摘要：目的：觀察六堡茶對小鼠免疫功能的影響。方法：采用正常小鼠免疫器官測定法、碳粒廓清法和自然殺傷（natural killer，NK）細胞活性測定。結(jié)果：六堡茶可明顯增加小鼠單核—巨噬細胞的吞噬指數(shù)、提高NK細胞活性，但對小鼠的胸腺、脾臟指數(shù)無明顯影響。結(jié)論：六堡茶具有增強小鼠非特異性免疫功能的作用。

關(guān)鍵詞：六堡茶；自然殺傷細胞；吞噬指數(shù)

中圖分類號：R967文獻標識碼：A

文章編號：1007-2349（2013）02-0050-02

六堡茶以原產(chǎn)于廣西梧州市蒼梧縣六堡鄉(xiāng)而得名，生產(chǎn)歷史悠久，遠在唐代已有生產(chǎn)，屬我國特有的茶類—黑茶；六堡茶以紅、濃、陳、醇四絕著稱，具有清暑祛濕、明目健心、幫助消化、減肥除膩、利尿解毒等功效[1]，成人服用量是一次3g，一日3次。本文主要探討六堡茶對正常小鼠免疫功能的影響。

1材料

11動物健康KM小鼠160只，體重18～22 g，雌雄兼用，廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供（許可證號：SCXK桂2009-0002）。

12藥品與試劑六堡茶水提物，由研究者自行提取，性狀為棕褐色浸膏（每毫升相當于藥材187 g）。臨用時以蒸餾水配成相應(yīng)濃度使用。小牛血清，由美國Hyclone公司生產(chǎn)；RPMI l640，由美國Gibco公司生產(chǎn)；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

13儀器722型分光光度計（上海分析儀器廠）；二氧化碳培養(yǎng)箱（美國Queue公司）；超凈工作臺（上海浦東躍欣科學(xué)儀器廠）；自動酶標儀（美國Bio-Rad公司）。

2方法

21小鼠免疫器官系數(shù)測定[2]將小鼠隨機分為4組：正常對照組、六堡茶低劑量組（375 g/kg）、六堡茶中劑量組（75 g/kg）、六堡茶高劑量組（15 g/kg），每組10只。除正常對照組外，各組每天ig六堡茶1次，給藥體積20 mL/kg，正常對照組ig等體積的蒸餾水，連續(xù)30 d。每周稱體重1次，根據(jù)體重調(diào)整給藥量。末次給藥后次日，小鼠稱重，頸椎脫臼處死，取胸腺、脾臟稱濕重并計算胸腺和脾臟指數(shù)，胸腺或脾臟指數(shù)=胸腺或脾重（mg）/體重（g）。

22小鼠碳粒廓清實驗[3～4]分組及給藥同21。于尾靜脈注射1：3稀釋的印度墨汁，立即計時，于注入墨汁后2、10 min從眼內(nèi)眥靜脈采血20 μL，加入2 mL 01%Na2CO3溶液中，在600 nm波長處測光密度OD值。將小鼠處死，取肝臟和脾臟稱質(zhì)量，按文獻方法計算吞噬指數(shù)α。

23NK細胞活性測定[5]分組及給藥同21。連續(xù)30d后，頸椎脫臼處死，無菌取脾，制備脾細胞懸液，用乳酸脫氫酶法測定NK細胞活性。

NK細胞活性（%）=（反應(yīng)孔OD-自然釋放孔OD）/（最大釋放孔OD-自然釋放孔OD）×100%

24統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS130軟件對實驗數(shù)據(jù)進行單因素方差分析，各項數(shù)據(jù)均以（Ax-G ±s ）表示。

3結(jié)果

31六堡茶對小鼠免疫器官系數(shù)的影響由表1可見，各劑量組小鼠的胸腺和脾臟指數(shù)與正常對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>005），表明六堡茶對小鼠免疫器官的重量無明顯影響。

32六堡茶對小鼠碳粒廓清能力的影響 由表2見，六堡茶中、高劑量能明顯增加小鼠的吞噬指數(shù)（與正常對照組比較（P<005），低劑量組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（與正常對照組比較（P>005），表明六堡茶具有促進小鼠的單核—巨噬細胞碳粒廓清作用。

33六堡茶對小鼠NK細胞活性的影響 表3結(jié)果顯示，六堡茶高劑量組小鼠NK細胞活性明顯升高（與正常對照組比較，[FL）][SD1，1][FQ（20。175mm，X，DY-W][SQ+1mm][CD=175mm][FL（K8mm]P<005），中、低劑量組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（與正常對照組比較，P>005）。

4討論

六堡茶以原產(chǎn)于廣西梧州市蒼梧縣六堡鄉(xiāng)而得名，生產(chǎn)歷史悠久，屬我國特有的茶類—黑茶，目前有關(guān)六堡茶對免疫功能的影響研究較少。單核巨噬細胞系統(tǒng)是機體重要的防御系統(tǒng)，它具有強大而迅速的吞噬、廓清異物顆粒以及清除機體內(nèi)某些有害物質(zhì)。碳粒廓清法測定單核巨噬細胞功能是典型的一種觀察免疫系統(tǒng)功能的方法[6]。實驗結(jié)果顯示，六堡茶能明顯增加小鼠單核—巨噬細胞的吞噬指數(shù)，說明六堡茶能增強小鼠的非特異性免疫功能。NK細胞存在于機體的外周血、脾臟、淋巴結(jié)和骨髓細胞中，是一類無需抗原致敏，也不依賴抗體存在，對腫瘤細胞和病毒感染細胞具有天然殺傷作用的淋巴細胞。NK細胞活性可反映機體的非特異性免疫功能狀況[3]。本實驗結(jié)果表明，與正常對照組比較，六堡茶高劑量組小鼠的NK細胞活性明顯升高，說明六堡茶能增強機體的非特異性免疫功能。

參考文獻：

[1]楊錦泉廣西特產(chǎn)—六堡茶[J].茶業(yè)通報，1999，21（4）：31

[2]孫晶，徐儉木脂素對小鼠免疫功能的影響[J].哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2010，44（5）：467～470

[3]盧連華，周景洋，顏燕，等海參肽對小鼠免疫調(diào)節(jié)及抗疲勞能力的影響[J].山東醫(yī)藥，2009，49（25）：35～37

[4]劉寶劍，郭延生，曲亞玲，等紅車軸草總黃酮對小鼠免疫功能的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37（33）：16410～16411

[5]宋柏捷，朱孝娟，魏麗娜靈芝孢子粉對小鼠的免疫調(diào)節(jié)及抑瘤作用研究[J].哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2010，44（5）：464～466

[6]謝瑩，陳全斌，羅達偉，等高純度甜茶苷抗疲勞及免疫調(diào)節(jié)功能研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2010，21（6）：1421～1422