司丙文，王 俊，張乃鋒，姜成鋼，樓 燦，陳丹丹，斯 琴，刁其玉，屠 焰

（1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，北京100081；2.北京市畜牧總站，北京100029；3.內(nèi)蒙古錫盟農(nóng)牧業(yè)科學(xué)研究所，內(nèi)蒙古錫林浩特026000）

養(yǎng)羊業(yè)是畜牧業(yè)的重要組成部分，我國(guó)肉羊存欄數(shù)在2.8 億只，年產(chǎn)羊肉約400×104t［1］。肉羊業(yè)生產(chǎn)區(qū)域正在由傳統(tǒng)牧區(qū)向農(nóng)區(qū)轉(zhuǎn)移，飼養(yǎng)方式逐步由放牧轉(zhuǎn)變?yōu)樯犸暫桶肷犸?、由分散飼養(yǎng)向相對(duì)集中飼養(yǎng)方式轉(zhuǎn)變，生產(chǎn)規(guī)模化程度不斷提高。養(yǎng)殖方式的轉(zhuǎn)變和效率的提高需要有相對(duì)應(yīng)的飼料營(yíng)養(yǎng)供給，特別是營(yíng)養(yǎng)素的平衡。在肉羊飼養(yǎng)和飼料供給方面，架子羊，成年羊育肥報(bào)道較多［2－4］，斷奶羔羊直線育肥的營(yíng)養(yǎng)需要參數(shù)報(bào)道不多，通常羔羊斷奶在120d左右，這個(gè)生理階段對(duì)于羔羊的生長(zhǎng)育肥和健康至關(guān)重要，羔羊面臨營(yíng)養(yǎng)素的獲取從液體飼料過(guò)度到固體飼料，成功過(guò)渡則育肥效果好，帶來(lái)可觀的效益，反之則導(dǎo)致羔羊生長(zhǎng)緩慢甚至死亡，生產(chǎn)實(shí)踐中羔羊的死亡多發(fā)生在這個(gè)階段。羔羊斷奶后的飼料稱之為“開食料”，開食料必須含有羔羊生長(zhǎng)發(fā)育的全部營(yíng)養(yǎng)素并且營(yíng)養(yǎng)素之間的比例合理，其中蛋白質(zhì)水平尤為重要，不同蛋白質(zhì)水平日糧可以對(duì)羔羊瘤胃內(nèi)環(huán)境及瘤胃內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化代謝產(chǎn)生重要的影響［5］。開食料的蛋白質(zhì)水平，不同的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)不一，并且大多數(shù)標(biāo)準(zhǔn)沒有給出具體的參數(shù)。針對(duì)中國(guó)農(nóng)區(qū)肉羊飼養(yǎng)發(fā)展趨勢(shì)，本試驗(yàn)通過(guò)飼喂不同粗蛋白質(zhì)水平日糧研究其對(duì)羔羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化代謝及瘤胃發(fā)酵的影響，揭示其對(duì)瘤胃內(nèi)環(huán)境變化的影響規(guī)律，為羔羊營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)提供蛋白質(zhì)需要參數(shù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選用日齡（120±0.39）d、體重（29.41±0.94）kg相近的杜泊（♂）×小尾寒羊（♀）雜交一代羔羊18只，隨機(jī)分成3 組（A、B、C），每組6 只，公母各半。3組羔羊飼喂代謝能水平（10.5 MJ／kg）相近、粗蛋白含量分別為10.4%、13.0%、15.7%的日糧，試驗(yàn)期60d。在試驗(yàn)結(jié)束前10d，將3個(gè)處理組18只羔羊置于代謝籠內(nèi)進(jìn)行消化代謝試驗(yàn)，試驗(yàn)日糧和飼喂方法與之前相同。預(yù)試期3d，正試期4d。

1.2 試驗(yàn)日糧與飼養(yǎng)管理

本試驗(yàn)采用以羊草為粗飼料的全混合日糧，營(yíng)養(yǎng)水平參照NRC（2007）及本實(shí)驗(yàn)室前期研究結(jié)果設(shè)計(jì)［6］，日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。日糧精粗比為50∶50（風(fēng)干基礎(chǔ)），制成直徑6mm 的顆粒飼料。飼養(yǎng)試驗(yàn)于2013年2月8日至2013年4月15日在北京市昌平區(qū)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院南口試驗(yàn)基地進(jìn)行。羔羊分圈飼養(yǎng)，所有羔羊采食相應(yīng)的顆粒料，日喂3次，時(shí)間為7∶30、12∶30和17∶30，自由采食和飲水。每日清晨飼喂前清掃每圈剩料，記錄剩料量。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of diets（DM basis）

1.3 樣品收集

1.3.1 飼料成分 試驗(yàn)正式開始后，每隔一周采集日糧樣品，混合均勻后－20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 糞樣及尿樣采集 消化代謝試驗(yàn)期間，每天采集每只羊的飼料樣本，精確記錄采食量和剩料量。采用全收糞尿法收集糞、尿，每天稱取并記錄每只羊排糞量，按10%取樣，將每只羊的糞樣混合冷凍保存（－20 ℃）；用盛有100mL、10%（v／v）H2SO4的塑料桶收集尿液，每天記錄尿液體積后，按10%比例取樣，將每只羊尿樣混合冷凍保存?zhèn)錅y(cè)。

1.3.3 瘤胃液采集 在試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天晨飼后2h，從每組隨機(jī)選取接近各組平均體重的4只羔羊，采用口腔導(dǎo)管采樣法抽取瘤胃液，用4層紗布過(guò)濾瘤胃內(nèi)容物，用PHS－3C 精密pH 計(jì)測(cè)定pH，然后分裝于2個(gè)50mL離心管，冷凍保存待測(cè)。

1.4 測(cè)定指標(biāo)和方法

試驗(yàn)開始前和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，試驗(yàn)羔羊空腹稱重，分別測(cè)定試驗(yàn)羊初始重和末重，計(jì)算各組羔羊平均日增重（ADG），并以重復(fù)為單位統(tǒng)計(jì)干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)采食量。

測(cè)定日糧、糞樣干物質(zhì)（DM）、有機(jī)物（OM）、總能（GE）、粗蛋白質(zhì)（CP）、中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF），計(jì)算DM、OM、GE、CP、NDF、ADF的表觀消化率（DMD、OMD、GED、CPD、NDFD、ADFD）和氮沉積率。

瘤胃液4℃解凍，取上清液1mL，加25%偏磷酸溶液0.3mL，震蕩3～5s混勻后，靜置30min，然后15000g離心15min后，將上清液分裝0.5mL。參照楊紅建等［7］方法測(cè)定瘤胃液中揮發(fā)性脂肪酸（VFA）濃度；氨態(tài)氮（NH3－N）濃度采用靛酚比色法［8］。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)采用SAS 9.2統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行ANOVA 分析，均值間差異顯著性用Duncan＇S法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧蛋白質(zhì)水平對(duì)羔羊采食量及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

由表2可知，隨日糧中蛋白質(zhì)水平增加，蛋白質(zhì)攝入量顯著增加（P＜0.05）；3個(gè)試驗(yàn)組羔羊干物質(zhì)采食量及日增重沒有顯著差異（P＞0.05）；羔羊?qū)Ω鞣N營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率隨蛋白質(zhì)水平的提高均呈增加的趨勢(shì)，A 組最低，C 組最高，其中C 組的OMD、GED 及氮沉積率顯著高于A 組（P＜0.05），與B組差異不顯著（P＞0.05）。C 組CPD 最高，3組之間差異顯著（P＜0.05）。

2.2 日糧蛋白質(zhì)水平對(duì)羔羊瘤胃pH 和氨態(tài)氮濃度的影響

由表3可以看出，隨著日糧蛋白質(zhì)水平的提高，羔羊瘤胃pH 也出現(xiàn)增加趨勢(shì)，C 組顯著高于A 組（P＜0.05），與B組差異不顯著（P＞0.05）；NH3－N濃度也出現(xiàn)類似的變化，C 組最高，三組之間差異顯著（P＜0.05）。

表2 日糧蛋白質(zhì)水平對(duì)羔羊生長(zhǎng)性能及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響Table 2 Effects of Rations with different crude protein levels on the Growth Performance and apparent digestibility in lambs

表3 日糧蛋白質(zhì)水平對(duì)羔羊瘤胃液pH 和NH3－N 影響Table 3 Effects of Rations with different protein levels on ruminal fluid pH value and NH3－N concentration in lambs

2.3 日糧蛋白質(zhì)水平對(duì)羔羊瘤胃VFA 濃度的影響

由表4可知，隨著日糧蛋白質(zhì)水平的增加，瘤胃總VFA濃度和丁酸摩爾比例呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)，A 組總VFA濃度顯著高于B、C組（P＜0.05），B、C組差異不顯著（P＞0.05）；C組丁酸摩爾比顯著低于A、B組（P＜0.05），A、B組差異不顯著（P＞0.05）；三組間乙酸、丙酸摩爾比及乙酸／丙酸無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

3 討論

3.1 日糧蛋白質(zhì)水平對(duì)生長(zhǎng)性能養(yǎng)分表觀消化率的影響

日糧中養(yǎng)分含量及其消化率可以影響反芻動(dòng)物瘤胃內(nèi)環(huán)境和微生物的作用及發(fā)酵效果，有研究表明，如果日糧中粗蛋白不能滿足動(dòng)物需要，適當(dāng)提高粗蛋白質(zhì)水平可使粗蛋白質(zhì)消化率提高；但如果粗蛋白水平滿足動(dòng)物需要，再增加粗蛋白，結(jié)果會(huì)造成動(dòng)物利用能力的下降，而將其排出體外并增加消化器官的負(fù)擔(dān)［9］。本試驗(yàn)中，羔羊?qū)Υ值鞍椎南孰S日糧粗蛋白水平升高而顯著升高，但C 組羔羊氮沉積率及日增重與B 組差異不顯著，表明C 組日糧中氮通過(guò)尿液排出較多，造成蛋白質(zhì)浪費(fèi)，這可能由于日糧能量蛋白比不合適，氮的利用率不高所致，也可能是C組日糧蛋白質(zhì)水平已超出羔羊利用能力，B組13.0%的粗蛋白質(zhì)水平可以滿足這個(gè)階段羔羊的需要。劉海斌［10］等研究顯示，隨日糧中蛋白水平的增加，絨山羊?qū)τ诘练e增加并且消化率也增加，與本試驗(yàn)結(jié)果基本一致，而Oldham［11］等認(rèn)為粗料型日糧中在一定的范圍內(nèi)，添加不同水平的蛋白質(zhì)飼料，并不會(huì)提高干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)和纖維的消化率，可能的原因是添加不同水平的蛋白質(zhì)并未改變流通速度與消化之間的動(dòng)態(tài)平衡，因而不會(huì)顯著影響其消化率。盡管3個(gè)處理組羔羊在試驗(yàn)期間的日增重差異不顯著，然而日糧蛋白質(zhì)為13.0%的B 組羔羊日增重最大，分別高出A 組和C 組10.68% 和7.34%。試驗(yàn)中飼喂蛋白質(zhì)含量為10%的日糧的羔羊日增重也在220g以上，表明這個(gè)生理階段的羊只適應(yīng)的蛋白質(zhì)水平范圍比較寬泛，非常值得在生產(chǎn)中應(yīng)用。在本試驗(yàn)中，日糧蛋白質(zhì)水平顯著提高了CP 采食量，對(duì)DMI沒有明顯影響。這也與趙智華等［12］研究結(jié)果相符。

一般認(rèn)為，粗蛋白采食量提高時(shí)，NH3－N 濃度升高，細(xì)菌和原蟲數(shù)量上升，隨著瘤胃NH3－N 濃度升高，pH 也隨之升高，較高pH 適宜于分解纖維素的微生物生長(zhǎng)繁殖，從而可提高纖維素表觀消化率［13］。本試驗(yàn)中，NDF 和ADF 表觀消化率也隨日糧蛋白質(zhì)水平的升高而升高，這種現(xiàn)象的原因可能是羔羊瘤胃內(nèi)可利用氮濃度的提高，促進(jìn)了微生物合成，使某些纖維分解菌數(shù)量增加，提高了NDF 和ADF表觀消化率。

表4 日糧蛋白質(zhì)水平對(duì)羔羊瘤胃VFA 比例的影響Table 4 Effects of TMRs with different protein levels on ruminal proportion of VFA in lambs

總體來(lái)看，隨日糧蛋白質(zhì)水平的提高，OMD、GED、CPD 顯著提高，DMD、NDFD、ADFD 差異不顯著。這與于玲玲［14］報(bào)道，隨蛋白水平的升高，干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維消化率都有升高的趨勢(shì)一致。主要原因是當(dāng)日糧粗蛋白水平升高時(shí)，瘤胃微生物數(shù)量增加、活性增強(qiáng)，提高了日糧中營(yíng)養(yǎng)成分的消化率。

3.2 日糧蛋白質(zhì)水平對(duì)羔羊瘤胃pH 和NH3－N的影響

瘤胃液pH 是一項(xiàng)反映瘤胃發(fā)酵水平的綜合指標(biāo)，它受日糧性質(zhì)、唾液分泌、瘤胃內(nèi)揮發(fā)性脂肪酸及其它有機(jī)酸的生成、吸收和排除的影響。在本試驗(yàn)中，3組試驗(yàn)羊瘤胃液pH 隨著飼糧中粗蛋白質(zhì)水平的升高而升高，這是由于蛋白質(zhì)降解產(chǎn)生較多的氨氮，導(dǎo)致pH 升高，也可能是由于低蛋白組玉米用量均高于高蛋白組，玉米是易發(fā)酵的碳水化合物，可溶性淀粉含量較多，發(fā)酵后產(chǎn)生的揮發(fā)性脂肪酸含量增加，使瘤胃液pH 相對(duì)偏低。有研究表明，提高日糧中蛋白水平可以線性提高瘤胃液pH［15］，這與本試驗(yàn)結(jié)果相同，3組試驗(yàn)羊瘤胃液pH 在6.70～6.99范圍內(nèi)變動(dòng)，均處于正常生理范圍內(nèi)（pH 5.5～7.5），說(shuō)明本試驗(yàn)設(shè)計(jì)的日糧蛋白質(zhì)水平不影響瘤胃正常的微生態(tài)環(huán)境。

瘤胃液中NH3－N 濃度可以反映日糧中可降解蛋白含量和微生物蛋白的合成情況。氨氮是食糜中蛋白氮和非蛋白氮的降解終產(chǎn)物，也是合成微生物蛋白的重要原料，瘤胃中適宜的氨氮濃度有利于微生物利用無(wú)機(jī)氮合成微生物蛋白。研究表明［16］，提高日糧中蛋白或可降解蛋白水平均可提高瘤胃中氨氮濃度，高蛋白C組羔羊瘤胃氨氮濃度最高，顯著高于其它2個(gè)組，這個(gè)現(xiàn)象與蛋白在瘤胃內(nèi)的降解規(guī)律及前人的相關(guān)報(bào)道項(xiàng)吻合。陳福財(cái)?shù)龋?7］在研究綿羊日糧中不同來(lái)源NDF 與粗蛋白組合對(duì)體外氨氮水平的影響中也得到了相似結(jié)論。從本試驗(yàn)結(jié)果顯示，蛋白質(zhì)水平高時(shí)產(chǎn)氨量也比較高，但氨氮濃度均處在微生物生長(zhǎng)的適宜范圍內(nèi)（6～30 mg／100mL），其變異主要與瘤胃內(nèi)微生物群能量和碳水化合物供給有關(guān)。

3.3 不同蛋白質(zhì)水平日糧對(duì)羔羊瘤胃VFA 濃度的影響

瘤胃是一個(gè)微生物種類與數(shù)量多、調(diào)控嚴(yán)密的巨大生物發(fā)酵罐。飼糧中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在瘤胃微生物作用下發(fā)酵分解。瘤胃微生物發(fā)酵淀粉、糖類物質(zhì)產(chǎn)生揮發(fā)性脂肪酸，主要包括乙酸、丙酸和丁酸，是反芻動(dòng)物重要的能源物質(zhì)，揮發(fā)性脂肪酸含量是瘤胃發(fā)酵的主要指標(biāo)之一，本試驗(yàn)中，隨日糧蛋白質(zhì)水平的提高，瘤胃總揮發(fā)性脂肪酸含量顯著降低，這可能是由于高蛋白質(zhì)組日糧中易發(fā)酵的碳水化合物量相對(duì)減少，發(fā)酵產(chǎn)生的VFA 減少，也可能因?yàn)榱鑫副诩?xì)胞對(duì)VFA 的吸收作用增強(qiáng)，從而降低了瘤胃總VFA、乙酸和丙酸的含量。揮發(fā)性脂肪酸中乙酸和丙酸的比例，即發(fā)酵類型，對(duì)動(dòng)物的生產(chǎn)性能產(chǎn)生重要的影響，日糧的精粗比對(duì)其比例影響很大，揮發(fā)性脂肪酸中乙酸比例隨日糧中精料比例的增高而下降，反之，丙酸比例隨精料比例的增高而升高，而本試驗(yàn)中日糧的精飼料與粗飼料之比（50∶50）在同一水平，所以造成乙酸／丙酸比沒有差異，也沒有改變其在瘤胃中的發(fā)酵類型。這與張英慧［5］的研究結(jié)果，提高日糧蛋白質(zhì)水平使乙酸濃度提高，乙酸／丙酸的值上升不太一致。

4 結(jié)論

斷奶羔羊日糧蛋白質(zhì)水平對(duì)有機(jī)物、總能、粗蛋白的表觀消化率有顯著影響，適宜的蛋白水平有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化代謝。隨日糧蛋白質(zhì)水平的提高，瘤胃總VFA 含量顯著降低，但乙酸／丙酸比沒有差異。綜合各項(xiàng)指標(biāo)，對(duì)于斷奶羔羊，日糧粗蛋水平以13.0%為宜。

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