董小雁， 高文彥， 周春蘭， 馮 寧， 魏太明

(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)(大慶)，黑龍江 大慶163319)

交泰丸，源自明·韓懋《韓氏醫(yī)通》，名見清·王士雄《四科簡要方》，由黃連、肉桂二味藥(10 ∶1)組成。二者配伍獨特，寒熱相伍，體現(xiàn)清溫并用之法，且以清為主，功能清心除煩，引火歸元，交通心腎，對心腎不交之失眠有顯著療效。由于交泰丸以生藥原粉制成蜜丸，生物利用度較差。將該方劑制成滴丸，滴丸屬于固體分散體，具有速效、高效、降低不良反應(yīng)、提高穩(wěn)定性、易儲存、攜帶方便等優(yōu)點。本實驗采用固體分散技術(shù)，以聚乙二醇4000(PEG4000)和聚乙二醇6000 (PEG6000)為基質(zhì)，以甲基硅油為冷卻劑，采用正交試驗設(shè)計法對交泰滴丸的最佳成型工藝進(jìn)行了優(yōu)選［1］。

交泰丸中的黃連有清熱燥濕、瀉火解毒的功效。黃連中的主要成分鹽酸小檗堿具有抗菌、降壓，降血脂，降血糖［2］和治療高血壓、心律失常的作用。鹽酸小檗堿也是交泰丸中發(fā)揮藥效的主要成分［3］。交泰丸中的肉桂有補(bǔ)火助陽，引火歸源，散寒止痛，活血通經(jīng)的功效。交泰丸中肉桂發(fā)揮藥效的主要成分是肉桂醛，肉桂醛具有降壓、解熱、鎮(zhèn)靜、抗炎、抗菌［4］、抗腫瘤、抗血小板聚集和抗凝血等多種藥理作用。本實驗采用在交泰丸中發(fā)揮主要作用的鹽酸小檗堿作為定量測定指標(biāo)，用于控制交泰滴丸提取物的質(zhì)量。

1 儀器和材料

1.1 儀器 DWJ-2000S-D 多功能滴丸試驗機(jī)(煙臺百藥泰中藥科技發(fā)展有限公司);BJ-Ⅱ智能崩解儀(天津新天光);ESJ200-4 電子天平(沈陽龍騰電子);荸薺型包衣鍋(泰州金誠制藥機(jī)械);ZRS-8 智能溶出試劑儀(天津市天大天發(fā)科技);Axiostar 數(shù)碼顯微成像系統(tǒng)，Kodak DCl20 ZOOM Digital Camera，Sartorius sbl 電 子 天 平 (德 國DOLD);Agilent1200 高效液相色譜儀(安捷倫科技有限公司);SHZ-D (Ⅲ)水式真空泵(鞏義市予華儀器有限公司);UPK-I-100L 純化水制備系統(tǒng)(上海優(yōu)浦科學(xué)儀器有限公司);KH3200DE 型數(shù)控超聲波清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司);玻璃砂芯過濾裝置(溶劑過濾器)。

1.2 材料 純度97%鹽酸小檗堿(自制)、肉桂醛99%(金海天然香料油科技有限公司);聚乙二醇4000，6000(PEG4000，PEG6000，天津市大茂化學(xué)試劑廠);二甲基硅油(上海九邦化工有限公司)。Eudragit S100 (德閏羅姆公司生產(chǎn)，由上海德國賽公司提供);二氧化鈦(湖南湘中精細(xì)化學(xué)品廠);滑石粉(銀漢滑石粉有限公司);乙醇(化學(xué)純，科龍化學(xué)試劑有限公司);鹽酸小檗堿對照品(批號110713-201212，中國食品藥品檢定研究院);乙腈(色譜純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);甲醇(色譜純，天津市大茂化學(xué)試劑廠)，其他試劑均為分析純，水為娃哈哈純凈水。

2 方法與結(jié)果

2.1 基質(zhì)的選擇 滴丸劑常用的水溶性基質(zhì)是聚乙二醇(PEG)類?；赑EG4000 熔點低，具有良好分散能力和較大內(nèi)聚力，PEG6000 具有能改善滴丸硬度，具有良好的耐熱性及流動性［5］的優(yōu)點，本實驗使用PEG4000 和PEG6000 的混合基質(zhì)。

2.2 混合基質(zhì)的最佳配比篩選 見表1，PEG4000 ∶PEG6000 =2 ∶3 時，空白基質(zhì)滴丸的圓整度好，硬度適中，無拖尾、粘連現(xiàn)象。

表1 不同比例PEG4000 和PEG6000 成型情況

2.3 主藥與基質(zhì)的配比篩選 以篩選出的PEG4000 ∶PEG6000 =2 ∶3 為基質(zhì)，二甲基硅油為冷卻劑，進(jìn)行主藥與基質(zhì)的配比篩選。將藥物與基質(zhì)按1 ∶2、1 ∶2.5、1 ∶3、1 ∶3.5、1 ∶4 的比例進(jìn)行混合，實驗結(jié)果(表2 和表3)表明，藥物與基質(zhì)的比例為1 ∶3.5、1 ∶4 時成型都很好，且滴丸在30 min 內(nèi)全部溶散，符合要求。但考慮到載藥量的大小，確定比例為1 ∶3.5，即藥物∶PEG4000 ∶PEG6000 =1 ∶1.4 ∶2.1。

表2 不同藥物與基質(zhì)配比下的外觀和溶散時限情況

表3 不同藥物與基質(zhì)配比下的外觀質(zhì)量和溶散時限情況結(jié)果表

2.4 成型工藝的正交試驗優(yōu)選

2.4.1 正交試驗優(yōu)選 在優(yōu)選出藥物和基質(zhì)的最佳比例基礎(chǔ)上，以滴距、藥料溫度、冷卻劑溫度等3 因素采用L9(34)正交表設(shè)計試驗，對各條件進(jìn)行優(yōu)選(見表4)。成型情況以外觀(硬度、圓整度、粘連、拖尾)和丸重變異系數(shù)作為考察指標(biāo)，權(quán)重系數(shù)分別為0.4 和0.6，對正交滴丸樣品進(jìn)行評價并作統(tǒng)計學(xué)分析，以確定最佳工藝條件［6］。硬度、圓整度、粘連、拖尾由差到好各分為1 ～4級，由多個人來主觀判斷。丸重變異系數(shù)按《中國藥典》2010 年版項下丸劑重量差異限度方法來測定。隨機(jī)取20丸稱重，計算變異系數(shù)。

2.4.2 正交試驗結(jié)果 由表5、表6 可知，F(xiàn)A＞F0.05，P ＜0.05，有顯著性影響。FC＞F0.05，P ＜0.05，有顯著性影響。FB＜F0.05，P ＞0.05，無顯著性影響。因素A (滴距)和因素C (冷卻液溫度)對滴丸成型有顯著性影響，因素B (料溫)對滴丸成型影響不大。3 個因素影響滴丸成型的主次因素順序為A ＞C ＞B。最佳工藝為A2B2C2，考慮到高溫下?lián)]發(fā)油易揮發(fā)且因素料溫(B)是非主要因素，因此料溫選80 ℃。即在PEG4000 ∶PEG6000 =2 ∶3 的基礎(chǔ)上，當(dāng)?shù)尉酁? cm，藥料溫度為80 ℃，冷卻液溫度為5 ～8 ℃時，滴丸成型效果最好。

表4 滴丸成型因素水平

表5 交泰滴丸成型正交試驗結(jié)果

表6 方差分析

2.5 交泰滴丸包衣工藝篩選結(jié)果 經(jīng)反復(fù)預(yù)示得出包衣傾角為40°，轉(zhuǎn)速為23.6 r/min 時，滴丸能充分翻轉(zhuǎn)。由于滴丸遇熱易熔化，所以在包衣過程中溫度不能太高。控制進(jìn)風(fēng)溫度在35 ℃，進(jìn)風(fēng)流量適宜，物料表面溫度在32 ～33 ℃，既能保證包衣液溶劑的及時揮發(fā)，便于成膜，又能保證滴丸在包衣過程中不會受熱變形。霧化壓力試驗表明，當(dāng)霧化壓力在1.5 kg/cm 時，噴出的液滴大小合適。所得包衣滴丸表面均勻，釋放穩(wěn)定性好。根據(jù)噴霧體積流量預(yù)試情況，將噴液體積流量定4.475 mL/min，不產(chǎn)生囂丸現(xiàn)象，較為理想。在以上包衣條件下，噴入含聚合物5%的乙醇包衣液，使滴丸增重3%。即得。

2.6 工藝驗證試驗 通過滴丸滴制和包衣篩選的最佳工藝進(jìn)行驗證性試驗，結(jié)果滿意，指標(biāo)符合制劑要求。每丸丸重0.03 g，每丸鹽酸小檗堿實測量為6.08 mg。

2.7 交泰滴丸中鹽酸小檗堿測定

2.7.1 色譜條件［7］伊利特hypersil ODS2 色譜柱;流動相為乙腈-0.05 mol/L 磷酸二氫鉀溶液(50 ∶50)(每100 mL 中加十二烷基硫酸鈉0.4 g，在以磷酸調(diào)節(jié)pH 值為4.0);檢測波長為345 nm，柱溫室溫，體積流量1.0 mL/min，進(jìn)樣量20 μL。理論塔板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計算應(yīng)不低于5 000。

2.7.2 對照品溶液制備 精密稱取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇溶解，制成每1 mL 含75 μg 的溶液。

2.7.3 供試品溶液的制備 取交泰滴丸20 粒，研細(xì)，稱量0.06 ɡ，精密稱定，置10 mL 定量瓶中，加甲醇定容，超聲處理30 min，用甲醇彌補(bǔ)減失的量，0.45 μm 的微孔濾膜進(jìn)行過濾，取續(xù)濾液1 mL，置10 mL 定量瓶中，用甲醇定容到刻度。

2.7.4 鹽酸小檗堿的線性關(guān)系考察 精密量取制備好的對照品溶液1、2、3、4、5 mL，分別置10 mL 量瓶中，用甲醇定容，制成7.5、15、22.5、30、37.5 μg/mL 的一系列溶液，依次精密量取系列溶液各20 μL 進(jìn)樣。以質(zhì)量濃度X (μg/mL)為橫坐標(biāo)，峰面積Y 為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，回歸方程為Y =90 616X -16 239，r =0.999 85。結(jié)果表明，鹽酸小檗堿進(jìn)樣量在7.5 ～37.5 μg/mL 范圍內(nèi)與峰面積之間成良好的線性關(guān)系。

2.7.5 鹽酸小檗堿的精密度考察 精密吸取鹽酸小檗堿對照品20 μL，連續(xù)進(jìn)樣5 次，計算峰面積的RSD。結(jié)果RSD為0.6%，以上數(shù)據(jù)表明儀器精密度良好。

2.7.6 鹽酸小檗堿的重復(fù)性考察 取同一批樣品，按供試品溶液的方法平行制備5 份，再分別吸取2 mL 置10 mL 量瓶中，用甲醇定容。在上述色譜條件下，精密量取20 μL分別進(jìn)樣，測定每份樣品中的量，考察其重復(fù)性。結(jié)果RSD為0.4%，表明鹽酸小檗堿的重復(fù)性考察合格。

2.7.7 鹽酸小檗堿的穩(wěn)定性考察 供試品溶液來自“2.7.3”項下，在上述色譜條件下，每次進(jìn)樣20 μL，在0、2、4、6、8、12 h 測定樣品中鹽酸小檗堿，考察其穩(wěn)定性。RSD 為1.0%，表明樣品中鹽酸小檗堿在12 h 內(nèi)含有量穩(wěn)定，無變化。

2.7.8 鹽酸小檗堿的加樣回收率考察 取已知含有量的交泰滴丸9 份，按供試品溶液的方法進(jìn)行制備，分別加鹽酸小檗堿對照品適量，在上述色譜條件下，每次進(jìn)樣均為20 mL，加樣回收率考察，由表7 可知，平均回收率為100.8%，RSD 為1.3%。

2.7.9 測定結(jié)果 每丸丸重0.03 g，每丸鹽酸小檗堿實測量為6.08 mg。

3 討論

交泰丸原方劑在臨床應(yīng)用和生產(chǎn)中有一定的缺點［8］。而目前還沒有把交泰丸做成一定劑型的報道，且滴丸的諸多優(yōu)點也為交泰滴丸的新劑型研究提供依據(jù)。

滴丸的成丸情況和質(zhì)量受多因素影響，基質(zhì)的選擇、用量比例和主要活性成分含有量對滴丸的成型和原料藥影響很大。而滴距、料溫、冷卻液溫度等因素則對滴丸的外觀和丸重變異系數(shù)有影響。本實驗利用單因素選擇和正交試驗考察和篩選了影響交泰滴丸成型的工藝條件，制備出了符合《中國藥典》要求的滴丸。選擇合適的包衣材料并對包衣工藝進(jìn)行篩選。在此基礎(chǔ)上采用高效液相對交泰滴丸中鹽酸小檗堿進(jìn)行定量測定。本研究與文獻(xiàn)［9］主要區(qū)別在于:一是使用原料不同，即黃連用鹽酸小檗堿代替，肉桂用桂皮醛代替，藥效學(xué)實驗也證明顯著有效，為今后的中藥現(xiàn)代化打下基礎(chǔ)。二是使用了水溶性包衣材料和技術(shù)，遮蓋了小檗堿的苦味，也避免了肉桂醛的散失。三是進(jìn)行了成分定量測定，方法可靠可行。結(jié)果顯示，該法靈敏度高、重復(fù)性好、穩(wěn)定性好、操作簡單可行，可用于交泰滴丸中鹽酸小檗堿的質(zhì)量控制。經(jīng)過滴丸滴制、包衣、定量測定試驗，三部分試驗?zāi)芙y(tǒng)一保證制劑穩(wěn)定、質(zhì)量安全、可控。

表7 鹽酸小檗堿回收率實驗結(jié)果

致謝： 感謝上海卡樂康包衣技術(shù)有限公司協(xié)助包衣。

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