■黃金華 梁珠民 寧國信 王士長

（1.廣西農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣西南寧530007；2.廣西桂寧種豬有限公司，廣西南寧530023；3.廣西大學(xué)，廣西南寧530005）

仔豬斷奶是養(yǎng)豬業(yè)中最為關(guān)鍵、最為重要的環(huán)節(jié)之一。斷奶仔豬于斷奶前后在飼料、飼養(yǎng)環(huán)境、管理等方面都發(fā)生了巨大變化，而此時(shí)仔豬的消化道生理環(huán)境還不能適應(yīng)這種變化。在斷奶仔豬的消化道內(nèi)，胃酸和消化酶分泌均不足，腸道絨毛萎縮和隱窩增生，尚未建立穩(wěn)定的微生態(tài)系統(tǒng)，因此，仔豬的消化吸收能力差，抵抗力低下，常常出現(xiàn)采食量和飼料利用率下降、生長速度減慢、腹瀉等不良現(xiàn)象[1]。為此，廣大學(xué)者和科技人員不斷尋找防止應(yīng)激、減少疾病、促進(jìn)仔豬健康生長的方法?？股卦?jīng)在這方面發(fā)揮重要作用，但是它的耐藥性和殘留性等負(fù)面影響促使人們尋找更安全、更綠色的方法。其中，飼喂微生態(tài)制劑是一種有效方法。微生態(tài)制劑是一類安全、無毒、無污染、無殘留的生物類飼料添加劑，具有提高仔豬生產(chǎn)性能、減少腹瀉、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、調(diào)節(jié)腸道菌群數(shù)量和維持腸道微生態(tài)平衡等功能，對(duì)仔豬腸道微生態(tài)的調(diào)節(jié)起著重要的作用[2]。因此，在斷奶仔豬飼糧中添加微生態(tài)制劑越來越受到人們的青睞。侯成立等（2011）[3]報(bào)道，植物乳桿菌制劑能夠提高斷奶仔豬的生長性能、減少仔豬糞便中的大腸桿菌數(shù)量、增加仔豬糞便中的乳酸菌數(shù)量。Giang等（2010）[4]研究發(fā)現(xiàn)，乳酸菌復(fù)合益生素能夠提高斷奶仔豬生長性能和免疫力。辛娜等（2011、2012）[5-6]報(bào)道，飼糧中添加由地衣芽孢桿菌和蠟樣芽孢桿菌等多種芽孢桿菌組成的芽孢桿菌制劑具有促進(jìn)仔豬生長，降低胃腸道 pH值，增加盲腸中揮發(fā)性脂肪酸的含量，促進(jìn)小腸形態(tài)發(fā)育，增強(qiáng)免疫器官指數(shù)的趨勢。董曉麗等（2013）[7]報(bào)道，飼糧中添加地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌復(fù)合菌制劑能降低斷奶仔豬糞便中大腸桿菌的數(shù)量，增強(qiáng)斷奶仔豬免疫力。李瑞等（2013a）[8]報(bào)道，飼糧中添加2 000 mg/kg由乳酸桿菌、芽孢桿菌和酵母菌組成的微生態(tài)制劑可提高生長豬的生長性能和養(yǎng)分消化率，減少糞中N、P排放和增強(qiáng)免疫力。

本試驗(yàn)通過研究飼糧中添加不同比例的由植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌、釀酒酵母組成的復(fù)合益生菌制劑對(duì)斷奶仔豬的生長性能、養(yǎng)分消化率和血清生化指標(biāo)的影響，確定該復(fù)合益生菌制劑在斷奶仔豬日糧中的最適添加量，為科學(xué)應(yīng)用該復(fù)合益生菌制劑提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所使用的復(fù)合益生菌制劑由植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌、釀酒酵母混合組成，活菌數(shù)達(dá)13.6×1010CFU/g。該復(fù)合益生菌制劑由廣西大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)教研室提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

選擇160頭體況良好、平均體重為（8.06±0.31）kg的（28±2）日齡杜×長×大斷奶仔豬，隨機(jī)分成4組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10頭（公、母各半）。圈養(yǎng)，每個(gè)重復(fù)為一欄。對(duì)照組飼喂不添加復(fù)合益生菌制劑的基礎(chǔ)飼糧，其為參照NRC（1998）生長育肥豬（5～20 kg）營養(yǎng)需要配制的玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧。基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)組飼喂在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.1%、0.2%、0.3%的復(fù)合益生菌制劑的試驗(yàn)飼糧。預(yù)試期7 d，正試期30 d。仔豬自由采食和飲水，按照正常免疫程序進(jìn)行免疫接種。同時(shí)保持欄舍通風(fēng)、衛(wèi)生、干燥。試驗(yàn)人員將復(fù)合益生菌制劑按照添加比例分別加入飼糧中，用自動(dòng)攪拌機(jī)拌勻投喂，并以欄為單位準(zhǔn)確記錄每天飼糧消耗量，仔細(xì)觀察并記錄試驗(yàn)豬的健康狀況。

1.3 檢測指標(biāo)

1.3.1 生長性能

在正式試驗(yàn)期第1 d和結(jié)束的次日清晨，對(duì)試驗(yàn)豬逐頭進(jìn)行空腹稱重，分別計(jì)算各組仔豬的平均日增重（g/d）、平均日采食量(g/d)、料重比等生長性能指標(biāo)，計(jì)算腹瀉率。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.3.2 養(yǎng)分消化率

養(yǎng)分消化率測定參照文獻(xiàn)[9]的方法，即全收糞法和酸不溶灰分法進(jìn)行。在飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束時(shí),從每個(gè)重復(fù)中選出1頭體重相近的豬,單獨(dú)飼養(yǎng)在代謝籠內(nèi)進(jìn)行為期7 d的消化試驗(yàn)。試驗(yàn)飼糧及分組與飼養(yǎng)試驗(yàn)相同，每頭豬的日喂料量按消化代謝試驗(yàn)開始時(shí)體重的3%供給,保證充足飲水。正式試驗(yàn)期內(nèi)每天準(zhǔn)確記錄每頭豬的采食量和排糞量,收集糞樣。收糞時(shí)間分別為 07：00 和16：00。

1.3.3 血清生化指標(biāo)

在試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天早上8：00，各重復(fù)組隨機(jī)選取公母各1頭健康、體況相近的仔豬，進(jìn)行前腔靜脈采血（10 ml/頭），放置30 min，3 500 r/min離心20 min,分離血清，放置在-20℃冰箱保存待測。樣品送往廣西醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)科測定總蛋白、白蛋白、球蛋白、白蛋白/球蛋白、IgG等血清生化指標(biāo)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理

對(duì)所得數(shù)據(jù)采用SPSS18.0軟件進(jìn)行單因子方差分析，P＜0.05為差異顯著。用Duncan's法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加不同比例的復(fù)合益生菌制劑對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響(見表2)

表2 添加不同比例的復(fù)合益生菌制劑對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響

從表2可以看出，飼糧中分別添加0.1%、0.2%、0.3%的復(fù)合益生菌制劑的仔豬的平均日采食量相互之間均無顯著差異(P＞0.05)，與對(duì)照組相比也無顯著差異(P＞0.05)；然而，三個(gè)試驗(yàn)組的仔豬的平均日增重均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，其中0.2%組最高，顯著高于0.1%組(P＜0.05)，但與0.3%組相比差異不顯著(P＞0.05)；三個(gè)試驗(yàn)組的仔豬的料重比和腹瀉率均顯著低于相應(yīng)的對(duì)照組(P＜0.05)，其中0.2%組最低，顯著低于0.1%組(P＜0.05)，但均與0.3%組相比差異不顯著(P＞0.05)。

2.2 添加不同比例的復(fù)合益生菌制劑對(duì)斷奶仔豬飼糧養(yǎng)分消化率的影響(見表3)

從表3可以看出，三個(gè)試驗(yàn)組的飼糧的總能、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗纖維消化率均顯著高于相應(yīng)的對(duì)照組(P＜0.05)，其中0.2%組最高，顯著高于0.1%組（P＜0.05），但與0.3%組相比差異不顯著（P＞0.05）。三個(gè)試驗(yàn)組的飼糧的灰分、鈣、磷的消化率均顯著高于相應(yīng)的對(duì)照組（P＜0.05），但三個(gè)試驗(yàn)組之間均無顯著差異（P＞0.05）。

斷奶仔豬飼糧養(yǎng)分消化率的影響(%)

表3 添加不同比例的復(fù)合益生菌制劑對(duì)

2.3 添加不同比例的復(fù)合益生菌制劑對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響(見表4)

表4 添加不同比例的復(fù)合益生菌制劑對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

從表4可以看出，三個(gè)試驗(yàn)組的仔豬的血清總蛋白、球蛋白、IgG含量均顯著高于相應(yīng)的對(duì)照組（P＜0.05），其中0.2%組最高，顯著高于0.1%組（P＜0.05），與0.3%組相比差異不顯著（P＞0.05）；三個(gè)試驗(yàn)組的仔豬的血清白蛋白/球蛋白比值顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），其中添加0.2%組最低，顯著低于0.1%組（P＜0.05），與0.3%組相比差異不顯著（P＞0.05）。然而，各組之間的白蛋白含量差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

在本試驗(yàn)條件下，添加不同比例的復(fù)合益生菌制劑顯著提高了斷奶仔豬的平均日增重，顯著降低了料重比和腹瀉率，表明由植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌、釀酒酵母組成的復(fù)合益生菌制劑具有提高斷奶仔豬抗病能力和生長性能的作用。這與以前的文獻(xiàn)報(bào)道相似。劉虎傳等（2012）[10]報(bào)道，在斷奶仔豬飼糧中添加由糞腸球菌、植物乳桿菌、枯草芽孢桿菌組成的益生菌制劑，顯著提高了斷奶仔豬日增重，顯著降低了料重比和腹瀉率。李麗等（2013）[11]報(bào)道，由地衣芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、低聚木糖和甘露寡糖等組成的合生素顯著提高斷奶仔豬日增重，明顯降低斷奶仔豬料重比和腹瀉率。劉輝等(2011)[12]研究發(fā)現(xiàn)，在斷奶仔豬飼糧中分別添加糞腸球菌和植物乳桿菌，均能顯著提高日增重，降低料重比和腹瀉率。然而，也有不同的報(bào)道。蔣治國等（2006）[13]報(bào)道，在斷奶仔豬飼糧中添加由植物乳桿菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌和蠟樣芽孢桿菌組成的益生素，對(duì)仔豬采食量、日增重、料重比無顯著影響，但顯著降低了仔豬腹瀉率。辛娜等(2011)[5]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加由地衣芽孢桿菌和蠟樣芽孢桿菌等多種芽孢桿菌組成的微生物菌劑，對(duì)斷奶仔豬生長性能無顯著影響。董曉麗等（2013）[7]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌復(fù)合菌制劑對(duì)斷奶仔豬生長性能無顯著影響。產(chǎn)生上述不同的原因，可能與菌種的種類、組成及其活菌數(shù)量、飼糧組成及其營養(yǎng)水平、斷奶仔豬的日齡和體重、飼養(yǎng)環(huán)境、管理水平等因素有關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)，添加不同比例的復(fù)合益生菌制劑均能顯著提高斷奶仔豬飼糧中的總能、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維、灰分、鈣、磷的消化率，揭示這種復(fù)合益生菌制劑具有協(xié)同提高飼糧養(yǎng)分消化率的作用。這可能是因?yàn)檫m宜的具有不同生物學(xué)特性的不同菌種混合，促進(jìn)動(dòng)物腸道迅速形成一個(gè)多菌種共生的復(fù)雜的微生物區(qū)系。這種微生物區(qū)系能夠產(chǎn)生優(yōu)勢互補(bǔ)疊加的作用，從而提高飼糧養(yǎng)分的消化率。在這種微生物區(qū)系中，乳酸菌能夠?qū)⑻妓衔镛D(zhuǎn)化為乳酸，降低飼料和動(dòng)物腸道中的pH值，激活動(dòng)物腸道中胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和總蛋白水解酶的活性[14]。而芽孢桿菌不但能夠降低動(dòng)物胃腸道pH值、促進(jìn)小腸形態(tài)發(fā)育[6]，而且能夠顯著提高斷奶仔豬體內(nèi)消化酶的活性[15]，促進(jìn)腸道內(nèi)有益菌的生長[16]，分泌多種消化酶，分解飼糧中的各種營養(yǎng)物質(zhì)[16-18]，為乳酸菌提供轉(zhuǎn)化基質(zhì)[19]。同時(shí)，酵母菌類具有發(fā)酵功能，可以幫助消化，刺激有益菌的生長，為機(jī)體提供豐富的蛋白質(zhì)；而且酵母菌很容易富集硒元素，可以補(bǔ)充硒元素，提高機(jī)體免疫力[2]。李瑞等（2013a）[8]報(bào)道，在斷奶仔豬飼糧中添加2 000 mg/kg由乳酸桿菌、芽孢桿菌和酵母菌組成的微生態(tài)制劑可提高總能、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維、無氮浸出物、灰分、鈣和磷的消化率。李麗等（2013）[11]報(bào)道，由地衣芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、低聚木糖和甘露寡糖等組成的合生素顯著提高斷奶仔豬飼糧中干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪和粗纖維的表觀利用率。周韻等（2011）[20]研究發(fā)現(xiàn)，在斷奶仔豬飼糧中添加2 000 mg/kg由枯草芽孢桿菌和乳酸桿菌組成的微生態(tài)制劑能夠顯著提高粗蛋白質(zhì)的消化率。

在本試驗(yàn)中，添加不同比例的復(fù)合益生菌制劑能顯著提高仔豬血清總蛋白、球蛋白和IgG含量，顯著降低白蛋白/球蛋白比值，表明復(fù)合益生菌制劑能夠顯著提高斷奶仔豬肝臟蛋白質(zhì)合成能力，顯著提高斷奶仔豬的免疫功能。血清總蛋白由血清白蛋白和球蛋白組成，其含量的高低主要反映動(dòng)物肝臟蛋白質(zhì)合成能力的強(qiáng)弱[3,21]。血清球蛋白含量、白蛋白/球蛋白比值和免疫球蛋白IgG含量都是反映動(dòng)物免疫水平的主要指標(biāo)。血清球蛋白主要由單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)產(chǎn)生，能與外來的特異性抗原起免疫反應(yīng)而保護(hù)機(jī)體[7]；白蛋白/球蛋白比值主要反映脾臟免疫功能狀況，其比值的下降說明機(jī)體提升了特異性免疫應(yīng)答水平，增強(qiáng)了抗病力[7]；血清IgG是血清中的主要免疫球蛋白，能夠阻止相應(yīng)抗原穿透黏膜進(jìn)入組織中[10]。董曉麗等（2013）[7]報(bào)道，飼糧中添加地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌復(fù)合菌制劑能夠提高斷奶仔豬血清球蛋白含量，降低血清白蛋白/球蛋白比值。李麗等（2013）[11]報(bào)道，由地衣芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、低聚木糖和甘露寡糖等組成的合生素顯著提高斷奶仔豬血清IgG的含量。張建梅等（2012）[22]報(bào)道，飼糧中添加由乳酸菌、芽孢桿菌、酵母鋅、酵母硒、維生素E、維生素C、葡萄糖組成的復(fù)合微生態(tài)制劑能夠提高斷奶仔豬的血清總蛋白和血清IgG的含量。王士長等（2006）[21]報(bào)道，植物乳桿菌能顯著提高斷奶仔豬血清總蛋白含量。

在本研究中同時(shí)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)復(fù)合益生菌制劑添加量為0.2%時(shí)，仔豬的平均日增重最高，飼糧中的總能、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維的消化率最高，血清總蛋白、球蛋白、IgG含量最高，且均顯著高于相應(yīng)的對(duì)照組和0.1%組；料重比、腹瀉率、白蛋白/球蛋白比值最低，均顯著低于相應(yīng)的對(duì)照組和0.1%組；但當(dāng)添加量提高到0.3%時(shí)，仔豬的平均日增重、飼糧中的總能、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維的消化率、血清中的總蛋白、球蛋白、IgG含量反而下降，料重比、腹瀉率、白蛋白/球蛋白比值反而升高，表明適量的復(fù)合益生菌制劑才能夠使斷奶仔豬的生長性能、養(yǎng)分消化率和免疫能力達(dá)到最佳的水平?？赡艿脑蚴牵扇樗峋脱挎邨U菌組成的復(fù)合益生菌制劑，當(dāng)以適量的添加量隨飼糧進(jìn)入仔豬腸道內(nèi)時(shí)，能夠促進(jìn)仔豬迅速建立有利于生長的新的菌群平衡；然而，當(dāng)過量外源微生物進(jìn)入腸道后，腸道微生物之間就會(huì)發(fā)生營養(yǎng)物質(zhì)和生態(tài)位點(diǎn)的爭奪，導(dǎo)致腸道微生物動(dòng)態(tài)平衡的破壞，從而造成仔豬的生產(chǎn)性能、養(yǎng)分消化率和免疫能力的下降[6]。尹清強(qiáng)等（2011）[23]研究也發(fā)現(xiàn)，微生態(tài)制劑添加劑量過大可能會(huì)擾亂微生物區(qū)系的平衡,達(dá)不到預(yù)期目的。

4 結(jié)論

添加不同比例的復(fù)合益生菌制劑均能夠顯著提高斷奶仔豬的生長性能、養(yǎng)分消化率和免疫能力，其中以0.2%為最適宜添加量。