任戰(zhàn)軍，白彥，李發(fā)弟

(1．甘肅農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，甘肅蘭州730070;2．西北農(nóng)林科技大學動物科技學院，陜西楊凌712100)

自從1869年Raulin［1］發(fā)現(xiàn)鋅是黑霉菌生長的必需微量元素，人類就開始了對鋅的生物學功能進行探索。Todd等［2］首次通過大鼠試驗證明鋅是動物必需微量元素，隨后Prasad等［3］證實鋅是人體的必需微量元素。張麗萍和張新國［4］發(fā)現(xiàn)鋅幾乎參與動物組織和器官中生命活動，是功能最多的動物必需微量元素之一。Jose等［5］、井明艷等［6］、李聚才等［7］國內(nèi)外許多人研究了豬、牛、羊、雞等畜禽對鋅的消化吸收以及對其生長、繁殖、免疫、神經(jīng)性能及金屬硫蛋白合成、解毒修復等影響，并提出了相應的添加量，已基本上反映出實際需要量。Greene等［8］、馬玉勝和田昌林［9］、吳紅巖等［10］、李慶芝等［11］、廖建敏［12］在特種動物上做了相關(guān)研究，因研究重復次數(shù)較少，爭議也較少，是否反應實際需要量有待進一步研究。Hossain和Bertechini［13］報道肉兔添加鋅70 mg/kg，生產(chǎn)效果明顯。黃玉德［14］報道添加鋅50 mg/kg時對肉兔生長發(fā)育最合適。Guimaraes等［15］添加含鋅量為100 mg/kg的ZnO，新西蘭白兔兔肝中鋅沉積量最高。梁鴻雁等［16］添加0～80 mg/kg鋅時，肉兔的肝臟、腎臟、胰臟、脛骨、被毛、血清鋅濃度均顯著升高;繼續(xù)添加到120 mg/kg時，腎臟鋅濃度繼續(xù)提高，而其他組織器官鋅濃度趨于穩(wěn)定。高宏偉等［17］報道添加鋅量為80 mg/kg提高吉戎獺兔Ⅱ生產(chǎn)性能。白國勇等［18］報道添加255 mg/kg一水硫酸鋅(硫酸鋅含量98%，Zn 35%)和150 mg/kg富鋅康(乳酸鋅含量≥98%，Zn2+≥21．5%)對35～40日齡法系獺兔效果最好。徐振華等［19-20］報道日糧鋅添加水平對生長期新西蘭肉兔平均日增重和料重比無顯著性影響，對平均日采食量影響顯著;對血清銅鋅超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性影響顯著，對肝臟銅鋅超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性影響極顯著;隨日糧鋅水平的增加，肝臟、腎臟MT-1mRNA相對表達豐度呈先升高后降低趨勢(P＜0．01)，80mg/kg添加水平時兩種鋅源MT-1mRNA相對表達豐度均達到最高。Ayyat［21］研究了5個水平鋅的添加量(1，100，200，300和400 mg/kg日糧)對新西蘭白兔的影響，發(fā)現(xiàn)隨著鋅添加量的增加，家兔的采食量和飼料轉(zhuǎn)化率均提高。可以看出，目前研究鋅對家兔生長性能、生理生化指標及其與基因表達量影響的結(jié)論相差較大，值得針對性的研究。一般生產(chǎn)中，家兔鋅的添加量為70 mg/kg［22-23］。豬對鋅的耐受量是正常需要量的20～30倍，反芻動物對鋅的耐受量是正常需要量的10倍［24-25］。作為單胃草食性動物，對于鋅的耐受性以及超量添加鋅對肉兔生長性能、胴體率、器官指數(shù)、組織鋅沉積情況的影響，鮮有報道。研究不同鋅源及其添加水平對肉兔的生長性能與組織鋅沉積具有重要現(xiàn)實意義。本實驗選取1．5月齡艾哥兔為研究對象，通過飼養(yǎng)試驗、屠宰試驗和實驗室分析，探討較高水平添加ZnSO4和蛋氨酸鋅對肉兔生長性能、胴體率、器官指數(shù)、組織鋅沉積情況的影響。

1 材料與方法

1．1 試驗材料

一水硫酸鋅(含鋅35%)來自西安易發(fā)飼料科技有限公司生產(chǎn);蛋氨酸鋅(含鋅12%)來自珠海市天貝生物科技有限公司生產(chǎn)。

1．2 試驗動物

選用健康、日齡相差不超過3 d的、體重相近的同批次1．5月齡艾哥兔。

1．3 試驗設(shè)計

試驗設(shè)計采用單因素隨機分組。選擇艾哥兔132只，隨機分成11個處理，每組設(shè)4個重復，每個重復3只兔。各組初始體重差異不顯著(P＞0．05)。設(shè)對照組(不額外添加鋅)，試驗1～5組以ZnSO4、試驗6～10組以Met-Zn形式分別添加鋅70，105，140，175和210 mg/kg?；A(chǔ)日糧含鋅量29．35 mg/kg。試驗于2009年4月28日到2009年6月5日，在陜西省蒲城利好養(yǎng)兔場進行。

1．4 試驗飼糧及營養(yǎng)水平

日糧配制參照我國建議的家兔營養(yǎng)供給量，按生長兔營養(yǎng)標準配制日糧，見表1。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平Table 1 Composition and nutrient levels of basal diet

1．5 生長試驗

1．5．1 試驗準備 清除兔舍內(nèi)所有雜物和糞便，清理兔籠料盒等沾污物，然后用火焰消毒籠具，檢查飲水、通風、溫控設(shè)施，確保試驗期間水、料供應充足，環(huán)境條件適宜。

1．5．2 飼養(yǎng)管理 預飼期7 d，正飼期30 d。顆粒料投喂，早晚各喂料1次，自由采食飲水，自然采光和通風。按常規(guī)免疫程序進行。分別于正試驗開始前和結(jié)束后空腹稱重，試驗期每日記錄耗料量，并及時觀察試驗兔疾病情況。

1．6 樣品采集和制備

飼養(yǎng)30 d早上空腹稱量體重，禁食(自由飲水)24 h后，于31 d早上每組隨機挑選8只兔屠宰。內(nèi)臟取肝、脾、左腎，剔除臟器周圍脂肪，取背最長肌胸椎處約2 cm，用無離子水沖洗后置于－80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1．7 測定指標與方法

1．7．1 生產(chǎn)性能、胴體率 體重:以重復為單位，于正式試驗0和30 d早上空腹稱重，計算平均體重和平均日增重?？崭?4 h，于31 d早上屠宰前稱其體重，為宰前重。

耗料量:按重復投料和收集余料，計算出總耗料量、每只兔的日均耗料量。

平均日增重(the average daily gain，ADG)=(試驗末體重－試驗初重)/試驗天數(shù)

平均日采食量(the average daily intake，ADI)=試驗期總采食量/試驗天數(shù)

料重比(feed gain ratio，F(xiàn)/G)=平均日采食量/平均日增重

胴體重:肉兔屠宰后，放血，去頭、腳、皮、氣管、食管、心臟、肺、肝臟、胰臟、脾臟、腎臟、腺體、腸道、生殖器官、腹脂的重量。

胴體率(carcass rate，CR)=胴體重/宰前重×100%

耗料量:按重復投料和收集余料，計算出總耗料量、每只兔的日均耗料量［26］。

1．7．2 器官指數(shù) 肉兔屠宰后，分離其肝臟、脾臟、左腎，剔除臟器周圍脂肪后迅速稱其鮮重，準確記錄數(shù)據(jù)，按下列公式計算器官指數(shù)［26］。

肝臟指數(shù)(liver index，LI)=肝臟重(g)/宰前重(g)×100%

脾臟指數(shù)(spleen index，SI)=脾臟重(g)/宰前重(kg)

腎臟指數(shù)(kidney index，KI)=腎臟重(g)/宰前重(g)×100%

1．7．3 鋅含量測定 肝臟、脾臟、腎臟和背最長肌肉樣品經(jīng)干法灰化后用原子吸收分光法測定［26］鋅含量，結(jié)果換算成內(nèi)臟和肌肉鮮樣中鋅含量，結(jié)果用mg/kg表示。

1．8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

用Excel整理數(shù)據(jù)，用SPSS 13．0軟件中一維方差分析(One-way ANOVA)進行Duncan’s多重比較，然后用單因變量多因素方差分析(General Linear Model中Univaviate)進行方差分析，差異顯著用Duncan’s方法進行多重比較。所有數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標準差表示。

2 結(jié)果與分析

2．1 日糧鋅源及水平對幼兔生長性能及胴體率的影響

2．1．1 日糧處理對幼兔生長性能及胴體率的影響 由表2可以看出，日糧中添加鋅對幼兔平均日增重、平均日采食量、料重比和胴體率的影響有顯著性差異(P＜0．05)。

蛋氨酸鋅組隨著鋅添加水平提高，幼兔平均日增重、采食量、料重比呈現(xiàn)先提高后降低趨勢，3個指標變化趨勢一致;胴體率呈現(xiàn)由高到低再升高趨勢，與前3個指標變化趨勢不一致。個別組別差異不顯著(P＞0．05)。

硫酸鋅組隨著鋅添加水平提高，幼兔平均日增重呈現(xiàn)由高到低再升高趨勢，采食量、料重比、胴體率呈現(xiàn)由低到高再降低趨勢，4個指標變化趨勢不一致。個別組別差異不顯著(P＞0．05)。

2．1．2 日糧鋅源及鋅水平對幼兔生長性能和胴體率的影響 由表2、表3可以看出，兩種鋅源對幼兔日增重、料重比影響差異極顯著(P＜0．01);蛋氨酸鋅組的日增重、料重比極顯著高于硫酸鋅組(P＜0．01);兩種鋅源對幼兔平均日采食量、胴體率的影響無顯著性差異(P＞0．05);蛋氨酸鋅組的胴體率顯著低于硫酸鋅組(P＜0．05)。

日糧中添加不同水平的鋅對幼兔日增重、日采食量、料重比、胴體率的影響無顯著性差異(P＞0．05)。多重比較的結(jié)果顯示，隨著鋅添加水平的增加幼兔日采食量呈降低的趨勢，且210 mg/kg水平顯著低于70和105 mg/kg水平(P＜0．05);有提高幼兔生長性能和降低幼兔胴體率的趨勢，且蛋氨酸鋅的降低趨勢比硫酸鋅大。

表2 日糧處理對肉兔生長性能和胴體率的影響Table 2 Effect of zinc on the grow th performance and carcass rate of young rabbits

2．2 日糧鋅源及水平對肉兔器官指數(shù)的影響

2．2．1 日糧處理對幼兔器官指數(shù)的影響 由表4可以看出，日糧中添加不同水平和不同形式的鋅對幼兔肝臟指數(shù)的影響有顯著性差異(P＜0．05)，對幼兔脾臟指數(shù)的影響有極顯著性差異(P＜0．01)，對幼兔腎臟指數(shù)的影響無顯著性差異(P＞0．05)。

2．2．2 日糧鋅源及鋅水平對幼兔器官指數(shù)的影響由表4、表5可以看出，日糧中添加不同鋅源對幼兔的肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)和腎臟指數(shù)的影響均無顯著性差異(P＞0．05);日糧中添加不同水平的鋅對幼兔肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)和腎臟指數(shù)的影響均無顯著性差異(P＞0．05)。多重比較結(jié)果顯示，幼兔脾臟指數(shù)隨著日糧鋅含量的增加呈現(xiàn)下降趨勢，175和210 mg/kg水平的脾臟指數(shù)顯著低于105和140 mg/kg水平。日糧鋅添加形式和添加水平的交互作用對幼兔肝臟指數(shù)的影響差異極顯著(P＜0．01)，對幼兔脾臟指數(shù)的影響差異顯著(P＜0．05)，對幼兔腎臟指數(shù)的影響差異不顯著(P＞0．05)。結(jié)果表明，日糧中添加不同水平和形式的鋅對幼兔肝臟指數(shù)和腎臟指數(shù)的影響均無顯著性影響，但是添加水平和添加形式之間的交互作用對幼兔肝臟指數(shù)和脾臟指數(shù)的影響顯著，原因可能是蛋氨酸鋅與硫酸鋅在兔體內(nèi)的代謝方式不同有關(guān)。

表3 日糧鋅源及水平對肉兔生長性能和胴體率影響的方差分析Table 3 The ANOVA results of dietary zinc and their level to the grow th performance and carcass rate of young rabbits

2．3 日糧鋅源及水平對幼兔內(nèi)臟及肌肉鋅含量的影響

2．3．1 日糧處理對幼兔內(nèi)臟及肌肉鋅含量的影響 由表6可以看出，日糧中添加鋅對幼兔肝臟鋅含量和脾臟鋅含量的影響有極顯著差異(P＜0．01);對幼兔腎臟鋅含量的影響有顯著性差異(P＜0．05);對幼兔背最長肌鋅含量的影響無顯著性差異(P＞0．05)。日糧中添加鋅，有降低肝臟鋅含量、增加脾臟鋅含量和腎臟鋅含量的趨勢，但有些個別水平差異不顯著(P＞0．05)。

表4 日糧處理對肉兔器官指數(shù)的影響Table 4 Effect of zinc on purtenance index of young rabbits

2．3．2 日糧鋅源及鋅水平對內(nèi)臟及肌肉鋅含量的影響 由表6、表7可以看出，日糧中添加不同鋅源對幼兔的肝臟鋅含量、脾臟鋅含量、腎臟鋅含量和背最長肌鋅含量的影響均無顯著性差異(P＞0．05);日糧中添加不同水平的鋅對幼兔肝臟鋅含量、脾臟鋅含量、腎臟鋅含量和背最長肌鋅含量的影響均差異性不顯著(P＞0．05)。多重比較結(jié)果顯示，隨著日糧鋅添加水平升高，幼兔肝臟鋅含量呈現(xiàn)增加趨勢，但是差異不顯著(P＞0．05);幼兔脾臟鋅含量呈現(xiàn)先降低后增加的趨勢，175 mg/kg添加量時最低，210 mg/kg時最高，且210 mg/kg水平的脾臟鋅含量顯著高于175 mg/kg水平(P＜0．05)，其他3個水平分別與175和210 mg/kg水平差異不顯著(P＞0．05);幼兔腎臟鋅含量呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢，以140mg/kg水平最高，顯著高于70和210mg/kg水平(P＜0．05)，105和175mg/kg水平分別與其他3個水平差異不顯著(P＞0．05);幼兔背最長肌鋅含量未呈現(xiàn)明顯的變化規(guī)律，差異不顯著(P＞0．05)。鋅源和水平的交互作用對幼兔肝臟鋅含量、脾臟鋅含量的影響差異極顯著(P＜0．01)，對幼兔腎臟鋅含量、背最長肌鋅含量的影響差異不顯著(P＞0．05)。

表5 日糧鋅源及水平對肉兔器官指數(shù)影響的方差分析Table 5 The ANOVA results of dietary zinc and their level to purtenance index of young rabbits

結(jié)果表明，日糧中添加不同水平和形式的鋅對幼兔肝臟、脾臟、腎臟和背最長肌鋅含量的影響均無顯著性影響，但是添加水平和添加形式之間的交互作用對幼兔肝臟鋅含量和脾臟鋅含量的影響極顯著。

3 討論

3．1 鋅源及水平對幼兔生長性能的影響

本試驗進一步證實了日糧鋅能提高家兔生長性能，且不同鋅源及其水平對家兔促生長作用也不同，與已有研究［17-22］一致。有機鋅對幼兔的促生長作用優(yōu)于無機鋅。原因可能與動物對有機鋅生物學效價、吸收方式、轉(zhuǎn)化途徑等有關(guān)［27］。但是也有不同的意見，左建軍等［28］研究了硫酸鋅和蛋氨酸螯合鋅對肉用仔雞平均日增重、平均日采食量等均無明顯影響。之所以有不同結(jié)果，可能與試驗動物、試驗環(huán)境、日糧組成、評價方法等不同有關(guān)。

對于日糧鋅促進動物生長的機制，許梓榮和王敏奇［25］認為鋅能夠促進胰島素和胰島素樣生長因子I(IGF-1)的合成和分泌，加強合成代謝，從而獲得促生長效果。Lupu等［29］報道鋅能穩(wěn)定生長激素(GH)的結(jié)構(gòu)，而生長激素能夠促進組織的生長發(fā)育。Kennedy等［30］認為日糧中添加鋅能夠提高動物食欲，增加采食量，從而促進動物生長。

表6 日糧處理對肉兔組織鋅含量的影響Table 6 Effect of zinc on tissue zinc concentrations of young rabbits mg/kg

3．2 日糧鋅水平對肉兔脾臟、肝臟、腎臟指數(shù)的影響

試驗結(jié)果表明，日糧鋅水平能夠極顯著提高幼兔的脾臟指數(shù)，說明適量鋅能夠增強幼兔的免疫能力;超量添加鋅卻極顯著降低幼兔的脾臟指數(shù)，超量鋅能降低幼兔的免疫能力，所以在實際生產(chǎn)中應該注意飼料中鋅的最適添加量。這與盧昊等［31］在肉仔雞上研究結(jié)果相似。

試驗結(jié)果表明，日糧鋅水平顯著影響著幼兔的肝臟指數(shù)，以蛋氨酸鋅或者硫酸鋅形式添加70～140mg/kg時，顯著提高幼兔的肝臟指數(shù)，當日糧添加175和210 mg/kg鋅時降低了肝臟指數(shù)，但是否降低肝臟功能，有待于進一步研究。

表7 日糧鋅源及水平對肉兔組織鋅含量影響的方差分析Table 7 The ANOVA results of dietary zinc and their level to tissue zinc concentrations of young rabbits

試驗結(jié)果表明，日糧中添加鋅有增加幼兔腎臟指數(shù)的趨勢，但是日糧添加蛋氨酸鋅或者硫酸鋅各水平對幼兔腎臟指數(shù)無顯著性影響。腎臟是鋅的排泄器官，鋅在腎中的積聚速率快，周轉(zhuǎn)效率高。幼兔長期飼喂鋅含量較高的飼料，腎臟鋅的排泄量也增加，但是由于機體內(nèi)存在鋅穩(wěn)衡調(diào)節(jié)機制，而且大約90%的鋅經(jīng)糞排出［32］，可能導致腎臟貯存一定量的鋅，但是并不能出現(xiàn)顯著變化。

3．3 日糧鋅源及水平對組織鋅沉積的影響

許多研究表明，外源鋅對組織鋅含量有一定的影響，各組織器官對外源鋅濃度的敏感性不同［33-34］。本試驗結(jié)果表明，幼兔日糧中添加不同濃度的鋅，均能提高腎臟、脾臟鋅含量，與徐振華和李福昌［20］對新西蘭肉兔的研究結(jié)果一致。但是日糧中添加鋅反而降低了肝臟鋅含量，具體原因尚不明確，有待于進一步研究。

3．4 超量添加鋅對于幼齡兔生長性能與組織鋅沉積的影響

超量添加鋅，對于幼齡兔生長性能與組織鋅沉積的有顯著影響，但是，在試驗中尚未發(fā)現(xiàn)批量死亡，說明兔耐受性很強。從動物福利、生態(tài)、環(huán)保等角度，鋅不宜超量添加。

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