潘玉香

山東省商河縣人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，山東濟(jì)南 251600

子宮內(nèi)膜異位癥是臨床上常見的婦科疾病，由于其病變累及廣泛，可引起盆腔粘連，使輸卵管的受孕功能遭到干擾，導(dǎo)致不孕，并且研究顯示[1-2]，其在育齡婦女中的患病率可高達(dá)15%～20%，使其成為國內(nèi)外基礎(chǔ)及臨床研究的熱點之一。近年來，隨著對其致病機制基礎(chǔ)研究的不斷深人發(fā)現(xiàn)許多細(xì)胞因子在Ems的發(fā)生、發(fā)展中可能起著重要作用，而RANTES作為人單核巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的選擇性趨化因子，研究顯示[3-4]，其能夠募集巨噬細(xì)胞至Ems病灶部位，但是臨床上對于RANTES與Ems局部免疫異常的關(guān)系鮮有報道。本文以34例子宮內(nèi)膜異位癥的34例患者和40例非子宮內(nèi)膜異位癥且盆腔結(jié)構(gòu)正常的患者為研究對象，探討子宮內(nèi)膜異位癥患者血清、腹腔液、在位/異位內(nèi)膜組織中RANTES的表達(dá)及意義，為臨床上子宮內(nèi)膜異位癥的治療提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院2011年10月—2013年10月接收的行腹腔鏡手術(shù)、經(jīng)腹腔鏡及病理確診為子宮內(nèi)膜異位癥的34例患者為觀察組；年齡24～47歲，平均年齡(32.3±5.2)歲。根據(jù)美國生殖協(xié)會(AFS)修訂的分期標(biāo)準(zhǔn)(rASRM)進(jìn)行分期，其中Ⅰ期9例；Ⅱ期8例；Ⅲ期11例；Ⅳ期6例。月經(jīng)卵泡期19例；月經(jīng)黃體期15例。同期因其他原因行腹腔鏡手術(shù)的、非子宮內(nèi)膜異位癥且盆腔結(jié)構(gòu)正常的40例患者為對照組，年齡25～46歲，平均年齡(32.9±4.8)歲。月經(jīng)卵泡期23例；月經(jīng)黃體期17例。兩組均排除內(nèi)分泌和感染性疾病、術(shù)前有激素治療史的患者，且兩組患者在年齡、月經(jīng)分期等一般資料方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），具有可比性。

1.2 方法

采集靜脈血檢測血清RANTES，腹腔積液于腹腔鏡術(shù)中從患者腹腔內(nèi)抽取，通過手術(shù)獲取患者在位/異位內(nèi)膜組織。

1.2.1 標(biāo)本采集 ①血液：所有患者均于手術(shù)當(dāng)天采取肘靜脈血2 mL；注入試管待凝固后，4℃3000r/min離心；取血清，-80℃冰箱存儲待測。

②腹腔液：觀察組患者在月經(jīng)干凈后3～7d內(nèi)接受腹腔鏡手術(shù)；對照組在非月經(jīng)期內(nèi)接受腹腔鏡手術(shù)。術(shù)中收集兩組患者腹腔液3～5 mL；置于無菌離心管中；4℃3000r/min離心取上清液；-80℃冰箱存儲待測。

③異位內(nèi)膜：手術(shù)室嚴(yán)格無菌操作下取2cm*3cm大小的卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫囊壁、腹膜內(nèi)異癥病灶或深部病變結(jié)節(jié)等異位內(nèi)膜；置入PBS液內(nèi)反復(fù)洗滌后，置于-170℃液氮罐中保存速冷；用組織勻漿液以2500r/min離心15 min，取上清液；-80℃冰箱存儲待測。

④在位、正常內(nèi)膜：手術(shù)前診刮術(shù)或全子宮切除獲取在位/正常內(nèi)膜；置入PBS液內(nèi)反復(fù)洗滌后，置于-170℃液氮罐中保存速冷；用組織勻漿液以2500r/min離心15 min，取上清液；-80℃冰箱存儲待測。

1.2.2 檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附方法(ELISA)檢測兩組患者以及觀察組不同分期患者之間血清、腹腔液、在位/異位內(nèi)膜組織中RANTES的表達(dá)。酶標(biāo)儀為深圳霄杜生命科學(xué)有效公司RT-6100酶標(biāo)儀，試劑盒為上海達(dá)為科生物科技有限公司酶聯(lián)免疫試劑盒ELISA Kit（各項操作嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行，批內(nèi)變異<6.0%）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)均以SPSS 17.0進(jìn)行分析；計數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，行Fisher檢驗；計量資料以表示，行t檢驗；以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血清、腹腔液中RANTES的表達(dá)水平比較

觀察組血清RANTES顯著高于對照組(t1=37.84，P1=0.000)，觀察組腹腔液中RANTES的表達(dá)量顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t2=26.13，P2=0.000），且Ⅲ、Ⅳ期分期子宮內(nèi)膜異位癥患者的血清、腹腔液RANTES的表達(dá)量均顯著高于Ⅰ、Ⅱ期，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 兩組患者血清、腹腔液中RANTES的表達(dá)水平比較[±s，ρ/(ng·L-1)]

表1 兩組患者血清、腹腔液中RANTES的表達(dá)水平比較[±s，ρ/(ng·L-1)]

組別 例數(shù) 血清 腹腔液對照組觀察組40 34ⅠⅡⅢⅣ9 8 1 1 6 557.6±102.9 671.3±125.7 639.1±109.4 576.4±115.8 740.2±108.6 691.3±123.1 11.6±3.2 20.4±2.9 13.1±3.7 17.5±2.6 19.8±3.1 25.6±3.0

2.2 正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜中RANTES的表達(dá)水平比較

正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜中RANTES的表達(dá)水平比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=11.25，P=0.003），其中異位內(nèi)膜、在位內(nèi)膜顯著高于正常內(nèi)膜（P<0.05）。輕度(Ⅰ～Ⅱ)子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜中RANTES的表達(dá)水平顯著低于重度患者(Ⅲ～Ⅳ)，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（t1=8.65，P1=0.009；t2=9.22，P2=0.007）。見表2。

表2 正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜中RANTES的表達(dá)水平比較[±s,ng·g-1]

表2 正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜中RANTES的表達(dá)水平比較[±s,ng·g-1]

組別 例數(shù)RANTES正常內(nèi)膜在位內(nèi)膜Ⅰ～ⅡⅢ～Ⅳ異位內(nèi)膜Ⅰ～ⅡⅢ～Ⅳ40 34 17 17 34 17 17 2.67±0.43 3.71±0.50 3.09±0.37 4.26±0.48 6.64±0.59 6.13±0.44 7.49±0.61

3 討論

本研究結(jié)果表明，子宮內(nèi)膜異位癥患者血清、腹腔液中RANTES的表達(dá)量顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），提示RANTES在全身及局部都參與了Ems的發(fā)生，且不同分期子宮內(nèi)膜異位癥患者的RANTES的表達(dá)量差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），其中Ⅲ、Ⅳ期顯著高于Ⅰ、Ⅱ期（P<0.05）說明RANTES的表達(dá)促進(jìn)了Ems的發(fā)生，考慮是由于其促進(jìn)中性粒細(xì)胞附壁及促進(jìn)其從毛細(xì)血管和微靜脈中滲出，并且活化并趨化中性粒細(xì)胞到達(dá)病灶，形成子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔微環(huán)境中的細(xì)胞因子，構(gòu)成多重調(diào)節(jié)作用和免疫疊加作用，形成復(fù)雜的細(xì)胞因子級聯(lián)效應(yīng)。研究中還發(fā)現(xiàn)，正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜中RANTES的表達(dá)水平比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），其中異位內(nèi)膜、在位內(nèi)膜顯著高于正常內(nèi)膜（P<0.05），從RANTES表達(dá)這一角度佐證了具有內(nèi)在差異的在位內(nèi)膜是子宮內(nèi)膜異位癥形成中的決定因素，為治療子宮內(nèi)膜異位癥開辟一條新途徑[5-6]。另外，輕度(Ⅰ～Ⅱ)子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜中RANTES的表達(dá)水平顯著低于重度患者(Ⅲ～Ⅳ)，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），進(jìn)一步證實了RANTES在EMs的發(fā)病環(huán)節(jié)中可能具有重要意義，考慮是由于局部病灶RANTES的增多可募集大量的炎性細(xì)胞進(jìn)入病灶，促進(jìn)其降解細(xì)胞外基質(zhì)，并直接促進(jìn)異位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞的增生，有利于異位內(nèi)膜的維持和進(jìn)一步發(fā)展。

綜上所述，子宮內(nèi)膜異位癥患者血清、腹腔液、異位內(nèi)膜、在位內(nèi)膜中RANTES的表達(dá)量顯著高于非子宮內(nèi)膜異位癥患者，且其表達(dá)量與臨床分期有關(guān)，表示RANTES可能參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生和發(fā)展。

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