夏曉翠張馮斌楊勤宏方?jīng)_偉馮 棟魏太云周冰峰
(1福建農(nóng)林大學(xué),福州 350002;2陜西黃龍縣養(yǎng)蜂試驗(yàn)站,715700;3陜西延安市養(yǎng)蜂試驗(yàn)站,716000)
中蜂囊狀幼蟲病自1972年在我國(guó)廣東省發(fā)生后,迅速蔓延至全國(guó)的中華蜜蜂主產(chǎn)區(qū),成為飼養(yǎng)的中華蜜蜂毀滅性病害。雖然經(jīng)40多年人工選育和自然進(jìn)化,中蜂囊狀幼蟲病已不再具有毀滅性,但仍是中華蜜蜂飼養(yǎng)最主要的病害。中蜂囊狀幼蟲病的病原是中蜂囊狀幼蟲病病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV),其感染1~3日齡幼蟲,幼蟲體內(nèi)聚集大量的液體和病毒粒體,使其巢房不能封蓋,病蟲呈尖頭狀,體顏色由珍珠白色逐漸變?yōu)闇\黃色。感病幼蟲死亡之后,蟲體會(huì)逐漸變得干枯,形成一個(gè)暗褐色如龍船狀的鱗片。中蜂囊狀幼蟲病尚無有效的治療藥物,采用的預(yù)防措施主要有選育抗病蜂種,加強(qiáng)蜂群管理等。
RNA干擾(RNA interference,RNAi)是指一種分子生物學(xué)上由雙鏈RNA(dsRNA)誘發(fā)的基因沉默現(xiàn)象,其機(jī)制是通過阻礙特定基因的翻譯或轉(zhuǎn)錄來抑制基因表達(dá)。為解決中蜂囊狀幼蟲病危害,本研究嘗試將RNAi技術(shù)應(yīng)用在中蜂囊狀病的治療,現(xiàn)已取得了理想的結(jié)果。在實(shí)驗(yàn)室條件下,利用RNAi技術(shù)合成中蜂囊狀幼蟲病病毒同源的特異dsRNA,抑制中蜂囊狀幼蟲病病毒在蟲體內(nèi)的侵染,該基因藥能有效地抑制中華蜜蜂囊狀幼蟲病病毒。
為了在生產(chǎn)實(shí)踐中檢驗(yàn)此項(xiàng)技術(shù)治療中蜂囊狀幼蟲病的效果,2014年6~7月,我們?cè)趪?guó)家蜂產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系延安綜合試驗(yàn)站、陜西省黃龍示范縣養(yǎng)蜂試驗(yàn)站的支持和配合下,在黃龍縣石堡鎮(zhèn)廟河村劉長(zhǎng)有蜂場(chǎng)和石堡鎮(zhèn)楊窯科村王慶華蜂場(chǎng),通過將中蜂囊狀幼蟲病病毒同源的特異dsRNA飼喂給自然條件下罹患中華蜜蜂囊狀幼蟲病的蜂群,開展中蜂囊狀幼蟲病治療效果的實(shí)驗(yàn)。
將中蜂囊狀幼蟲病病毒同源的特異dsRNA按3個(gè)不同的濃度(低濃度、中濃度和高濃度)飼喂給蜂群作為3個(gè)不同的處理組;以未飼喂中蜂囊狀幼蟲病病毒同源的特異dsRNA的患有中華蜜蜂囊狀幼蟲病的蜂群為對(duì)照組。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組10群中華蜜蜂。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,除了低濃度組效果不明顯外,中濃度組和高濃度組均取得了明顯效果。
1.病蟲數(shù)量減少
對(duì)照組病蟲數(shù)量7天后增加65.82%,14天后增加29.88%,21天后增加35.37%的前提下,與飼喂藥物之前對(duì)比,中濃度組和高濃度組病蟲數(shù)7天后分別減少85.03%和87.91%,14天后減少91.44%和94.87%,21天后減少97.33%和99.63%。
2.封蓋子數(shù)量變化
對(duì)照組封蓋子數(shù)量7天后減少28.12%,14天后減少33.01%,21天后減少44.25%的前提下,與飼喂藥物之前對(duì)比,7天后中濃度組封蓋子數(shù)量減少0.49%和高濃度組增加1.71%,14天后分別增加9.56%和20.60%,21天后分別增加23.68%和30.10%。
3.群勢(shì)增長(zhǎng)
對(duì)照組群勢(shì)7天后下降16.67%,14天后下降16.67%,21天后下降27.78%的前提下,與飼喂藥物之前對(duì)比,中濃度組和高濃度組群勢(shì)7天后分別增長(zhǎng)13.64%和9.09%,14天后分別增長(zhǎng)22.73%和27.27%,21天后分別增長(zhǎng)40.91%和59.10%。
為了進(jìn)一步研究該藥物療效的穩(wěn)定性,我們將進(jìn)一步深入研究,擴(kuò)大治療試的范圍。