周田田 連石 張海萍

·綜述·

單核巨噬細(xì)胞在梅毒免疫中的作用

周田田 連石 張海萍

梅毒是蒼白密螺旋體引起的一種慢性傳染病。目前認(rèn)為梅毒的表象和過程由遲發(fā)型超敏反應(yīng)(DHC)的水平?jīng)Q定,強(qiáng)烈的DHC與成熟硬下疳時(shí)期機(jī)體清除自身感染的微生物有關(guān),二期、三期梅毒中多種變化的癥狀是免疫反應(yīng)未能徹底清除微生物的表現(xiàn)[1]。在一期硬下疳及二期損害中浸潤(rùn)細(xì)胞主要為淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞,可有巨噬細(xì)胞,巨細(xì)胞罕見。晚期活動(dòng)性梅毒皮損內(nèi)有大量的細(xì)胞浸潤(rùn),有時(shí)有巨細(xì)胞。晚期心血管及中樞神經(jīng)系統(tǒng)梅毒有相似的細(xì)胞浸潤(rùn)[2]。淋巴器官組織病理表現(xiàn)為持續(xù)的淋巴樣組織增生,淋巴竇尤其是引流感染皮膚的區(qū)域充滿增大淡染的巨噬細(xì)胞[1]。巨噬細(xì)胞在梅毒的三期病變中都能觀察到,而其相關(guān)免疫學(xué)機(jī)制尚未完全闡明。研究者對(duì)巨噬細(xì)胞免疫學(xué)機(jī)制的了解正在逐步加深,對(duì)巨噬細(xì)胞在梅毒中的免疫學(xué)作用機(jī)制進(jìn)行概述。

一、血管對(duì)單核細(xì)胞黏附的增加

Riley等[3]研究了致病蒼白密螺旋體(Tp)激活培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的能力,研究表明,Tp誘發(fā)了細(xì)胞間黏附分子1(ICAM-1)和HUVEC表面促凝活性物質(zhì)的表達(dá)。從Tp中提取的47 000脂蛋白刺激HUVEC后,其ICAM-1的表達(dá)也提高了,提示螺旋體膜脂蛋白在內(nèi)皮細(xì)胞的激活中起到重要作用。Riley等[4]在2年后的研究中進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),HUVEC激活后對(duì)淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的黏附增加,這是單核細(xì)胞穿過血管內(nèi)皮,進(jìn)入組織分化為巨噬細(xì)胞,在局部引發(fā)梅毒早期免疫的第一步。

二、抗原對(duì)巨噬細(xì)胞的募集

Norgard等[5]報(bào)道了用合成的六脂肽作為天然密螺旋體脂蛋白的替代物激活免疫細(xì)胞。小鼠和兔皮下注射相當(dāng)于梅毒螺旋體Tp47 000脂蛋白誘發(fā)了劑量依賴性皮炎：最初主要是嗜中性(小鼠)和異嗜性(兔)細(xì)胞浸潤(rùn),繼而主要由單核細(xì)胞組成的浸潤(rùn)。2001年Sellati等擴(kuò)展了這一研究,他們?cè)诮】凳茉囌咂?nèi)注射相當(dāng)于梅毒螺旋體17 000和47 000脂蛋白N端的合成脂肽,檢測(cè)炎癥反應(yīng),通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)注射部位皮損皰液中的細(xì)胞分布。與外周血相比,皰液中單核巨噬細(xì)胞,皮膚淋巴細(xì)胞抗原陽性的記憶T細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞較豐富[6]。上述研究表明,在復(fù)雜的組織環(huán)境中脂肽有招募巨噬細(xì)胞的能力,因此梅毒的發(fā)病機(jī)制中,梅毒螺旋體的17 000和47 000的脂蛋白可能在招募巨噬細(xì)胞中發(fā)揮了作用。

三、抗原對(duì)巨噬細(xì)胞的免疫逃避機(jī)制

可以在一期硬下疳中發(fā)現(xiàn)大量Tp。Th1免疫反應(yīng)有利于巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的吞噬作用殺滅螺旋體,但是仍然有少數(shù)Tp逃避免疫清除。Tp的免疫逃避機(jī)制大體可歸結(jié)為：①致病梅毒螺旋體外層的囊樣物質(zhì)的屏障作用;②這種物質(zhì)和致病密螺旋體的其他一些生物學(xué)屬性可使其逃避巨噬細(xì)胞和其他吞噬細(xì)胞的吞噬;③不同種密螺旋體的抗原競(jìng)爭(zhēng)引發(fā)了部分耐受;④梅毒螺旋體感染可能造成宿主免疫抑制性物質(zhì)和可以抑制淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和其他細(xì)胞正常功能的物質(zhì)的產(chǎn)生[7]。

Lukehart等[8]檢測(cè)皮損消退的不同時(shí)期,其中Tp有對(duì)調(diào)理素作用的反應(yīng)和對(duì)體外巨噬細(xì)胞吞噬作用的易感性。研究提示,在大部分細(xì)菌被清除后仍持續(xù)存在的病原體對(duì)吞噬作用有抵抗力,梅毒螺旋體的某一亞群對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬的抵抗力可能導(dǎo)致了免疫逃避,但這一研究并無確切證據(jù)。Noss等[9]在Toll樣受體2(TLR-2)依賴的巨噬細(xì)胞MHC II類分子表達(dá)抑制研究中,證明梅毒螺旋體的脂肽合成物具有抑制巨噬細(xì)胞抗原提呈的作用,此作用可能與TLR-2依賴的巨噬細(xì)胞MHC II表達(dá)受抑制有關(guān)。Radolf等[10]在研究與轉(zhuǎn)錄相關(guān)的TP0262時(shí)發(fā)現(xiàn),Tp適當(dāng)?shù)恼w代謝過程的調(diào)節(jié)有利于逃避宿主的免疫。Weigel等[11]在研究Tp47 000主要脂蛋白免疫原的分子結(jié)構(gòu)時(shí)發(fā)現(xiàn),Tp的大多數(shù)結(jié)合蛋白類是錨定于胞質(zhì)膜的脂蛋白免疫原,外膜僅含有限的表面暴露跨膜蛋白。這一獨(dú)特的模型部分解釋了病原體很強(qiáng)的逃避宿主免疫防御的能力。Moore等[12]也支持這一觀點(diǎn),但與巨噬細(xì)胞的關(guān)系尚不明確。

四、巨噬細(xì)胞的活化途徑

1.TLR-2途徑：TLR-2是巨噬細(xì)胞表面的革蘭陽性菌肽聚糖和磷壁酸、某些細(xì)菌和支原體的脂蛋白和脂肽的受體,Lien等[13]發(fā)現(xiàn),表達(dá)TLR-2的細(xì)胞能被存活可動(dòng)的疏螺旋體刺激,提示天然的疏螺旋體感染與TLR-2對(duì)脂蛋白的識(shí)別相關(guān)。無TLR-2的中國(guó)倉鼠巨噬細(xì)胞對(duì)脂蛋白/脂肽刺激不敏感,證實(shí)了天然蛋白與配體結(jié)合在巨噬細(xì)胞激活中的作用。

2.CD14依賴的途徑：CD14是單核-巨噬細(xì)胞表面細(xì)菌脂多糖(LPS)的受體,能夠選擇性識(shí)別感染時(shí)血漿中形成的脂多糖結(jié)合蛋白(LPS-LBP)復(fù)合物,使位于同一巨噬細(xì)胞表面的TLR4接受LPS的刺激,導(dǎo)致單核-巨噬細(xì)胞活化,使其吞噬和殺菌能力增強(qiáng)。Sellati等[14]使用未分化的THP-1細(xì)胞轉(zhuǎn)染CD14及CD14缺陷BALB/c小鼠的腹腔巨噬細(xì)胞,觀察根據(jù)梅毒螺旋體47 000脂蛋白N端合成的脂肽刺激單核細(xì)胞活化時(shí)CD14的作用,發(fā)現(xiàn)鼠抗人CD14抗體可以阻斷47 000脂肽對(duì)成熟THP-1細(xì)胞的活化(劑量依賴性IL-8濃度的降低),證實(shí)了CD14依賴性信號(hào)途徑的存在。

五、Th1型細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞免疫學(xué)功能的影響

Leader等[15]用芝加哥系Tp感染兔睪丸,測(cè)定皮損中不同T淋巴細(xì)胞群的相對(duì)豐度、Th1/Th2相關(guān)細(xì)胞因子,發(fā)現(xiàn)感染達(dá)峰值時(shí)主要是CD4+T細(xì)胞,睪丸炎消退期間CD8+T細(xì)胞比例升高,IFN-γ和IL-10 mRNA的最高水平分別出現(xiàn)在第11天和18天,為抗梅毒螺旋體免疫反應(yīng)早期Th1占優(yōu)勢(shì)的假說提供了進(jìn)一步證據(jù)。Arroll等[16]在研究兔梅毒感染過程中,T細(xì)胞對(duì)一組Tp抗原應(yīng)答時(shí)發(fā)現(xiàn),試驗(yàn)誘導(dǎo)了IL-2和IFN-γ的表達(dá),而未檢測(cè)到IL-10 mRNA,表明梅毒感染中對(duì)Tp抗原的T細(xì)胞應(yīng)答偏向于Th1型。Van Voorhis等[17]使用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)13例一期和二期梅毒皮損中的細(xì)胞因子mRNA,發(fā)現(xiàn)一期和二期皮損中均含編碼IL-2,IFN-γ,IL-12p40和IL-10的mRNA,所有皮損中未檢測(cè)到編碼IL-4的信使,13例中10例未檢測(cè)到編碼IL-5或IL-13的mRNA,這些發(fā)現(xiàn)與Th1占主導(dǎo)的局部細(xì)胞反應(yīng)激活了巨噬細(xì)胞一致。

六、血清調(diào)理素對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬和殺傷病原體的影響

Baker-Zander等[18]檢測(cè)由VDRL抗原免疫誘導(dǎo)的兔血清、親和層析純化的兔VDRL抗體血清以及正常血清中巨噬細(xì)胞對(duì)Tp的攝取率,發(fā)現(xiàn)前兩種增強(qiáng)了對(duì)Tp的吞噬作用。研究指出盡管VDRL抗體有調(diào)理素功能,但不能促進(jìn)巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的殺螺旋體作用。Shaffer等[19]也認(rèn)為抗兔梅毒螺旋體的免疫球蛋白IgG促進(jìn)了巨噬細(xì)胞的吞噬作用,而未提及IgG是否有促進(jìn)巨噬細(xì)胞殺傷螺旋體的作用。

Baker-Zander等[20]曾將密螺旋體和巨噬細(xì)胞以1∶200的比例分別和加熱的10%免疫血清、正常血清共同孵育。孵育2～10 h后,在正常兔的多個(gè)部位皮下注射這些混合物,10 h后在與免疫血清共同孵育的混合物注射部位中,只有7%(1/14)的注射部位出現(xiàn)了皮損，而與正常血清共同孵育的混合物注射部位90%(9/10)出現(xiàn)了皮損(P＜0.001),認(rèn)為巨噬細(xì)胞對(duì)受調(diào)理素作用的密螺旋體的殺傷作用增強(qiáng)。

綜上所述,在梅毒的免疫反應(yīng)中,巨噬細(xì)胞從進(jìn)入組織中被激活到發(fā)揮免疫學(xué)作用都有其完整的分子學(xué)機(jī)制,與細(xì)胞免疫和抗體有錯(cuò)綜復(fù)雜的相互作用機(jī)制,目前對(duì)巨噬細(xì)胞的研究有兩個(gè)局限性,第一是實(shí)驗(yàn)大都停留在對(duì)動(dòng)物巨噬細(xì)胞的研究中,第二是研究方向雜亂,還未形成對(duì)巨噬細(xì)胞作用機(jī)制的系統(tǒng)性研究。對(duì)人巨噬細(xì)胞在梅毒免疫中的作用機(jī)制的研究將有重要意義。

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2013-08-12)

(本文編輯：吳曉初)

10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2014.05.023

100053北京,首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院皮膚科

連石,Email：drlianshi@sina.com