申小閣 胡福良

（浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，杭州310058）

蜂膠具有廣泛的藥理活性和保健功能，而蜂膠的抗癌作用尤其受到人們的關(guān)注。近年來(lái)，隨著對(duì)蜂膠抗癌作用研究的深入，其抗癌機(jī)制也逐漸被人們所認(rèn)識(shí)。這些機(jī)制主要包括：抑制癌細(xì)胞和腫瘤干細(xì)胞的增殖，抑制血管生成，調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境，以及對(duì)其他抗癌療法的輔助作用等。

1 蜂膠通過(guò)免疫調(diào)節(jié)作用抑制癌/原癌細(xì)胞增殖

目前，大量的研究及臨床實(shí)踐表明，蜂膠具有良好的抗癌作用，而蜂膠作為癌癥預(yù)防藥物已經(jīng)應(yīng)用于慢性皮膚炎的研究。Cole等（2010）用澳洲蜂膠醇提物處理經(jīng)紫外線(xiàn)誘導(dǎo)的光致癌性無(wú)毛小鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)蜂膠的醇提物通過(guò)免疫抑制及降低脂質(zhì)過(guò)氧化作用使該小鼠的皮膚炎減小到最低化，同時(shí)還表現(xiàn)出劑量依賴(lài)性方式防止皮膚曬傷性水腫和接觸性過(guò)敏反應(yīng)。進(jìn)一步研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，蜂膠是通過(guò)促進(jìn)免疫耐受性細(xì)胞因子IL-10的過(guò)量表達(dá)以及抑制炎性細(xì)胞因子IL-6和IL-12的產(chǎn)生來(lái)抑制典型的光免疫反應(yīng)。

蜂膠對(duì)其他種類(lèi)的癌癥也表現(xiàn)出一定的保護(hù)作用。Orsolic等（2003）用50 mg/kg的蜂膠水提液處理小鼠，發(fā)現(xiàn)其體內(nèi)巨噬細(xì)胞的活性有所上升，同時(shí)刺激了相關(guān)淋巴細(xì)胞活化因子的產(chǎn)生，進(jìn)而抑制人宮頸癌細(xì)胞和中國(guó)倉(cāng)鼠肺成纖維細(xì)胞的增殖。2011年，Badr等報(bào)道水溶性埃及蜂膠衍生物對(duì)小鼠體內(nèi)艾氏腹水癌細(xì)胞增殖的抑制作用，先經(jīng)灌胃給予小鼠蜂膠處理，隨后腹腔注射艾氏腹水癌細(xì)胞。結(jié)果發(fā)現(xiàn)蜂膠處理組的腹水液體積和癌細(xì)胞總數(shù)有所減少，同時(shí)，該處理組小鼠單核細(xì)胞的吞噬活性、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率以及粒細(xì)胞/單核細(xì)胞也有顯著的上升，這暗示著蜂膠可能通過(guò)潛在的免疫調(diào)節(jié)活性達(dá)到抗癌的作用。

然而，蜂膠對(duì)癌前實(shí)體器官的保護(hù)作用目前還存在爭(zhēng)議。Said等（2010）曾在研究巴西蜂膠水提物對(duì)肝癌的預(yù)防作用中發(fā)現(xiàn)該蜂膠對(duì)DEN（二乙基亞硝胺）誘導(dǎo)下的大鼠無(wú)保肝作用，但Kawase等（2009）在另一類(lèi)似的肝癌大鼠實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)口服柯因（5,7-二羥基黃酮）可以明顯減少癌癥結(jié)節(jié)的數(shù)量和大小。隨后，Khan等（2011）用甲基化的柯因處理患有肝癌的大鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)大鼠的肝實(shí)質(zhì)漿液及導(dǎo)管酶含量均有所減少，表現(xiàn)出一定的護(hù)肝作用。這可能是由于蜂膠含有復(fù)雜的化學(xué)成分，其整體物質(zhì)的生物學(xué)活性不同于單個(gè)成分所造成的。

2 蜂膠減少腫瘤干細(xì)胞數(shù)量

腫瘤干細(xì)胞對(duì)腫瘤的存活、增值、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)有著重要作用。腫瘤干細(xì)胞可以通過(guò)自我更新和無(wú)限增值維持自身的生命力。研究發(fā)現(xiàn)，蜂膠除了能夠降低癌細(xì)胞和原癌細(xì)胞的數(shù)量外，也能影響腫瘤干細(xì)胞的數(shù)量，進(jìn)而抑制癌癥的發(fā)展。Godfrey等用巴西蜂膠粗提物培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞株-RPMI 8226細(xì)胞24h，然后在37℃水浴條件下用5μg/ml Hoechst 33342培養(yǎng)50萬(wàn)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞90 min。在培養(yǎng)過(guò)程中用流式細(xì)胞儀檢測(cè)側(cè)群細(xì)胞的比例，以單獨(dú)使用溶劑、碘化丙啶及培養(yǎng)基處理作為陰性對(duì)照組。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，巴西蜂膠處理組的側(cè)群細(xì)胞比例顯著地降低至0.14%，而3個(gè)陰性對(duì)照組的側(cè)群細(xì)胞比例仍保持在17%左右。這一結(jié)果表明蜂膠對(duì)腫瘤干細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用。

Omene等（2011）利用CAPE（咖啡酸苯乙酯）處理具有典型CD44（+）/CD24（－/low）表現(xiàn)型的乳腺癌干細(xì)胞以及能夠產(chǎn)生微粒體的單個(gè)細(xì)胞，結(jié)果表明CAPE以一種劑量依賴(lài)性方式抑制了癌癥干細(xì)胞的我更新、祖細(xì)胞形成和克隆生長(zhǎng)，使其數(shù)量有了明顯的下降。而據(jù)Ahmed報(bào)道，含有微量CAPE的巴西蜂膠也可以減少癌癥干細(xì)胞的數(shù)量。

3 蜂膠中Artepillin C和CAPE的抗癌作用

蜂膠含有復(fù)雜的化學(xué)成分，在這些物質(zhì)中，CAPE和Artepillin C（3,5-二異戊二烯基-4-羥基肉桂酸）作為蜂膠中兩種主要活性成分，在其抗癌作用中發(fā)揮著重要的功能。Shimizu等（2004）報(bào)道，Artepillin C可以通過(guò)上調(diào)Cip1/p21（一種細(xì)胞周期蛋白激酶抑制劑）誘導(dǎo)G0/G1細(xì)胞周期的延長(zhǎng)從而抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)；而據(jù)Messerli等（2009）報(bào)道，巴西綠蜂膠提取物中的主要成分Artepillin C可以通過(guò)阻斷原癌基因PAK1信號(hào)通路，從而完全抑制與人多發(fā)性神經(jīng)纖維瘤相關(guān)的小鼠移植瘤的生長(zhǎng)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)CAPE也可以起到與之相似的抑制作用。然而，CAPE主要存在于溫帶地區(qū)的蜂膠中，而Artepillin C只存在于巴西綠蜂膠中，這兩種蜂膠成分差異較大，生物學(xué)活性也有所不同。

CAPE的抗腫瘤作用主要通過(guò)以下途徑完成：抑制DNA合成，干擾生長(zhǎng)因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，促進(jìn)抗血管生成作用。Grunberger等（1988）用培養(yǎng)的乳腺癌和黑色素瘤細(xì)胞系測(cè)試了CAPE對(duì)人類(lèi)癌細(xì)胞的作用，當(dāng)CAPE的濃度為10μg/ml時(shí)完全抑制胸腺嘧啶脫氧核苷整合到乳腺癌細(xì)胞的DNA上，觀(guān)察到CAPE對(duì)黑色素瘤、結(jié)腸癌和腎癌細(xì)胞系的作用極為強(qiáng)烈，而對(duì)正常的成纖維細(xì)胞和黑色素細(xì)胞的作用很弱。Demestre等（2009）用富含CAPE的新西蘭蜂膠“Bio-30”水提液處理人多發(fā)性神經(jīng)纖維瘤1（小鼠外周神經(jīng)鞘瘤），結(jié)果發(fā)現(xiàn)該物質(zhì)可以完全抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。此外，Bio-30也可以引起人多發(fā)性神經(jīng)纖維瘤2（小鼠神經(jīng)鞘瘤）的完全衰退。然而，CAPE具有極差的生物學(xué)利用率及水溶性，使其很難應(yīng)用于臨床研究。而含有大量脂類(lèi)的Bio-30可以溶解CAPE，因此，可以利用這一特性更好地發(fā)揮CAPE的生物學(xué)活性。

4 蜂膠抑制血管生成作用

癌組織在快速增殖過(guò)程中需要充足的氧和營(yíng)養(yǎng)素的供應(yīng)，而機(jī)體內(nèi)的血管是運(yùn)輸這些物質(zhì)的主要載體。蜂膠及其活性成分在體內(nèi)外的抗血管生成作用已經(jīng)得以證實(shí)。Song等（2002）檢測(cè)了蜂膠醇、醚提取物及CAPE對(duì)雞胚尿囊膜和小牛肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的作用，結(jié)果顯示三者均可以抑制雞胚尿囊膜上血管的生成，同時(shí)也表現(xiàn)出對(duì)牛肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖的抑制活性。Ahn等（2007）通過(guò)研究巴西蜂膠醇提液處理的ICR小鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，發(fā)現(xiàn)巴西蜂膠醇提液可以明顯減少體外管腔實(shí)驗(yàn)中新形成血管的數(shù)量，并證實(shí)該作用主要是由失活的存活信號(hào)ERK 1/2誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡來(lái)調(diào)節(jié)的。隨后，他們又進(jìn)一步證實(shí)上述作用是由蜂膠中的ArtepillinC所介導(dǎo)完成的。

同時(shí)，Izut領(lǐng)導(dǎo)的另一團(tuán)隊(duì)也集中研究了蜂膠及其相關(guān)蜂產(chǎn)品對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)蜂王漿和中國(guó)紅蜂膠可以抑制該細(xì)胞的增殖和遷移；然而，蜂花粉和CAPE只是抑制了其增殖。它們抑制該細(xì)胞增殖的作用強(qiáng)度為：CAPE>中國(guó)紅蜂膠>蜂花粉>蜂王漿。目前，多個(gè)研究表明蜂膠中含有豐富的抗血管生成功效成分，如黃酮類(lèi)化合物的槲皮素、山萘素、高良姜素等；酚類(lèi)物質(zhì)中的Artepillin C；酯類(lèi)化合物中的CAPE、異戊二烯酯及其它化合物。它們之間的相互協(xié)調(diào)作用對(duì)蜂膠的抗血管生成作用具有一定的影響。

5 蜂膠調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境的作用

腫瘤微環(huán)境由基質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞和癌細(xì)胞所組成，這一微環(huán)境對(duì)腫瘤完整的生命循環(huán)是必不可少的，而蜂膠可以通過(guò)多種途徑調(diào)節(jié)該微環(huán)境從而起到抗癌的作用。Sze等（2006）在臨床上使用薩力多胺治療多發(fā)性骨髓瘤的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)該藥物可以干擾腫瘤微環(huán)境的共生。后來(lái)，F(xiàn)ung等（2009）在使用長(zhǎng)春新堿治療白血病的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)了此現(xiàn)象。此外，這兩種藥物還是強(qiáng)效的免疫調(diào)節(jié)劑和血管生成抑制劑。

Lee等（2008）在研究人肝癌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)蜂膠中的CAPE可以通過(guò)徹底終止MMP-2和MMP-9的表達(dá)，從而有效抑制肝癌細(xì)胞的粘附和入侵，并推測(cè)這一作用和NF-κB通路的抑制有關(guān)。2011年，來(lái)自日本的Hattori等人采用大量的實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè)了巴西綠蜂膠的多種化學(xué)成分，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其中的5種物質(zhì)可以顯著抑制HIF-1α蛋白以及HIF-1下游靶基因葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1、己糖激酶2以及VEGF-A（血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A）的表達(dá)。這一結(jié)果表明蜂膠能夠有效地調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境，同時(shí)，也證明通過(guò)現(xiàn)代科技與傳統(tǒng)中草藥結(jié)合的新方法來(lái)解決癌癥及其腫瘤微環(huán)境問(wèn)題是可行的。

6 蜂膠的抗癌輔助作用

目前，市面上的主流抗癌藥物均由人工合成的化學(xué)制劑混合而成，在治療過(guò)程中不可避免地會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生一些毒副作用。蜂膠中豐富的活性成分具有多種生物學(xué)功能，可用于輔助主流抗癌治療-化學(xué)療法及放射療法。蜂膠提取物在體內(nèi)對(duì)主流抗癌藥物的輔助及協(xié)同作用已經(jīng)應(yīng)用于鼠類(lèi)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?006年，Padmavathi等用蜂膠醇提物和紫杉醇處理經(jīng)DMBA（二甲基苯蒽）誘導(dǎo)的乳腺癌大鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與單獨(dú)使用蜂膠醇提物、紫杉醇及空白對(duì)照組相比，同時(shí)使用蜂膠醇提物和紫杉醇的處理組腫瘤質(zhì)量最輕。這一結(jié)果表明蜂膠可以對(duì)抗癌藥物起到協(xié)同作用。

除了能加強(qiáng)化療藥物的抗癌作用外，蜂膠還可以降低一些細(xì)胞毒素劑的毒性。Orsolic等（2009）在研究蜂膠提取物及相關(guān)的黃酮類(lèi)物質(zhì)對(duì)伊立替康引起的細(xì)胞毒性的作用中發(fā)現(xiàn)，水溶性克羅地亞蜂膠和巴西蜂膠提取物及相關(guān)的黃酮類(lèi)物質(zhì)可以降低EAT（艾氏腹水瘤）小鼠體內(nèi)伊立替康對(duì)正常血液、肝臟及腎臟細(xì)胞的毒性；同時(shí)，這些物質(zhì)對(duì)伊立替康誘導(dǎo)的艾氏腹水癌細(xì)胞的毒性無(wú)影響。蜂膠這種相似的保護(hù)作用在三苯氧胺誘導(dǎo)的大鼠肝臟毒性中也能表現(xiàn)出來(lái)。Albukhari等 （2009）在注入三苯氧胺前用CAPE預(yù)處理大鼠10天，結(jié)果顯示CAPE可以顯著抑制肝實(shí)質(zhì)酶的含量并能改善肝組織病理學(xué)變化，這一結(jié)果證實(shí)了蜂膠對(duì)抗癌藥物引起的細(xì)胞毒性的抑制作用。

200 5 年，Orsolic等在另一小鼠實(shí)驗(yàn)中通過(guò)靜脈灌注乳腺癌細(xì)胞研究其體內(nèi)的肺部轉(zhuǎn)移率，克羅地亞蜂膠和巴西蜂膠水提物單獨(dú)或與化學(xué)藥物表阿霉素一起經(jīng)腹腔或口服給藥，并配合使用放射療法。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與單獨(dú)使用表阿霉素或蜂膠相比，兩者結(jié)合給藥方式能顯著降低肺部轉(zhuǎn)移率。此外，用伽馬射線(xiàn)照射過(guò)的蜂膠處理組的小鼠壽命明顯長(zhǎng)于無(wú)蜂膠處理組的小鼠。

這些動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜑榉淠z將來(lái)用于預(yù)防癌癥的臨床試驗(yàn)提供了理論依據(jù)。事實(shí)上，蜂膠作為抗感染制劑的應(yīng)用已經(jīng)有了初步的臨床試驗(yàn)基礎(chǔ)。2006年，Iljazovic等用5%蜂膠提取物與蘆薈汁的混合液處理感染人乳頭瘤病毒的患者，結(jié)果發(fā)現(xiàn)3個(gè)月后有71.42%的患者癥狀消失，6個(gè)月的治愈率達(dá)到了100%。隨后，Coelho等（2007）研究了口服巴西蜂膠對(duì)幽門(mén)螺旋桿菌感染（可誘發(fā)胃癌）的治療效果，感染患者連續(xù)7天每天口服20滴巴西綠蜂膠醇提液。結(jié)果顯示，18位患者中9位的脲酶呼吸測(cè)試值（胃內(nèi)細(xì)菌含量的替代指標(biāo)）減少了20%。Zedan等也曾在2009年報(bào)道口服蜂膠可以有效治療扁平疣和普通疣，治愈率分別達(dá)到75%和73%。因此，蜂膠有效的抗感染作用有助于其更好地預(yù)防癌癥的發(fā)生。

7 結(jié)語(yǔ)

癌癥是全球范圍內(nèi)危害人類(lèi)健康的主要疾病，利用化學(xué)藥物或者蛋白質(zhì)藥物來(lái)治療癌癥也是當(dāng)前治療癌癥的主要手段，但大多數(shù)化療藥物在治療過(guò)程中會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生嚴(yán)重的毒副作用。從天然動(dòng)、植物中尋找毒性低、療效高的抗癌活性成分仍是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)之一。蜂膠作為一種富含多種生物學(xué)活性成分的天然產(chǎn)物，具有良好的防癌抗癌效果。此外，很多研究人員也嘗試從蜂膠中分離獲得結(jié)構(gòu)新穎、作用獨(dú)特的抗癌化合物，并將它們作為先導(dǎo)化合物用于新型抗癌藥物的開(kāi)發(fā)。

需要注意的是，目前蜂膠抗癌作用的研究多局限于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，缺少人體相應(yīng)的藥效、吸收、代謝及毒理方面的研究，離臨床上的實(shí)際應(yīng)用還有較長(zhǎng)的距離。未來(lái)需要在明確蜂膠抗癌作用機(jī)制的基礎(chǔ)上，結(jié)合蜂膠的單體或多種單體的配伍進(jìn)行更為系統(tǒng)的毒理和藥理實(shí)驗(yàn)，為合理評(píng)價(jià)蜂膠、蜂膠中單體成分的抗癌活性和藥用價(jià)值提供依據(jù)和參考。