譚春瓊

（湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院質(zhì)控部，恩施445000）

糖尿病腎病（diabetic nephropthy，DN）是糖尿病常見的并發(fā)癥之一，也是糖尿病死亡的主要因素。目前尚無療效確切的西藥可延緩其病程的發(fā)展，因此，用中藥防治DN的研究備受人們關(guān)注。研究表明黃芪等中藥有防治DN的作用［1］。山藥為薯蕷科植物的塊莖，是我國(guó)傳統(tǒng)的藥食同源食物之一，又稱為淮山、大薯等，作為一味重要的中藥，其性甘溫，歸脾胃、肺經(jīng)，具有補(bǔ)中益氣、健脾止泄、聰耳明目、滋陰潤(rùn)燥的功效。山藥含脂肪酸、多糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、微量元素等化學(xué)成分，具有多種生物活性。山藥多糖（Yam polysaccharide，RDPS-Ⅰ）為其主要活性成分，主要由甘露糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖組成，現(xiàn)代研究表明山藥多糖具有調(diào)節(jié)免疫、抗衰老、抗腫瘤、降血糖等多種藥理作用［2，3］，但治療DN的作用報(bào)道甚少。湖北利川有“山藥之鄉(xiāng)”之稱，山藥資源十分豐富，富含硒、鍺等稀有微量元素。本實(shí)驗(yàn)通過復(fù)制糖尿病腎病大鼠模型進(jìn)行一系列實(shí)驗(yàn)，旨在為山藥治療DN的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要試劑和儀器

鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）購(gòu)于 Sigma公司；氫化可的松注射液購(gòu)于山西晉新雙鶴藥液有限公司；苯那普利（洛汀新）購(gòu)于北京諾華制藥有限公司。Beckman全自動(dòng)生化分析儀（湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院），TGL-16G高速臺(tái)式離心機(jī)（上海安亭儀器廠），DL-50型超級(jí)恒溫器，F(xiàn)-160型藥物粉碎機(jī)（北京市永光明醫(yī)療儀器廠），RE52-3旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海滬西分析儀器廠）。

1.2 山藥多糖的制備

山藥購(gòu)于利川團(tuán)堡鎮(zhèn)“山藥種植基地”，稱取新鮮山藥3 kg洗凈、去皮、搗碎成泥。按山藥與水1∶5的比例加水，煮沸3 h（在煮沸過程中不停地?cái)嚢瑁苑勒冲仯?，然后過濾，濾液為可溶性山藥多糖；將所得多糖蒸發(fā)濃縮即為粗山藥多糖；再加胰蛋白酶去蛋白、脫色即為較純山藥多糖，4℃低溫保存，備用。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組、造模及處理

純種SD大鼠，雌雄各半，體重220～250 g，由湖北民族學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。將40只SD大鼠隨機(jī)分為4組（n＝10）（雌雄各5只）：對(duì)照組、模型組、苯那普利組和山藥多糖組。采用STZ（50 mg／kg，一次腹腔注射）和氫化可的松制作糖尿病腎病大鼠模型。注射1周后，空腹血糖16.7 mmol／L以上的納入DN研究，連續(xù)3天檢測(cè)尿液尿白蛋白／尿肌酐均達(dá)到30～300 mg／g，視為造模成功，造模完成后每天定時(shí)灌胃：對(duì)照組和模型組給予蒸餾水（1 ml／kg）灌胃；苯那普利組給予苯那普利溶液（1.5 mg／kg）灌胃；山藥多糖組給予山藥多糖溶液（1 ml／kg）灌胃。實(shí)驗(yàn)第10周統(tǒng)一斷頭處死大鼠。在處死大鼠前用清潔的金屬代謝籠采集24 h尿液，在留尿期間禁食，常規(guī)飲水，先記錄尿量后取10 ml，3 500 r／min離心 10 min，取上清液于-40℃冰箱保存待測(cè)。稱量所有大鼠體重，然后采用腹腔內(nèi)注射戊巴比妥溶液（40 mg／k）麻醉，經(jīng)腹主動(dòng)脈采血10 ml，常溫下4 000 r／min離心10 min分離血清，于-40℃冰箱保存待測(cè)。取大鼠雙腎，以4℃生理鹽水洗凈，去腎臟被膜，用4℃生理鹽水沖洗腎血管4次。用微量電子天平稱量?jī)赡I重量。

1.4 血尿生化指標(biāo)的測(cè)定

血糖（blood glucose，GLU）、三酰甘油（serum triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白（high densi- ty lipoprotein cholesterol，HDL-C）、血肌酐（serum creatinine，Scr）、尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）采用Beckman全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，并計(jì)算內(nèi)生肌酐排泄率（endogenous creatinine excretion rate，Ccr），Ccr（ml／min）＝尿肌酐濃度（每分鐘尿量／血漿肌酐濃度）；微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）水平采用放射免疫法測(cè)定；24 h尿微量清蛋白排泄率（urinaryalbuminexcretionrates，UAER）＝尿清蛋白水平（mg／ml）／24 h尿量（ml）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 15.0軟件系統(tǒng)進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，配對(duì) t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 山藥多糖對(duì)DN大鼠腎重／體重、BS及血脂的影響

與對(duì)照組比較，模型組大鼠腎重／體重明顯增加，血糖（BS）、血脂增高（P＜0.01）；與模型組比較，山藥多糖及苯那普利組能明顯降低模型大鼠腎重／體重、血糖（BS）及血脂（P＜0.01，表 1）。

2.2 山藥多糖對(duì)DN大鼠腎功能的影響

與對(duì)照組比較，模型組大鼠 BUN、Scr、Ccr、UAER和β2-MG升高，出現(xiàn)明顯腎功能衰竭（P＜0.01），與模型組比較，山藥多糖及苯那普利組能逆轉(zhuǎn)上述指標(biāo)，明顯改善腎功能（P＜0.01，表 2）。

Tab.1 Effect of RDPS-Ⅰ on weight（Kidney）／weight（body）and GLU and blood fat of DN rats（，n＝10）

Tab.1 Effect of RDPS-Ⅰ on weight（Kidney）／weight（body）and GLU and blood fat of DN rats（，n＝10）

RDPS-Ⅰ：Yam polysaccharide；DN：Diabetic nephropthy；GLU：Blood glucose；TG：Serum triglyceride；TC：Total cholesterol；HDLC：High density lipoprotein cholesterol**P＜0.01 vs control group；＃＃P＜0.01 vs model group

Group Weight（Kidney／body mg／kg）GLU（mmol／L）TG（mmol／L）TC（mmol／L）HDL-C（mmol／L）Control 3.34±0.31 5.03±0.56 0.15±0.54 1.33±0.30 0.62±0.49 Model 6.52±0.55** 28.52±2.32** 1.23±0.14** 2.64±0.23** 0.45±0.08**Benazepril 4.83±0.25＃＃ 27.30±2.06＃＃ 1.14±0.14＃＃ 2.56±2.21＃＃ 0.55±0.11＃＃RDPS-Ⅰ 4.65±0.35＃＃ 13.13±2.73＃＃ 0.75±0.16＃＃ 1.67±0.23＃＃ 0.70±0.14＃＃

Tab.2 Effect of RDPS-Ⅰ on renalfunction of DN rats（，n＝10）

Tab.2 Effect of RDPS-Ⅰ on renalfunction of DN rats（，n＝10）

RDPS-Ⅰ：Yam polysaccharide；DN：Diabetic nephropthy；BUN：Blood urea nitrogen；Scr：Serum creatinine；Ccr：Endogenous creatinine excretion rate；UAER：Urinaryalbuminexcretionrates；β2-MG：β2-microglobulin**P＜0.01 vs control group；＃＃P＜0.01 vs model group

Group BUN（mmol／L）Scr（μmol／L）Ccr（ml／min）UAER（mg／24 h）β2-MG（μg／24 h ）Control 7.40±0.90 42.64±1.81 2.13±0.12 4.10±0.15 315.51±27.83 Model 13.61±2.66** 53.43±3.34** 3.92±0.12** 27.95±1.27** 3138.45±275.70**Benazepril 9.93±1.50＃＃ 43.33±1.91＃＃ 2.74±0.04＃＃ 12.78±1.49＃＃ 1787.24±228.52＃＃RDPS-Ⅰ 8.86±1.36＃＃ 42.36±2.50＃＃ 2.80±0.06＃＃ 12.40±1.64＃＃ 1675.08±185.67＃＃

3 討論

DN是糖尿病最常見的并發(fā)癥之一，約30%的糖尿病患者會(huì)發(fā)展為DN。其早期病理特點(diǎn)為腎小球肥大、腎小球和腎小管基底膜增厚以及系膜外基質(zhì)進(jìn)行性積聚；其后期為腎小球和腎小管纖維化，并最終導(dǎo)致蛋白尿和腎功能衰竭。DN的發(fā)病機(jī)理較為復(fù)雜，目前尚不完全明了。大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為：腎血流動(dòng)力學(xué)改變、糖代謝紊亂及由此所致的非酶糖基化、多元醇通路激活、血管活性物質(zhì)及細(xì)胞因子激活、氧化應(yīng)激、蛋白激酶C激活、腎病蛋白、脂代謝紊亂、遺傳等因素有關(guān)［4］。DN的治療采用一體化治療原則：降低血糖、控制血壓、糾正脂代謝紊亂、提高胰島素敏感性、盡量減少蛋白尿、改善腎功能以及積極治療其并發(fā)癥。雖然這些措施可以減緩蛋白尿的增加和腎功能減退，降低病死率，但DN的治療仍然是一個(gè)巨大的難題，更有效的治療措施和新藥的研發(fā)迫在眉睫。研究表明：黃芪、冬蟲夏草等中藥具有防止DN的作用［5］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：山藥多糖具有增加腎重／體重、降低血糖和血脂及減緩腎功能衰竭的作用?？赡軝C(jī)制為：通過降低血糖、改善脂代謝紊亂，改善微循環(huán)和增加腎供血量，減少脂質(zhì)在腎實(shí)質(zhì)和腎間質(zhì)的沉積以及微血栓的形成，達(dá)到改善腎功能，延緩病程的發(fā)展的目的。但其具體機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。

［1］ 閆凌云，楊叔禹，李學(xué)軍.黃芪多糖對(duì)糖尿病腎病防治機(jī)制的研究進(jìn)展［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2012，18（11）：1727-1729.

［2］ 全國(guó)中草藥匯編寫組.全國(guó)中草藥匯編，下冊(cè)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：135.

［3］ 李志強(qiáng)，曹文富.山藥及其主要活性成分藥理作用研究進(jìn)展［J］.中國(guó)老年學(xué)雜志，2013，33（8）：1975-1976.

［4］ 廖 鈺，夏 寧.糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2011，17（22）：3453-3455.

［5］ 張 穎，苗明三.糖尿病腎病動(dòng)物模型及中醫(yī)藥治療特點(diǎn)［J］.中醫(yī)學(xué)報(bào)，2011，26（3）：329-332.