比例極低（0.54%，n=402）外，其他2類材料開花比例均較高，人工低溫處理蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗定植后開花比例分別為91.72%（n=95）、95.85%（n=120）。盡管蘿卜干種子經(jīng)人工低溫處理后開花比例較低，但其操作簡單（直接將其放置低溫冰箱即可）。另外，相比蘿卜幼苗的加代過程，蘿卜萌動(dòng)種子的加代步驟也比較簡單，只需要將剛剛萌動(dòng)的種子放入穴盤進(jìn)行低溫處理。處理蘿卜幼苗則需將其人工插入穴盤基質(zhì)，加之移苗過程易折斷下胚軸致其倒伏。

2.2 不同蘿卜材料開花后花器官形態(tài)比較

通過比較發(fā)現(xiàn)，蘿卜干種子、蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗經(jīng)低溫處理后所形成的生殖器官——花在外形上不存在差異。3種蘿卜材料經(jīng)加代后花器官一致，部分雄性不育植株花形態(tài)中雄蕊敗育情況也十分明顯（圖2）。

2.3 不同蘿卜材料開花后角果發(fā)育及胚胎發(fā)育情況分析

圖3為短葉13號(hào)蘿卜莢果及種子胚胎發(fā)育情況，本試驗(yàn)結(jié)果表明，3種蘿卜材料在人工加代開花（可育植株）后均能形成正常角果，加代后所形成的角果與自然條件下所形成角果無異。進(jìn)一步通過顯微解剖的方法分離得到不同發(fā)育時(shí)期內(nèi)胚珠中的胚胎，結(jié)果顯示胚胎發(fā)育也是正常的。

3 小結(jié)與討論

蘿卜加代技術(shù)不僅為研究蘿卜育性、蘿卜重要性狀遺傳及種子發(fā)育規(guī)律提供可貴試驗(yàn)材料，而且使其研究過程大大縮短，研究速度加快。通過人工低溫處理蘿卜種子使其完成開花在前人研究中已見報(bào)道[3，4]，本研究希望通過篩選不同蘿卜材料，尋找更快、更方便的蘿卜加代方法。蘿卜干種子、蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗分別是不同狀態(tài)的種子及其發(fā)育產(chǎn)物，分別對(duì)上述蘿卜材料開展人工低溫處理工作并分析其開花情況，結(jié)果表明，相比其他2種材料，蘿卜干種子在相同條件下不易完成春化而開花。而在蘿卜萌動(dòng)種子及蘿卜幼苗兩類材料中，前者加代操作相對(duì)簡便且低溫處理定植后開花比例較高。總而言之，將蘿卜萌動(dòng)種子作為蘿卜加代材料可使蘿卜加代過程更快、更便捷，效率也很高。

[1]汪隆植，何啟偉.中國蘿卜[M].北京：科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，2004：22-34.

[2]梅時(shí)勇.系統(tǒng)開展蘿卜全產(chǎn)業(yè)鏈科技研發(fā) 促進(jìn)我們蘿卜產(chǎn)業(yè)不斷提檔升級(jí)[J].長江蔬菜，2013（24）：1-5.

[3]張麗，宮國義.兩種春化方式對(duì)不同蘿卜品種抽薹開花的影響[J].北方園藝，2006（2）：35-36.

[4]駱海波，張雪清，李德超，等.蘿卜加代技術(shù)[J].種子世界，2004（12）：46.

Study on Generation-adding Technology for Duanye No.13 Radish

LUO Haibo,LI Shisheng,LI Dechao,HE Cong'an
(Wuhan Vegetable Research Institute,430065)

In the paper,we treated radish dry seeds,germinated seeds and seedlings in low temperature respectively,in order to screen out suitable generation-adding material for Duanye No.13 radish and find out faster,more convenient generation-adding method for radish.The results showed that,compared with the other two materials,dry radish seeds could not flower after the cold temperature treatment.After being treated in low temperature,germinated radish seeds had higher flowering ratio and it was easier and more simple to take germinated seeds as generation-adding materials for radish.As a result,taking germinated seeds as generation-adding materials for radish could shorten the breeding process and improve the breeding efficiency of radish.

Vernalization;Generation adding;Developmental stage;Flowering;Duanye No.13 radish

S631.1

A

1001-3547（2014）08-0015-03

10.3865/j.issn.1001-3547.2014.08.005

武漢市科技局攻關(guān)項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：CX2013021702010584）

駱海波（1970-），男，本科，高級(jí)農(nóng)藝師，主要從事蘿卜育種研究

李德超（1965-），男，通信作者，正高級(jí)農(nóng)藝師，主要從事蘿卜育種及推廣工作，E-mail：121906411@qq.com

2013-07-16