陸紅佳，陳朝軍，鄭龍輝，蘇昕峰，劉 雄*

（西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，重慶 400715）

辣椒素劑量對去勢雌性大鼠血脂、肝脂及盲腸內(nèi)環(huán)境的影響

陸紅佳，陳朝軍，鄭龍輝，蘇昕峰，劉 雄*

（西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，重慶 400715）

目的：探討辣椒素劑量對去勢雌性大鼠血脂、肝脂及盲腸內(nèi)環(huán)境的影響。方法：選用30只雌性SD大鼠隨機(jī)分組為5組，其中1組大鼠進(jìn)行偽切除手術(shù)作對照（偽切除組），另外4組大鼠做雙側(cè)卵巢切除手術(shù)，基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)恢復(fù)1周后，分為不灌胃辣椒素（空白組）和灌胃5.0、10.0、15.0 mg/（kg·d）辣椒素劑量組（低、中、高劑量組）。喂食相同基礎(chǔ) 飼料28 d后解剖，測定大鼠血清和肝臟中膽固醇、甘油三酯含量及盲腸面積，盲腸內(nèi)容物水分含量、pH值、短鏈脂肪酸 和微生物等指標(biāo)。結(jié)果：空白組大鼠的體質(zhì)量、采食量、血 脂、肝臟總脂肪、總膽固醇、甘油三酯總含量均顯著高于偽切除組。辣椒素可降低雙側(cè)卵巢切除大鼠的體質(zhì)量 增加量、血清和肝臟中膽固醇和甘油三酯含量，且具有明顯的劑量關(guān)系；同時(shí)可以降低盲腸組織總質(zhì)量、盲腸體質(zhì)量比、盲腸內(nèi)容物短鏈脂肪酸含量，顯著降低盲腸內(nèi)容物有益菌數(shù)量（P＜0.05）；辣椒素可以顯著升高游離氨含量和pH值，增加有害菌數(shù)量（P＜0.05），但辣椒素各劑量組之間沒有顯著性差異。結(jié)論：辣椒素對因雌激素缺乏引起高脂血癥雌性大鼠具有較好的降血脂、降肝脂作用，但對盲腸內(nèi)環(huán)境具有一定的損傷作用。

辣椒素；卵巢切除大鼠；血脂；肝脂；盲腸內(nèi)環(huán)境

婦女進(jìn)入更年期后，由于卵巢機(jī)能衰退，雌激素分泌量不足，導(dǎo)致內(nèi)分泌失調(diào)，引起脂質(zhì)代謝紊亂，從而誘發(fā)高脂血癥[1-2]。臨床發(fā)現(xiàn)，更年期綜合征出現(xiàn)時(shí)，由于植物神經(jīng)系統(tǒng)紊亂，容易出現(xiàn)腸易激 綜合征、結(jié)腸炎等腸道疾病。有研究發(fā)現(xiàn)[3]雌激素與腸易激綜合征呈正相關(guān)，雌激素可能是大鼠內(nèi)臟高敏感性形成的重要激素之一?，F(xiàn)在主要的治療辦法是服用激素類藥物，效果明顯但副作用大，容易引起子宮內(nèi)膜癌[4-5]。大量科學(xué)研究證實(shí)，通過合理膳食能夠顯著降低血脂，預(yù)防由于雌激素缺乏導(dǎo)致的高脂血癥疾病的發(fā)生[6-7]。

辣椒素作為辣椒的主要辛辣成分，是一種含香草酰胺的生物堿，作為食品辣味劑，同時(shí)也有作為藥物使用的[8]。辣椒素因其獨(dú)特的理化性質(zhì)具備降血脂和降膽固醇的生理學(xué)功能[9-11]。有研究表明[12]，辣椒素能明顯降低血漿和肝臟中甘油三酯的濃度；也有研究表明[13]，辣椒素對于大鼠血脂、肝脂具有明顯的降低效果，但對腸道內(nèi)環(huán)境有一定的損傷作用。卵巢切除大鼠因雌激素的缺乏會(huì)表現(xiàn)出血脂、肝脂的升高，容易形成高脂血癥，同時(shí)出現(xiàn)腸易激綜合癥、結(jié)腸炎等腸道疾病，其腸道變得比較敏感[14]。本實(shí)驗(yàn)主要通過雌性大 鼠雙側(cè)卵巢切除手術(shù)，模擬建立更年期模型實(shí)驗(yàn)，研究辣椒素對卵巢切除大鼠血脂、肝脂和盲腸內(nèi)環(huán)境的影響。以期為研究辣椒素對由于雌激素缺乏導(dǎo)致的高脂血癥及腸易激癥大鼠的作用效果提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料、動(dòng)物與試劑

天然辣椒素 （辣椒堿含量為95.7%），由河南倍特生物科技有限公司提供。

成年雌性SD大鼠（體質(zhì)量約120～140 g，4周齡）、基礎(chǔ)飼料，由重慶滕鑫比爾實(shí)驗(yàn)動(dòng)物銷售有限公司提供，動(dòng)物許可證號：SCXK（渝）2007-0008。

大豆油 市售；總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（ low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C） 上海北海生物技術(shù)工程有限公司；其他均為生化試劑或分析純試劑。

1.2 方法

1.2.1 辣椒素溶液的配制

分別稱取209.0、418.0、627.0 mg辣椒素（辣椒總堿含量95.7%）溶于400 mL食用大豆油中，100%功率超聲波超聲30 min使辣椒素溶解，配制成不同質(zhì)量濃度的辣椒素溶液。按照1 mL/100 g大鼠體質(zhì)量進(jìn)行灌喂，偽切除組和卵巢切除空白組均灌胃食用大豆油。

1.2.2 動(dòng)物飼養(yǎng)

體質(zhì)量為120～140 g的4周齡SD雌性大鼠30只，每只單籠飼養(yǎng)在不銹鋼大鼠籠中，室溫（25±1）℃，12 h明暗輪換（8∶00—20∶00）。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，按大鼠體質(zhì)量隨機(jī)分為5組，腹部注射戊巴比妥鈉（無菌生理鹽水配制0.3%溶液，注射量1 mL/100 g，以大鼠體質(zhì)量計(jì)）使其麻醉，任選一組進(jìn)行偽切除手術(shù)（偽切除組，灌胃同等劑量的大豆油），其余4組進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除手術(shù)。手術(shù)后進(jìn)行1周的恢復(fù)。將雙側(cè)卵巢切除大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為4組，分別為空白組（灌胃同等劑量的大豆油）、灌胃5.0、10.0、15.0 mg/（kg·d）辣椒素（低、中、高）劑量組，所有實(shí)驗(yàn)大鼠自由飲水和采食，每3 d稱量大鼠體質(zhì)量以調(diào)整灌喂量，每天記錄大鼠采食量，實(shí)驗(yàn)周期為6周。

1.2.3 樣品收集

實(shí)驗(yàn)期最后1 d斷糧12 h，19∶00—21∶00乙醚麻醉后。大鼠斷頭從頸部取血，血液收集在有抗凝劑的采血管中，在4 000 r/min、4 ℃條件下離心15 min[15]，將分離出的血清液分裝在1.5 mL離心管中并儲(chǔ)存在－20 ℃冰箱里待分析。

收集完血液后，肝臟經(jīng)冰冷的生理鹽水灌流1 min后摘除，在冰冷的生理鹽水中吸取表面的水后用吸濕紙除去表面水滴稱總質(zhì)量并記錄數(shù)據(jù)；取1 g（精確到0.01 g）肝臟，用鋁箔紙包好裝入樣品袋，放入－20 ℃冰箱保存待用。

取出盲腸組織，稱質(zhì)量。將盲腸組織縱向剪開，稱取0.2 g左右盲腸內(nèi)容物，加入10倍去離子水，旋渦混合儀上混勻，電子pH計(jì)測其pH值；稱取0.5 g左右盲腸內(nèi)容物放入超純水處理過的10 mL離心管中，立即加入2 mL含有5 mmol/L巴豆酸的10 mmol/L氫氧化鈉溶液，充分混勻后冷藏用于短鏈脂肪酸檢測。稱取0.3 g左右盲腸內(nèi)容物放入預(yù)先恒質(zhì)量的鋁盒中，105 ℃條件下恒質(zhì)量測其水分含量。稱取0.3 g左右盲腸內(nèi)容物，加入10倍無氨水，－20 ℃冷凍待測游離氨。剩余盲腸內(nèi)容物收集于10 mL離心管中，－80 ℃冷凍保存用于微生物的檢測。

1.3 指標(biāo)檢測

1.3.1 飼料效率測定

稱量小鼠體質(zhì)量和采食量后按以式（1）計(jì)算。

1.3.2 血脂檢測

TC、TG、HDL-C和LDL-C用試劑盒檢測，用全自動(dòng)生化分析儀測定。

1.3.3 肝脂檢測

肝臟中總脂質(zhì)含量用Folch方法[16]抽提出脂肪后測質(zhì)量比。同時(shí)用此抽提液測肝中TC和TG。首先準(zhǔn)確稱約 500 mg的肝組織放入組織搗碎機(jī)中，加入氯仿與甲醇體積比為2∶1的混合溶劑，在冰冷條件下高速攪碎，抽提液經(jīng)濾紙過濾收集到25 mL刻度試管中，濾渣用同樣的混合有機(jī)溶劑沖洗2～3次，然后將濾液加同樣的混合有機(jī)溶劑定容到25 mL，充分混勻后，移出5 mL提取液到另一試管中用于TC和TG檢測。在余下的20 mL中加入4 mL質(zhì)量濃度為0.37 g/100 mL的KCl溶液，混勻后靜置24 h以上讓其分層。吸出上層液，用V(氯仿)∶V(甲醇)∶V(水)=3∶48∶37的混合溶劑洗下層液面2～3次，然后將下層提取液移入已干燥至恒質(zhì)量的小燒杯中，加熱除去有機(jī)溶劑后，在105℃條件下干燥至質(zhì)量恒定，用質(zhì)量量差法得出總脂含量。肝臟中TC和TG含量檢測用酶法，用試劑盒檢測。

1.3.4 盲腸壁表面積測定[17]

用生理鹽水洗凈盲腸，展開后固定在劃有標(biāo)準(zhǔn)刻度線白色塑料板上，用數(shù)碼相機(jī)拍攝展開的盲腸，將盲腸照片用打印紙打印，然后將紙上的盲腸輪廓圖剪下，測出照片上的1 cm刻度線的長度（L，cm），用精度為0.000 1 g的電子精確稱量輪廓圖紙質(zhì)量（m1，g）和1 cm2的紙質(zhì)量（m2，g），然后按式（2）計(jì)算出盲腸表面積。

1.3.5 盲腸內(nèi)容物含水量測定

稱取一定質(zhì)量的盲腸內(nèi)容物，放入預(yù)恒質(zhì)量鋁盒中，105 ℃使質(zhì)量恒定，測其含水量。

式中：m為盲腸內(nèi)容物干質(zhì)量/g；m1為盲腸內(nèi)容物濕質(zhì)量/g。

1.3.6 盲腸內(nèi)容物pH值測定

稱取一定質(zhì)量的盲腸內(nèi)容物于10 mL去離子水預(yù)處理離心管中，加入10倍（V/m）去離子水，旋渦混合儀上混勻后靜置，測上清液pH值。

1.3.7 盲腸內(nèi)容物游離氨測定

將預(yù)處理的盲腸內(nèi)容物樣品4 000 r/min 條件下離心5 min，吸取上清液1 mL，依次加入1 mL含有0.001 mol/L亞硝基鐵氰化鈉的0.5 mol/L苯酚溶液和1 mL含有0.03 mol/L次氯酸鈉的0.625 mol/L氫氧化鈉溶液，60 ℃保溫5 min，625 nm波長處測吸光度[18]。

配制5 mmol/L氯化銨溶液，分別移取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL溶液于4 mL比色皿中，無氨水稀釋至1.0 mL，按上述步驟測吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線得到回歸方程y=0.108 7x＋0.008 3(R2=0.999 1)，式中：y表示吸光度；x表示氯化銨濃度/（μmol/mL）。

1.3.8 盲腸內(nèi)容物短鏈脂肪酸（short chain fatty acid，SCFA）測定

將預(yù)處理的盲腸內(nèi)容物樣品在4 000 r/min轉(zhuǎn)速下離心15 min，吸取上清液轉(zhuǎn)移至預(yù)處理10 mL離心管中，10 000 r/min轉(zhuǎn)速下繼續(xù)離心15 min，1 mL一次性注射器吸取上清液1 mL，0.25 μm濾膜過濾至2 mL進(jìn)樣小瓶中待測[19]。

氣相色譜條件：進(jìn)樣量1 ?L；進(jìn)樣口溫度220 ℃；柱流量0.95 mL/min，柱溫90 ℃、平衡時(shí)間0.5 min，5 ℃/min升溫至150 ℃，保留時(shí)間7 min；檢測器溫度230 ℃；氫氣流量40 mL/min，空氣流量400 mL/min，尾吹流量40 mL/min。

1.3.9 盲腸內(nèi)容物微生物測定

?。?0 ℃冷凍大鼠盲腸內(nèi)容物0.1 g左右，加入9倍（V/m）無菌生理鹽水，旋渦混合儀振蕩混勻，制得10-1稀釋度盲腸內(nèi)容物。依次10倍稀釋至10-12稀釋度，選擇10-7～10-12稀釋度用于大腸桿菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌的培養(yǎng)計(jì)數(shù)，接種量為100 ?L。大腸桿菌培養(yǎng)選用Eosin Methylene Blue（EMB）培養(yǎng)基，37℃條件下恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48 h計(jì)數(shù)。雙歧桿菌和乳酸桿菌分別選用Bifidobacterium Selective Culture Medium（BS）培養(yǎng)基和Lactobacilli Select Agar（LBS）培養(yǎng)基，37℃條件下二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱中厭氧培養(yǎng)48～72 h計(jì)數(shù)。結(jié)果以l g（CFU/g）表示。

1.4 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel初步統(tǒng)計(jì)后用SPSS 17.0進(jìn)行顯著性分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以表示，各組間顯著性差異采用SPSS分析，P＜0.05被認(rèn)為有顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠采食量和體質(zhì)量的影響

表1 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠體質(zhì)量增加量、采食量和飼料效率的影響Table 1 Effect of capsaicin dose on body weight gain, food intake and food utilization efficiency in sham-operated and ovariectomi

表1 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠體質(zhì)量增加量、采食量和飼料效率的影響Table 1 Effect of capsaicin dose on body weight gain, food intake and food utilization efficiency in sham-operated and ovariectomi

注：*.表示偽切除組和雙側(cè)卵巢切除空白組具有顯著性差異（P＜0.05）；雙側(cè)卵巢切除組中字母不同，組間存在顯著性差異（P＜0.05）。下同。

指標(biāo) 偽切除組 雙側(cè)卵巢切除組空白組 低劑量組 中劑量組 高劑量組體質(zhì)量增加量/ g 18.62±2.21* 30.52±3.58a 27.37±3.11ab 25.02±2.85b 23.20±3.91b采食量/g 208.15±6.01*249.82±15.06a247.78±27.40a233.48±28.17ab218.44±18.84b飼料效率/（g/100 g） 8.96±1.18* 12.22±1.28 11.14±1.66 10.88± 2.12 10.60±1.36

從表1可見，與偽切除組相比，雙側(cè)卵巢切除組大鼠的體質(zhì)量增加量、采食量和飼料效率都顯著升高（P＜0.05）。在雙側(cè)卵巢切除組中，與空白組相比，灌胃辣椒素組的大鼠體質(zhì)量和采食量均有所降低，在中劑量和高劑量時(shí)達(dá)到顯著水平（P＜0.05），而飼料效率的變化沒有顯著性；在灌胃組之間，隨著灌喂劑量的增大，大鼠體質(zhì)量增加量呈逐漸下降趨勢，由27.37 g下降到23.20 g，同時(shí)，中劑量和高劑量均達(dá)到顯著水平（P＜0.05）；隨著灌喂劑量增大，大鼠采食量也呈逐漸下降趨勢，由247.78 g下降到218.44 g，高劑量達(dá)到顯著水平（P＜0.05）；飼料效率逐漸降低，但均沒有達(dá)到顯著水平。說明隨著辣椒素劑量的增加，體質(zhì)量增加量逐漸下降，抑制體質(zhì)量增加效果更加明顯。

2.2 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠血脂的影響由表2可見，雙側(cè)卵巢切除空白組大鼠血中TC、TG

表2 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠血脂的影響Table 2 Effect of capsaicin dose on serum lipids in sham-operated and ovariectomized rattss

表2 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠血脂的影響Table 2 Effect of capsaicin dose on serum lipids in sham-operated and ovariectomized rattss

指標(biāo) 偽切除組 雙側(cè)卵巢切除組空白組 低劑量組 中劑量組 高劑量組TC含量/（mmol/L） 1.87±0.10* 2.45±0.06a 2.35±0.22ab 2.30±0.10ab 2.20±0.18bTG含量/（mmol/L） 0.44±0.01* 0.51±0.06a 0.49±0.04a 0.41±0.02b 0.43±0.04bHDL-C含量/（mmol/L） 0.64±0.04* 0.78±0.05a 0.78±0.06a 0.81±0.05a 0.83±0.03aLDL-C含量/（mmol/L） 0.37±0.07 0.40±0.07a 0.36±0.09ab 0.31±0.05ab 0.28±0.03b

和HDL-C含量均顯著高于偽切除組（P＜0.05），說明雌激素缺乏易誘導(dǎo)高脂血癥。雙側(cè)卵巢切除組中，與空白組相比，大鼠血中的TC、TG和LDL-C含量都呈下降趨勢，其中低劑量組都未達(dá)到顯著水平，而高劑量組均達(dá)到顯著水平；而對于HDL-C沒有顯著性影響，只有一種升高趨勢，這種趨勢與灌胃劑量呈正相關(guān)性。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，中、高劑量辣椒素對雌激素缺乏誘導(dǎo)的高脂血癥有良好的預(yù)防效果。

2.3 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠肝脂的影響

表3 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠肝脂的影響Table 3 Effect of capsaicin dose on hepatic lipids in sham-operated and ovariectomized rats

注：*.以整個(gè)肝臟計(jì)。

指標(biāo) 偽切除組 雙側(cè)卵巢切除組空白組 低劑量組 中劑量組 高劑量組肝臟質(zhì)量/g 3.98±0.60 4.29±0.52 4.13±0.82 4.06±0.54 3.83±0.88肝臟質(zhì)量/體質(zhì)量 0.03±0.00 0.03±0.00 0.03±0.00 0.03±0.00 0.03±0.00肝臟脂肪含量/（g/g 肝臟） 0.16±0.033 0.18±0.024a 0.15±0.020a0.14±0.038a0.10±0.016b肝臟脂肪總含量/g* 0.61±0.13* 0.79±0.07a 0.63±0.20a 0.65±0.17a 0.37±0.13b肝臟TC含量/（?mol/g 肝臟） 28.45±1.96 27.97±1.45 27.76±1.70 28.93±1.37 28.39±0.95 TC總含量/?mol* 107.48±5.42*120.12±17.90a103.85±10.78b117.14±13.96a97.21±7.28b肝臟TG含量/（?mol/g 肝臟） 9.49±0.40 9.90±0.35 9.80±0.73 9.77±0.56 9.71±0.78 TG總含量/?mol* 35.49±4.35* 41.62±5.46a37.07±3.30ab36.76±6.43ab34.20±4.68b

由表3可見，與偽切除組相比，雙側(cè)卵巢切除空白組的肝臟質(zhì)量增加了0.31 g，但未達(dá)到顯著水平，而肝臟脂肪總含量、肝臟TC和TG分別升高了0.18 g、12.64 ?mol和6.13 ?mol，且具有顯著性（P＜0.05），說明雌激素缺乏可導(dǎo)致大鼠肝臟脂質(zhì)升高。在雙側(cè)卵巢切除組中，與空白組相比，各劑量組的肝臟質(zhì)量都降低了，且隨著灌胃辣椒素劑量的加大，肝臟質(zhì)量呈下降趨勢，但未達(dá)到顯著水平，可能是大鼠體質(zhì)量降低，導(dǎo)致肝臟質(zhì)量變小。各組間肝臟質(zhì)量/大鼠體質(zhì)量沒有顯著性差異，可見辣椒素劑量并不影響大鼠肝臟的正常發(fā)育。高劑量組每克肝臟中脂肪含量、肝臟脂肪總含量、肝臟TC和肝臟TG總含量均顯著降低（P＜0.05）；劑量組之間，隨著灌胃劑量的增加，大鼠的每克肝臟中脂肪含量、肝臟脂肪總含量、肝臟TC含量和肝臟TG總含量呈下降趨勢，高劑量時(shí)各指標(biāo)達(dá)到最低值，說明辣椒素對肝脂有降低作用，且隨著劑量的增加其作用變得更加明顯。

2.4 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠盲腸組織的影響

表4 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠盲腸組織的影響（x ±s，n==66）Table 4 Effect of capsaicin dose on cecum tissue in ovariectomized rats

表4 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠盲腸組織的影響（x ±s，n==66）Table 4 Effect of capsaicin dose on cecum tissue in ovariectomized rats

指標(biāo) 偽切除組 雙側(cè)卵巢切除組空白組 低劑量組 中劑量組 高劑量組盲腸壁濕質(zhì)量/g 0.61±0.16 0.63±0.15 0.58±0.19 0.55±0.07 0.52±0.07盲腸質(zhì)量/體質(zhì)量/% 1.39±0.42* 1.59±0.51a 1.50±0.28ab 1.47±0.23b 1.49±0.36ab盲腸壁面積/cm2 20.72±1.94 21.98±1.83 19.60±2.67 20.37±2.08 20.22±2.38

由表4可見，與偽切除組相比，雙側(cè)卵巢切除空白組大鼠盲腸壁濕質(zhì)量和面積分別增加了0.02 g和1.26 cm2，但沒有達(dá)到顯著水平；而盲腸質(zhì)量與體質(zhì)量比值增加了0.20%，且達(dá)到顯著性（P＜0.05）。與雙側(cè)卵巢切除空白組相比，雙側(cè)卵巢切除大鼠盲腸組織各個(gè)指標(biāo)值均降低，其中只有中劑量組的盲腸質(zhì)量/體質(zhì)量的降低呈顯著性（P＜0.05）；辣椒素劑量組間無線性相關(guān)，辣椒素對雙側(cè)卵巢切除大鼠盲腸組織的生長具有一定的抑制作用。

2.5 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠盲腸內(nèi)容物的影響

表5 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠盲腸內(nèi)容物的影響Table 5 Effect of capsaicin dose on cecum content in ovariectomized

表5 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠盲腸內(nèi)容物的影響Table 5 Effect of capsaicin dose on cecum content in ovariectomized

指標(biāo) 偽切除組 雙側(cè)卵巢切除組空白組 低劑量組 中劑量組 高劑量組盲腸內(nèi)容物質(zhì)量/g 1.50±0.39 1.76±0.81 1.54±0.35 1.74±0.35 1.64±0.60內(nèi)容物含水量/% 89.06±1.19 88.97±2.96 90.14±0.68 87.91±4.26 89.92±0.36游離氨含量/（?g/g）167.26±30.65*305.67±21.15a481.13±23.58b560.99±23.65c529.21±47.06c內(nèi)容物pH 7.98±0.17* 8.33±0.17a 8.49±0.11b 8.57±0.09b 8.53±0.03b

由表5可見，與偽切除組相比，雙側(cè)卵巢切除空白組大鼠盲腸內(nèi)容物質(zhì)量增加了0.26 g，而含水量下降了0.09%，且沒有達(dá)到顯著水平；而游離氨含量和pH值分別升高了138.41 ?g/g和0.35，均達(dá)到顯著水平（P＜0.05）。在雙側(cè)卵巢切除組中，與空白組相比，辣椒素劑量組盲腸內(nèi)容物有所下降，而內(nèi)容物含水量有所上升，但無顯著性變化；大鼠盲腸內(nèi)容物pH值都有升高趨勢，且達(dá)到顯著水平（P＜0.05），各劑量組之間變化無線性關(guān)系；各辣椒素劑量組大鼠盲腸內(nèi)容物游離氨含量均顯著升高（P＜0.05），分別升高了175.46、255.32 ?g/g和223.54 ?g/g，說明辣椒素有增加游離氨含量的作用，但辣椒素劑量之間無相關(guān)性。

2.6 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠盲腸內(nèi)容物短鏈脂肪酸的影響

由表6可見，與雙側(cè)卵巢切除空白組相比，偽切除組大鼠盲腸內(nèi)容物中乙酸含量升高了9.06 ?mol/g，但沒有達(dá)到顯著水平；而丙酸、異丁酸、丁酸和總短鏈脂肪酸的含量分別升高了4.10、 2.21、2.65、18.02 ?mol/g，且均具有顯著性（P＜0.05）。在雙側(cè)卵巢切除組中，與空白組相比，辣椒素劑量組的乙酸、丙酸和總短鏈脂肪酸的含量明顯下降，其中中劑量和高劑量組達(dá)到顯著水平（P＜0.05），說明灌胃辣椒素使得大鼠盲腸內(nèi)容物短鏈脂肪酸含量降低。

表6 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠盲腸內(nèi)容物短鏈脂肪酸的影響Table 6 Effect of capsaicin dose on SCFAs in cecum content from

表6 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠盲腸內(nèi)容物短鏈脂肪酸的影響Table 6 Effect of capsaicin dose on SCFAs in cecum content from

指標(biāo) 偽切除組 雙側(cè)卵巢切除組空白組 低劑量組 中劑量組 高劑量組乙酸含量/（μmol/g） 38.67±13.11 29.61±6.74a20.42±4.68ab17.10±2.23b19.08±2.19ab丙酸含量/（μmol/g） 15.22±3.82*11.12±2.06a9.62±3.00ab 5.36±1.01b 6.83±1.95b異丁酸含量/（μmol/g） 3.93±1.52* 1.72±0.80 1.64±0.50 0.83±0.12 1.42±0.51丁酸含量/（μmol/g） 6.10±1.49* 3.45±1.17 4.51±1.92 2.06±0.75 2.09±0.80總短鏈脂肪酸含量/（μmol/g）63.92±19.31*45.90±9.19a36.19±9.54ab25.34±4.07b29.38±4.90b

2.7 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠盲腸內(nèi)容物微生物的影響

表7 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠盲腸內(nèi)容物微生物的影響Table 7 Effect of capsaicin dose on cecal microflora in ovariectomizedlg（CFU/g）

表7 辣椒素劑量對卵巢切除大鼠盲腸內(nèi)容物微生物的影響Table 7 Effect of capsaicin dose on cecal microflora in ovariectomizedlg（CFU/g）

指標(biāo) 偽切除組 雙側(cè)卵巢切除組空白組 低劑量組 中劑量組 高劑量組雙歧桿菌 16.18±0.19 15.57±0.23a11.91±0.21b10.90±0.16b10.58±0.06b乳酸桿菌 16.45±0.20 15.99±0.38a12.97±0.05b11.82±0.31b11.87±0.20b大腸桿菌 11.07±0.28 11.53±0.22a12.36±0.40b12.50±0.27b12.70±0.32b

由表7可見，與偽切除組相比，雙側(cè)卵巢切除空白組大鼠盲腸內(nèi)容物中雙歧桿菌和乳酸桿菌數(shù)量均減少了0.61（lg（CFU/g））和0.46（lg（CFU/g）），而大腸桿菌的數(shù)量增加了0.46（lg（CFU/g）），但均沒有達(dá)到顯著性。與雙側(cè)卵巢切除空白組相比，各劑量雙側(cè)卵巢切除組大鼠盲腸內(nèi)容物中雙歧桿菌和乳酸桿菌數(shù)量顯著減少（P＜0.05），大腸桿菌數(shù)量顯著增加（P＜0.05），而各劑量組之間微生物（雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌）數(shù)量的變化雖有下降或者上升的趨勢，但均沒有顯著差異。說明辣椒素可以明顯減少腸道中有益菌的數(shù)量，增加有害菌的數(shù)量。

3 討 論

辣椒素能明顯降低血漿和肝臟中TG的濃度，可能與增加體內(nèi)脂肪氧化分解有關(guān)[20]。有研究表明其作用機(jī)理是通過激活辣椒素的特異性受體致Ca2+的濃度迅速升高，進(jìn)而引起細(xì)胞內(nèi)肥胖相關(guān)因子表達(dá)改變，抑制細(xì)胞分化和脂肪酸的合成，促進(jìn)能量消耗，降低脂肪細(xì)胞數(shù)量和體積，防治肥胖[21]。本實(shí)驗(yàn)灌胃辣椒素對雙側(cè)卵巢切除大鼠的血脂和肝脂的結(jié)果表明，辣椒素可降低雙側(cè)卵巢切除組大鼠的體質(zhì)量增加量、進(jìn)食量、血漿和肝臟中TC和TG含量；其中隨著辣椒素劑量的增加，其降血脂和肝脂的作用越明顯，說明辣椒素同樣對雙側(cè)卵巢切除大鼠具有較好的降血脂、肝脂作用。

辣椒素有降血脂和肝脂的作用，但同時(shí)其對腸道有一定的損傷作用，有研究表明[22]，灌胃辣椒素會(huì)出現(xiàn)腹部痙攣現(xiàn)象。Johnson等[13]研究發(fā)現(xiàn)對大鼠連續(xù)30 d飼喂80 mg/（kg·d）的辣椒素后大鼠小腸、大腸內(nèi)出現(xiàn)腫瘤。本實(shí)驗(yàn)灌胃辣椒素對雙側(cè)卵巢切除大鼠盲腸內(nèi)環(huán)境的結(jié)果表明：辣椒素能降低盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸含量和雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)量，同時(shí)升高游離氨含量和大腸桿菌數(shù)量；而低劑量辣椒素可以顯著降低盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸含量，升高游離氨含量，同時(shí)可以顯著降低有雙歧桿菌和乳酸桿菌數(shù)量，顯著增加大腸桿菌數(shù)量，說明由于雌激素的缺乏，辣椒素對雙側(cè)卵巢切除大鼠的腸道損傷作用表現(xiàn)的更明顯，而辣椒素劑量組之間沒有顯著差異，辣椒素對雙側(cè)卵巢切除大鼠盲腸內(nèi)環(huán)境影響劑量效應(yīng)不明顯。

[1] GORODESKI G I. Update on cardiovascular disease in postmenopausal women[J]. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol, 2002, 16(3): 329-355.

[2] COTE I, YASARI S, PIGHON A, et al. Liver fat accumulation may be dissociated from adiposity gain in ovariectomized rats[J]. Informa Healthcare, 2012, 15(6): 594-601.

[3] MARTIN V T. Ovarian hormones and pain response: a review of clinical and basic science studies[J]. Gender Medicine, 2009, 6(2): 168-192.

[4] YUAN R, PENG Q, LIAO Q, et al. Efficacy of hormone replacement plus antidepressant for anxiety and depression in patient with menopause syndrome[J]. Chinese Journal of Clinical Rehabilitation, 2006, 10(2): 162-163.

[5] KAFKAS S, DOST T, OZKAYRAN H, et al. Effect of estrogen therapy on adipocytokines in ovariectomized-aged rats[J]. Journal of Obstetrics and Gynaecology Research, 2012, 38(1): 231-238.

[6] 劉雄, 張煥容, 楊發(fā)龍. 高直鏈玉米淀粉對卵巢切除大鼠體內(nèi)膽固醇代謝影響的研究[J]. 營養(yǎng)學(xué)報(bào), 2007, 29(5): 453-457.

[7] 馮媛媛. 薛荔籽果膠理化性質(zhì)及其功能特性的研究[D]. 重慶: 西南大學(xué), 2010: 12.

[8] 蘇昕峰, 文紅麗, 劉雄, 辣椒素對胃腸道健康的影響[J]. 食品工業(yè)科技, 2011, 32(6): 443-446.

[9] SNITKER S, FUJISHIMA Y, SHEN H, et al. Effects of novel capsinoid treatment on fatness and energy metabolism in humans: possible pharmacogenetic implications[J]. The American Journal of Clinical Nurition, 2009, 89(1): 45-50.

[10] MANJUNATHA H, SRINIVASAN K. Hypolipidemic and antioxidant effects of curcumin and capsaicin in high-fat-fed rats[J]. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology, 2007, 85(6): 588-596.

[11] KEMPAIAH R K, SRINIVASAN K. Integrity of erythrocytes of hypercholesterolemic rats during spices treatment[J]. Molecular and Cellular Biochemistry, 2002, 236(1/2): 155-161.

[12] KEMPAIAH R K, SRINIVASAN K. Beneficial influence of dietary curcumin, capsaicin and garlic on erythrocyte integrity in high-fat fed rats[J]. Journal of Nutrition Biochemistry, 2006, 17(7): 471-478.

[13] JOHSON W. final report on the safety assessment of Capsicum annuum extract, Capsicum annuum fruit extract, Capsicum annuum resin, Capsicum annuum fruit powder, Capsicum frutescens fruit, Capsicum frutescens fruit extract, Capsicum frutescens resin, and capsaicin[J]. International Journal of Toxicology, 2007, 26: 103-106.

[14] MATRICON J, MELEINE M, GEL OT A, et al. Review article: associations between immune activation, intestinal permeability and the irritable bowel syndrome[J]. Alimentary Pharmacology & Therapeutics, 2012, 36(11/12): 100 9-1031.

[15] XIONG L, HIROSHI O, TARO K, et al. The effect of high-amylose cornstarch on lipid metabolism in OVX rats is affected by fructose feeding[J]. Journal of Nutritional Biochemistry, 2010, 21: 89-97.

[16] FOLCH J, LESS M, SLOANE-STANLEY G H. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissue[J]. The Journal of Biologic al Chemistry, 1957, 226: 497-509.

[17] 劉雄, 張煥榮, 楊發(fā)龍. 高直鏈玉米淀粉對大鼠腸道發(fā)酵影響的研究[J]. 營養(yǎng)學(xué)報(bào), 2007, 29(4): 372-375.

[18] KISHIDA T, NAKAI Y, EBIHARA K. Hydroxypropyl-distarch phosphate from tapioca starch reduces zinc and iron absorption, but not calcium and magnesium absorption, in rats[J]. The Journal of Nutrition, 2001, 131: 294-300.

[19] CHANEY A L, MARBACH E P. Modified reagents for determination of urea and ammonia[J]. Clinical Chemistry, 1962, 8: 130-132.

[20] ZHANG L L, YAN L D, MA L Q. Activation of transient receptor potential vanilloid type-1 channel prevents adipogenesis and obesity[J]. Circulation Research, 2007, 100(7): 934-936.

[21] LEJEUNE M P, KOVACS E M, WESTERTERP M S. Effect of capsaicin on substrate oxidation and weight maintenance after modest body-weight loss in human subj ects[J]. British Journal Nutrition, 2003, 90(3): 651-659.

[22] HAMMER J, HAMMER H F, EHERER A J, et al. Intraluminal capsaicin does not affect fluid and electrolyte absorption in the human jejunum but does cause pain[J]. Gut, 1998, 43: 252-255.

Effect of Capsaicinoid Dose on Serum Lipids, Hepatic Lipids and Cecum Environment in Ovariectomized Rats

LU Hong-jia, CHEN Zhao-jun, ZHENG Long-hui, SU Xin-feng, LIU Xiong*
(College of Food Science, Southwest University, Chongqing 400715, China)

Objective: To investigate the effect of capsaicinoids on serum lipids, hepatic lipids and cecum environment in ovariectomized rats. Methods: Thirty mature female Wistar rats were divided into five groups. One group was shamovariectomized as sham reference group. The other four groups were double ovariectomized and assigned as model group and capsaicin groups at lo w (5.0 mg/(kg·d)), medium (10.0 mg/(kg·d)) and high doses (15.0 mg/(kg·d)) one week later. All rats were sacrificed after 28 days of feeding and analyzed for triglyceride (TG) and cholesterol (TC) in serum and liver, the area of cecum, the content of water, pH and short-chain fatty acid content in cecum, and intestinal microflora. Results: The body weight, feed intake, serum lipids, liver fat, hepatic total cholesterol, hepatic triglyceride in the control group were significantly higher than those in the sham group. Feeding capsaicinoids could reduce the body weight, body-weight gaining, plasma cholesterol and fat, total cholesterol and triglyceride in liver in a dose-dependent manner. In addition, capsaicinoids could also decrease the concentration of short-chain fatty acids and the amount of beneficial bacteria significantly (P ＜ 0.05), and improve the concentration of free ammonia and pH of cecum content as well as the amount of harmful bacteria, significantly (P ＜ 0.05), but there was no significant difference among different dose groups. Conclusion: Capsa icin may significantly decrease estrogen deficiency-induced hypercholesterolemia in rats, and damage the cecum environment.

capsaicin; ovariectomized rat; serum lipids; hepatic lipids; cecum environment

TS201.4

A

1002-6630（2014）03-0203-06

10.7506/spkx1002-6630-201403041

2013-02-04

中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)（XDJK2009B004）；國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（2011GA31071529）

陸紅佳（1986—），女，博士研究生，研究方向?yàn)槭称坊瘜W(xué)與營養(yǎng)學(xué)。E-mail：aaluhongjia@163.com

*通信作者：劉 雄（1970—），男，教授，博士，研究方向?yàn)樘妓衔锕δ芘c利用，食品營養(yǎng)學(xué)。E-mail： liuxiong848@hotmail.com