馮 平，賀文強(qiáng)，屈 雷＊

（1.榆林學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，陜西榆林719000；2榆林學(xué)院／陜西省陜北白絨山羊工程技術(shù)研究中心，陜西榆林719000）

榆林市位于陜西省北部，位于東經(jīng)107°28′～111°15′，北緯36°57′～39°34′之間，地域東西長(zhǎng)385 km，南北寬約263km，總面積43 578km2。地貌大體以長(zhǎng)城為界，北部為風(fēng)沙草灘區(qū)，占總面積的42%，南部為黃土丘陵溝壑區(qū)，占總面積的58%。平均海拔1 000～1 500m。養(yǎng)兔業(yè)是榆林市傳統(tǒng)的特種養(yǎng)殖行業(yè)。榆林市養(yǎng)兔業(yè)由養(yǎng)殖皮兔和肉兔兩部分組成，近幾年發(fā)展較快的是肉兔產(chǎn)業(yè)［1］。華譽(yù)黑兔是以基地加公司發(fā)展起來的肉兔養(yǎng)殖，其全身呈黑色，頸部粗短、背毛濃厚。其肉具有高蛋白質(zhì)、高磷脂、高消化率，低膽固醇、低食用脂肪、低尿胺等特點(diǎn)。兔球蟲病是家兔中常見而危害嚴(yán)重的一種原蟲病，對(duì)養(yǎng)兔業(yè)危害極大，特別幼兔的感染率高，患病幼兔死亡率也較高，是影響家兔養(yǎng)殖的重要疾病。臨床特征為腹瀉、體重減輕、食欲減退等［2］。為了進(jìn)一步了解榆林市華譽(yù)黑兔球蟲感染情況，為華譽(yù)黑兔球蟲病的防控工作提供依據(jù)，筆者于2011年3月至5月對(duì)榆林市某養(yǎng)兔場(chǎng)華譽(yù)黑兔球蟲病的發(fā)病情況進(jìn)行了調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)試劑

飽和食鹽水溶液，2.5%的重鉻酸鉀溶液，生理鹽水。

1.2 樣品采集

采集某養(yǎng)兔場(chǎng)不同月齡健康狀態(tài)的華譽(yù)黑兔的糞便樣品，其中2月齡兔子糞便樣品10份，3月齡兔子糞便樣品11份，5月齡兔子糞便樣品3份，每份約15g～20g，分別裝于一次性塑料袋中，編號(hào)并記錄，置于4 ℃冰箱保存待檢。

1.3 測(cè)定方法

1.3.2 糞便陽性檢查 將糞便樣品置干凈的燒杯內(nèi)，加適量清水充分?jǐn)噭颍兴?，?jīng)過60目篩，濾液3 000r／min離心10min取沉淀，加飽和鹽水漂浮，2 000r／min離心10min，取上清液加4倍體積的清水，3 000r／min離心10min，沉淀即是收集的兔球蟲，置顯微鏡下觀察。

1.3.3 卵囊的培養(yǎng) 將從陽性糞樣中收集的球蟲卵囊混合放入大培養(yǎng)皿中，加入2.5%的重鉻酸鉀溶液，使其均勻混合。置于29℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（隨時(shí)添加2.5%重鉻酸鉀溶液，以防干涸），每5～6 h搖動(dòng)平皿1次，每隔5～6h吸出少許進(jìn)行鏡檢，確定卵囊的發(fā)育進(jìn)程。直到80%以上的球蟲卵囊孢子化。

1.3.4 卵囊的鑒定 根據(jù)有關(guān)資料［2－8］所描述的卵囊特征結(jié)合相關(guān)圖譜進(jìn)行種類鑒定。對(duì)孢子化的球蟲卵囊進(jìn)行觀察和測(cè)量，觀測(cè)的內(nèi)容包括卵囊的大小、形態(tài)、顏色、內(nèi)部構(gòu)造、卵膜孔的寬度及有無、有無內(nèi)外殘?bào)w、孢子囊的形態(tài)、斯氏體、極粒、形狀指數(shù)等，記錄各種卵囊的最早孢子化時(shí)間。

1.3.5 各種類兔球蟲感染比例 檢查各種類兔球蟲數(shù)量時(shí)，在卵囊孢子化后任意觀察孢子化的卵囊，記錄各種卵囊數(shù)量并計(jì)算各種卵囊在所檢出卵囊中所占的百分比。

2 結(jié)果與分析

2.1 各類球蟲形態(tài)特征

本次調(diào)查共檢獲8 種Eimeria 球蟲，各種球蟲卵囊的主要形態(tài)（圖1）描述如下。

2.1.1 斯氏艾美耳球蟲，卵囊橢圓形，淡黃色，大小為33.8～35.4×20.4～21.7μm，平均34.6×21.1 μm，卵形指數(shù)1.640，有卵膜孔，無外殘?bào)w，有內(nèi)殘?bào)w，有斯氏體，孢子囊呈卵圓形。孢子化時(shí)間72h。

2.1.2 兔艾美耳球蟲（E.oryctolagi），卵囊呈卵圓形，無色透明，大小為32.4～35.0×21.4～22.5 km，平均33.7×22.1km，卵形指數(shù)1.525，無卵膜孔，有外殘?bào)w，有內(nèi)殘?bào)w，有斯氏體，孢子囊呈卵圓形。孢子化時(shí)間50h。

2.1.3 大型艾美耳球蟲（EimeriamagnaPerard，1925），卵囊呈卵圓形，黃褐色，大小為33.1～37.8×21.5～24.6km，平均35.2×23.1km，卵形指數(shù)1.524，有卵膜孔，有外殘?bào)w，有內(nèi)殘?bào)w，無斯氏體，孢子囊為卵圓形。孢子化時(shí)間48～72h。

2.1.4 中型艾美耳球蟲（EimeriamediaKessel，1929），卵囊呈橢球形，橙黃色，大小為23.3～26.5×15.3～17.0μm，平均25.0×16.0μm，卵形指數(shù)1.563，有卵膜孔，有外殘?bào)w，有內(nèi)殘?bào)w，有斯氏體，孢子囊呈卵圓形。孢子化時(shí)間45～68h。

2.1.5 小型艾美耳球蟲（EimeriaexiguaYakimoff，1934），卵囊呈亞球形，無色透明，大小為14.2～18.7×11.9～16.9μm，平均16.8×13.1μm，卵形指數(shù)1.282，無卵膜孔，無外殘?bào)w，無內(nèi)殘?bào)w，無斯氏體，孢子囊呈卵圓形。孢子化時(shí)間為28h。

2.1.6 穿孔艾美耳球蟲（E.perfoansLeuckart，1978），卵囊呈卵圓形，黃褐色，大小為23.8～30.0×14.4～17.4μm，平均26.6×16.0μm，卵形指數(shù)1.663，無卵膜孔，有外殘?bào)w，有內(nèi)殘?bào)w，有斯氏體，孢子囊呈卵圓形。孢子化時(shí)間48h。

2.1.7 那格浦耳艾美耳球蟲（E.nagpurensisGill andRay，1961），卵囊呈筒形，淡藍(lán)色，大小為17.2～26.7×10.9～15.4μm，平均21.2×13.2μm，卵形指數(shù)1.606，無卵膜孔，無外殘?bào)w，有內(nèi)殘?bào)w，有斯氏體。孢子化時(shí)間48h。

2.1.8 野兔艾美耳球蟲（EimerialeporisNieschulz，1923），卵囊呈長(zhǎng)卵圓形，無色透明，大小為30.4～35.0×22.0～22.8μm，平均33.2×22.3 μm，卵形指數(shù)1.489，無卵膜孔，有外殘?bào)w，有內(nèi)殘?bào)w，有斯氏體，孢子囊呈橢圓形。孢子化時(shí)間44h。

2.2 華譽(yù)黑兔球蟲病感染情況

在調(diào)查的24只黑兔中有17只檢查到了球蟲的卵囊，球蟲總感染率為70.8%，各年齡段華譽(yù)黑兔兔球蟲感染具體情況見表1。從表1可以看出，2月齡的華譽(yù)黑兔球蟲感染率最高，5月齡的華譽(yù)黑兔未檢到球蟲卵囊，隨著年齡的增長(zhǎng)，球蟲的感染率呈明顯下降趨勢(shì)。

表1 不同月齡的華譽(yù)黑兔兔球蟲感染率Table 1 Mouth age Coccidian infection rate in Huayu black rabbits at different months age

2.3 各種類兔球蟲感染統(tǒng)計(jì)

鑒定感染球蟲種類8種，主要為那格浦爾艾美耳球蟲、大型艾美耳球蟲、微小艾美耳球蟲、穿孔艾美耳球蟲，所占比例分別為58.0%、14.7%、11.2%和7.0%（表2）。

3 討論

兔球蟲是屬于頂復(fù)亞門、孢子蟲綱、真球蟲目中的艾美耳科和隱孢科，均系細(xì)胞內(nèi)寄生的原蟲［2］。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，目前公認(rèn)的感染兔艾美耳球蟲有16種［8］。本次調(diào)查共發(fā)現(xiàn)8種兔艾美耳球蟲，卵囊的大小與有關(guān)文獻(xiàn)［2，7，9］所描述的基本一致。與文獻(xiàn)［3，10－11］相比，黑兔感染球蟲的種類較少，感染率較低，到5月齡時(shí)甚至在糞樣中未檢測(cè)到球蟲卵囊。且感染的球蟲的致病性較低，感染的致病性較強(qiáng)的球蟲不是優(yōu)勢(shì)種。在黑兔糞樣的采集過程中，筆者了解到在黑兔的飼養(yǎng)管理過程中，養(yǎng)殖場(chǎng)主應(yīng)用球蟲疫苗對(duì)兔場(chǎng)的球蟲病進(jìn)行了預(yù)防，養(yǎng)殖場(chǎng)的養(yǎng)殖環(huán)境也較干燥，這可能是該兔場(chǎng)球蟲的感染率較低的原因。除此以外，會(huì)不會(huì)是該黑兔種類本身對(duì)球蟲具有較強(qiáng)的抵抗力，有待進(jìn)一步證實(shí)。

表2 各種類兔球蟲感染情況Table 2 Infection status of each rabbit coccidia species

圖1 榆林市黑兔球蟲種類（孢子化卵囊）1.斯氏艾美耳球蟲；2.兔艾美耳球蟲；3.大型艾美耳球蟲；4.中型艾美耳球蟲；5.微小艾美耳球蟲；6.穿孔艾美耳球蟲；7.那格浦爾艾美耳球蟲；8.野兔艾美耳球蟲Fig.1 Species of black rabbit coccidiosis in Yulin（sporulated oocysts）1.Eimeria stiedai；2.E.oryctolagi；3.Eimeria magna Perard ；4.Eimeria mediaKessel；5.Eimeria exiguaYakimoff；6.E.perfoans Leuckart；7.E.nagpurensis；8.Eimeria leporisNieschulz

在家兔球蟲的種類中，致病性較強(qiáng)的球蟲主要有斯氏艾美耳球蟲、腸艾美耳球蟲、松林艾美耳球蟲和中型艾美耳球蟲，尤以斯氏艾美耳球蟲的致病性最強(qiáng)，其他種類的兔球蟲致病性較弱。本次調(diào)查中華譽(yù)黑兔兔球蟲優(yōu)勢(shì)種為那格浦爾艾美耳球蟲、大型艾美耳球蟲、微小艾美耳球蟲和穿孔艾美耳球蟲，均為致病性較弱的種類。其他四種球蟲的感染量?jī)H為9.1%，其中致病性強(qiáng)的斯氏艾美耳球蟲為1.4%。說明該兔場(chǎng)兔球蟲病的危害性較小。

為控制兔子球蟲病的發(fā)生，應(yīng)做好以下幾點(diǎn)工作：①改善飼養(yǎng)管理?xiàng)l件，以提高兔子的非特異性抵抗力。②在夏秋兩季可在飲水中按時(shí)按量投服抗球蟲藥物，如氯苯胍、地克珠利、磺胺二甲基嘧啶等，注意抗球蟲藥的輪換使用。③在藥物預(yù)防的同時(shí)，可應(yīng)用兔球蟲疫苗，對(duì)養(yǎng)兔場(chǎng)的球蟲病進(jìn)行預(yù)防。

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