馬喜峰，湯春妮，李 斌

（陜西國防工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院化學(xué)工程學(xué)院，陜西 西安710302）

阿奇霉素（azithromycin，AZM）是新的大環(huán)內(nèi)酯類廣譜抗生素［1］，其化學(xué)結(jié)構(gòu)與紅霉素非常相似，可由紅霉素結(jié)構(gòu)修飾后得到。阿奇霉素在酸性環(huán)境中穩(wěn)定、半衰期長、在體內(nèi)分布廣，伴隨其在臨床上的大范圍使用，不良反應(yīng)越來越多。有研究將醫(yī)藥級(jí)的阿奇霉素制成有磁性且具有靶向的藥物，人體服用后，通過在體外加磁場將微球引至病變部位，隨后藥物從微球中釋放出來，有效濃度增大，可以提高治療效果［2－4］。相關(guān)研究已成為世界藥學(xué)界研究的焦點(diǎn)，但國內(nèi)研究相對(duì)較少。因此，制備出具有磁性且能將藥物引至病變部位的靶向藥物意義重大。

作者在此采用乳化－溶劑揮發(fā)法，以可生物降解材料聚乳酸為載體，在其中加入醫(yī)藥級(jí)阿奇霉素和一定量納米四氧化三鐵制備聚乳酸／納米四氧化三鐵載阿奇霉素緩釋微球，并優(yōu)化了制備工藝。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 試劑與儀器

聚乳酸（PLA），醫(yī)藥級(jí)，深圳光華偉業(yè)實(shí)業(yè)有限公司；注射用阿奇霉素，陜西平利制藥有限公司；明膠，生化試劑，天津福晨化學(xué)試劑廠；磷酸二氫鉀，分析純，天津恒興化學(xué)試劑制造有限公司；吐溫80、磷酸氫二鈉、二氯甲烷，分析純，西安化學(xué)試劑廠；納米四氧化三鐵，分析純，北京德科島金科技有限公司。

TDL－5－A型臺(tái)式離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠；UV／1800PC－DS型分光光度計(jì)，上海美譜達(dá)儀器有限公司；RH－BASIC1型磁力加熱攪拌器，廣州儀科實(shí)驗(yàn)室技術(shù)有限公司；JJ－1A型數(shù)顯精密增力電動(dòng)攪拌器，武漢葛萊莫設(shè)備有限公司；KH－250DB型超聲波清洗機(jī)，溫州創(chuàng)高電子儀器有限公司；TZG－6020型真空干燥箱，陜西天美科學(xué)儀器有限公司；SHE－D（Ⅲ）型循環(huán)水式真空泵，鞏義予華有限公司；2402型蹄形磁鐵，浙江向陽花教學(xué)器材有限公司。

1.2 方法

1.2.1 藥物最大吸收波長的測定和標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

稱取一定量的阿奇霉素，向其中加入pH值為6的磷酸鹽緩沖溶液（PBS）配制成150μg·mL－1的阿奇霉素溶液［5］；取上述溶液5mL，加硫酸溶液（V硫酸∶V蒸餾水＝3∶1）5mL，搖勻，在60℃水浴中加熱20min，取出后冷卻至室溫。在400～600nm范圍內(nèi)掃描，確定最大吸收波長［6］。

將阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋至不同的濃度，以PBS為參比溶液在最大吸收波長處測定吸光度，以阿奇霉素濃度（c）為橫坐標(biāo)、吸光度（A）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.2 聚乳酸／納米四氧化三鐵載阿奇霉素微球的制備

采用乳化－溶劑揮發(fā)法［6－7］。準(zhǔn)確稱取適量阿奇霉素加入到－定量的聚乳酸二氯甲烷溶液中，同時(shí)加入一定量的納米四氧化三鐵，用超聲波清洗機(jī)分散，得到超聲分散溶液；取60mL明膠液，向其中加入1mL吐溫80，高速攪拌；將超聲分散溶液加入到上述高速攪拌的溶液中，在一定溫度下繼續(xù)攪拌3h，待二氯甲烷揮發(fā)完全后于3 600r·min－1離心0.5h；將渾濁液過濾，洗滌，并用去離子水沖洗去除明膠，解吸、干燥，所得固體即為聚乳酸／納米四氧化三鐵載阿奇霉素微球（簡稱阿奇霉素微球）［7］。

1.2.3 體外釋藥行為研究

用動(dòng)態(tài)膜透析法［8］測定阿奇霉素微球的釋藥行為（模擬人體體液環(huán)境）。將裝有含約100mg阿奇霉素微球的透析袋放到150mL pH值為6的PBS中，溫度控制在（37±0.5）℃，轉(zhuǎn)速不宜太高，每隔幾小時(shí)取出5mL袋外溶液，同時(shí)補(bǔ)充等量的PBS。

按1.2.1方法測量溶液的吸光度，計(jì)算藥物溶出量及其占總藥物量的百分比。以時(shí)間為橫坐標(biāo)、藥物溶出量占總藥物量的百分比為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2 結(jié)果與討論

2.1 阿奇霉素的標(biāo)準(zhǔn)曲線

實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，阿奇霉素的最大吸收波長為482nm。在該波長下測定阿奇霉素系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行線性回歸，擬合線性方程為A＝3.833c－0.002238，R2＝0.9984。表明，阿奇霉素溶液濃度在50～500μg·mL－1范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

2.2 正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化制備工藝

以平均載藥量為考核指標(biāo)，以阿奇霉素用量（A）、PLA濃度（B）、乳化溫度（C）、吐溫80用量（D）為考察因素進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)以優(yōu)化阿奇霉素微球的制備工藝。正交實(shí)驗(yàn)的結(jié)果及分析見表1。

表1 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析Tab.1 The results and analysis of orthogonal experiment

從表1可以看出，各因素對(duì)阿奇霉素微球的平均載藥量影響大小依次為阿奇霉素用量＞乳化溫度＞PLA濃度＞吐溫80用量，最佳制備條件為A3B2C1D3，即阿奇霉素用量40mg、PLA濃度0.05 mg·mL－1、乳化溫度20℃、吐溫80用量0.5g。

2.3 阿奇霉素微球的體外釋藥行為（圖1）

圖1 阿奇霉素微球體外釋藥量與時(shí)間的關(guān)系曲線Fig.1 The relationship curve of drug in vitro release amount and time for the AZM miciospheres

從圖1可以看出，阿奇霉素微球初期具有明顯的突釋行為，隨著時(shí)間的延長，釋藥速度趨緩且?guī)缀踅咏鼊蛩?。這是因?yàn)椋海?）由于與水接觸面積較大，阿奇霉素微球表面的藥物首先釋放，因而初期的釋藥量較大；（2）表面藥物快速進(jìn)入溶液后，隨著內(nèi)部聚乳酸不斷的緩慢降解，水分子逐漸滲入，使藥物不斷溶解并緩慢地釋放，因而后期釋藥慢且均勻。表明，納米四氧化三鐵的加入使聚乳酸對(duì)阿奇霉素的包覆效果增強(qiáng)，阿奇霉素微球的釋藥時(shí)間延長，藥效溫和而持久。

3 結(jié)論

采用乳化－溶劑揮發(fā)法，以可生物降解材料聚乳酸為載體，在其中加入醫(yī)藥級(jí)阿奇霉素和一定量納米四氧化三鐵制備聚乳酸／納米四氧化三鐵載阿奇霉素緩釋微球，該微球具有明顯的藥物緩釋作用，釋藥時(shí)間長，藥效緩和而持久。

［1］王佩，李玉珍.新大環(huán)內(nèi)酯類抗生素——阿奇霉素［J］.中國新藥雜志，1996，5（3）：180－183.

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［3］楊曉春，張強(qiáng)，吳霖.我國藥劑學(xué)靶向制劑研究的基本思路［J］.中國藥學(xué)雜志，2001，36（12）：795－799.

［4］陳愛萍，徐榕青.中藥靶向制劑研究現(xiàn)狀［J］.海峽藥學(xué)，2005，17（1）：8－10.

［5］韓永濤，黃桂華，席延衛(wèi)，等.阿奇霉素聚乳酸微球的制備及其體外釋藥特性的研究［J］.山東大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2006，44（8）：853－856.

［6］李巖，孫殿甲，畢殿洲.聚乳酸、聚乳酸乙醇酸共聚物微球的制備及影響其質(zhì)量因素的研究進(jìn)展［J］.國外醫(yī)學(xué)（藥學(xué)分冊(cè)），2001，28（3）：164－166.

［7］張杰，楊靜，甄衛(wèi)軍.聚乳酸／Fe3O4載阿奇霉素微球的制備及其體外釋藥特性的研究［J］.精細(xì)石油化工進(jìn)展，2012，13（1）：51－54.

［8］吳偉，崔光華.聚乳酸或乳酸／羥乙酸共聚物微球的制備方法研究進(jìn)展［J］.國外醫(yī)藥——合成藥 生化藥 制劑分冊(cè)，2000，21（6）：367－369.