萬軍梅，李紅霞 （.武漢職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程學(xué)院，湖北 武漢430074；.湖北省腫瘤醫(yī)院，湖北 武漢430079）

癌癥患者在經(jīng)過手術(shù)、放療、化療后，在未完全恢復(fù)正常生活前，要經(jīng)歷相當(dāng)漫長的過渡時期，這個時期通常稱為康復(fù)期，也稱“繼續(xù)治療期”。康復(fù)期必須堅持繼續(xù)治療以防復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和擴散。中醫(yī)藥治療癌癥不僅表現(xiàn)在殺滅癌細胞、抑制腫瘤的臨床治療意義上，更體現(xiàn)在防止復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和提高患者生命質(zhì)量的康復(fù)治療過程中［1］。中醫(yī)藥在癌癥康復(fù)階段可起到“既病防變”和“治未病”的獨特作用［2］。癌復(fù)靈是湖北省腫瘤醫(yī)院研制的中藥復(fù)方制劑，具有健脾益氣、補血養(yǎng)陰、培元固本的功效，臨床上用于癌癥放療、化療及手術(shù)后康復(fù)期患者，能增強體質(zhì)調(diào)節(jié)免疫，促進手術(shù)后機體的恢復(fù)，有利于減少腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。通過對癌復(fù)靈的免疫功能調(diào)節(jié)和促進體力恢復(fù)作用的研究可以為其臨床應(yīng)用提供一定的藥效學(xué)依據(jù)。

1 材料

1.1 藥品與試劑 癌復(fù)靈，灰棕色浸膏（湖北省腫瘤醫(yī)院藥劑科提供，批號20090316），1g浸膏相當(dāng)于生藥材6g，臨用前用純化水稀釋至所需濃度；環(huán)磷酰胺（CTX，200 mg／瓶，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，批號09061721）；羊抗小鼠IgG 10mg（華美生物工程公司，批號GM6030302E）；綿羊紅細胞（SRBC）、豚鼠血清由湖北省實驗動物研究中心提供；2－巰基乙醇（2－ME）（100mL／瓶，市售）。

1.2 動物 昆明種小鼠，SPF 級，體質(zhì)量18～20 g，雌雄兼用，由湖北省實驗動物研究中心提供，動物合格證號：SCXK（鄂）2008－0005。

1.3 瘤株 小鼠肉瘤180（S180），由華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院藥物研究所提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 對荷瘤小鼠化療后血清溶血素含量和脾細胞分泌抗體功能的影響 小鼠60只，隨機分為6組，每組10只。分組情況如下（括號內(nèi)為給藥方式）：A.正常對照組：純化水（ig）；B.荷瘤對照組：純化水（ig）；C.荷瘤＋CTX：CTX 腹腔注射（ip）；D.荷瘤＋CTX＋癌復(fù)靈大劑量：CTX（ip），癌復(fù)靈4g·kg－1（ig）；E.荷瘤＋CTX＋癌復(fù)靈中劑量：CTX（ip），癌復(fù)靈2g·kg－1（ig）；F.荷瘤＋CTX＋癌復(fù)靈小劑量：CTX（ip），癌復(fù)靈1g·kg－1（ig）。實驗安排如下：（1）實驗周期20d，灌胃給藥每天一次，連續(xù)20 d；（2）荷瘤：實驗第8天，按常規(guī)方法［3］給B～F 組小鼠右腋皮下接種S180瘤液0.2mL／只；（3）化療：瘤株接種后第1、5、10天分別給C～F 組小鼠ip CTX 50mg·kg－1，共3次；（4）免疫：分別于實驗第7 天及第14天ip 20%SRBC 0.2mL／只免疫全部小鼠；（5）實驗：末次灌胃給藥后24h，小鼠摘眼球放血，取血清按文獻方法［4］測IgG 及IgM，溶血素含量（hemolysin concentration，HC）分別以HCIgG、HCIgM及HCIg（HCIgG＋HCIgM）表示。同時，取胸腺、脾臟稱重，計算臟器指數(shù)，并將每組脾臟混合制備脾細胞懸液，按文獻法［4］測定抗體分泌細胞的功能。結(jié)果見表1、表2。

表1結(jié)果顯示，小鼠荷瘤后，與正常對照組比較IgG 含量無變化，IgM 含量有所提高，但無明顯差異；荷瘤后用CTX 化療，IgG 及IgM 含量明顯下降，與荷瘤對照組比較P＜0.01，而癌復(fù)靈4g·kg－1能明顯對抗化療所致的IgM 含量下降，改善化療小鼠的體液免疫功能，對化療所致的IgG 含量降低無明顯影響。

表1 癌復(fù)靈對荷瘤小鼠化療后血清溶血素含量的影響（±s，n＝10）Tab 1 Effect of Aifuling on the content of serum hemolysin in tumor－bearing mice（±s，n＝10）

表1 癌復(fù)靈對荷瘤小鼠化療后血清溶血素含量的影響（±s，n＝10）Tab 1 Effect of Aifuling on the content of serum hemolysin in tumor－bearing mice（±s，n＝10）

注：與荷瘤對照組比較，aP＜0.01；與CTX 組比較，b P＜0.01

表2 癌復(fù)靈對荷瘤小鼠化療后脾細胞分泌抗體功能的影響（±s，n＝10）Tab 2 Effect of Aifuling on spleen antibody－secreting cell function in mice（±s，n＝10）

表2 癌復(fù)靈對荷瘤小鼠化療后脾細胞分泌抗體功能的影響（±s，n＝10）Tab 2 Effect of Aifuling on spleen antibody－secreting cell function in mice（±s，n＝10）

注：與荷瘤對照組比較，aP＜0.05，b P＜0.01；與CTX 組比較，c P＜0.01

表2結(jié)果表明，荷瘤小鼠經(jīng)CTX 化療后，脾細胞分泌抗體功能明顯減弱，而癌復(fù)靈4g·kg－1可明顯對抗CTX 的作用，顯著增強脾細胞分泌抗體的功能。各劑量組對CTX 所致的免疫器官質(zhì)量減輕無明顯影響。

2.2 對SRBC所致的荷瘤小鼠遲發(fā)型足墊腫脹的影響 小鼠60 只，隨機分為6 組，分組方式同前。小鼠連續(xù)ig 14d，第7天同前給B～F 組小鼠接種S180瘤株，荷瘤后第1 天及第5 天給C～F 組小鼠CTX 50mg·kg－1（ip），共2次。給藥第10天，所有小鼠ip SRBC 2.0×108個致敏。第14 天末次ig給藥后，每鼠右后足墊皮下注射SRBC 2.0×108個攻擊，左后足墊皮下注射等量生理鹽水作對照。24h后采用盲法用游標(biāo)卡尺由兩個觀察者對實驗小鼠后足墊厚度進行測量，以左右足墊的厚度差作為足墊腫脹度指標(biāo)［5］，結(jié)果見表3。

表3 癌復(fù)靈對SRBC 致荷瘤小鼠遲發(fā)型足墊腫脹的影響（±s，n＝10）Tab 3 Effect of Aifuling on the delayed footpad reaction caused by SRBC（±s，n＝10）

表3 癌復(fù)靈對SRBC 致荷瘤小鼠遲發(fā)型足墊腫脹的影響（±s，n＝10）Tab 3 Effect of Aifuling on the delayed footpad reaction caused by SRBC（±s，n＝10）

注：與荷瘤對照組比較，aP＜0.01；與CTX 組比較，b P＜0.05

表3結(jié)果表明，CTX 能明顯抑制足墊腫脹度，而癌復(fù)靈4g·kg－1能明顯對抗CTX 所致的足墊腫脹度降低，改善化療小鼠的細胞免疫功能。

2.3 對荷瘤小鼠化療后手術(shù)恢復(fù)期體力的影響——小鼠游泳試驗 小鼠50只，按常規(guī)方法接種S180瘤株后隨機分為5組，分組方式見表4。各組于荷瘤后第4 天、第7 天分 別予CTX 80 mg·kg－1（ip），共2次，第8天在無菌條件下摘除腋下腫瘤，同時開始灌胃給藥，CTX 組給純化水，連續(xù)8d。末次給藥后30 min，按文獻［3］法將小鼠放入水槽進行游泳試驗，水深25cm，水溫（20±0.5）℃，記錄自落水開始至鼻孔沉下水面所需時間，結(jié)果見表4。

表4 癌復(fù)靈對荷瘤小鼠化療后游泳時間的影響（±s，n＝10）Tab 4 Effect of Aifuling on the swimming time in tumorbearing mice（±s，n＝10）

表4 癌復(fù)靈對荷瘤小鼠化療后游泳時間的影響（±s，n＝10）Tab 4 Effect of Aifuling on the swimming time in tumorbearing mice（±s，n＝10）

注：與CTX 組比較，aP＜0.05

表4結(jié)果顯示，西洋參和癌復(fù)靈4g·kg－1均能明顯延長小鼠游泳時間，有效改善化療后手術(shù)恢復(fù)期體力。

3 討論

腫瘤患者由于腫瘤的長期侵襲，機體素質(zhì)明顯下降，如再經(jīng)手術(shù)切除、化療、放療的持續(xù)打擊，大多數(shù)患者會處于氣血兩虛，免疫功能低下的狀況?？祻?fù)期的中醫(yī)藥治療以扶正固本為最基本治則，而改善或促進免疫系統(tǒng)功能是扶正固本治則最重要的藥理學(xué)基礎(chǔ)［6］。

癌復(fù)靈由黃芪、黨參、白術(shù)、茯苓、女貞子、丹參、蛇舌草、夜交藤等15味中藥經(jīng)水煎醇沉濃縮干燥而成，方中黃芪黨參補氣，白術(shù)茯苓健脾，女貞子補益肝腎，丹參夜交藤養(yǎng)血安神，整方兼顧氣血陰陽達到扶正固本的功效，臨床上用于癌癥康復(fù)期患者，具有增強免疫，促進體力恢復(fù)，預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的作用。現(xiàn)代研究表明，黃芪、茯苓、女貞子及丹參均能增強機體的免疫功能。研究結(jié)果顯示，中藥復(fù)方癌復(fù)靈能明顯對抗CTX 化療所致的IgM 含量降低；顯著增強化療小鼠脾細胞分泌抗體的功能；能明顯對抗CTX 對SRBC所致足墊腫脹的抑制作用；能明顯延長化療后手術(shù)恢復(fù)期小鼠的游泳時間。說明癌復(fù)靈對荷瘤小鼠化療后的細胞免疫及體液免疫功能均有增強作用，并能有效改善化療后手術(shù)恢復(fù)期體力。藥理實驗結(jié)果為該藥的臨床應(yīng)用提供了一定的理論依據(jù)，關(guān)于其免疫調(diào)節(jié)作用的機制和抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用有待進一步研究。

［1］ 施志明.中醫(yī)中藥抗腫瘤轉(zhuǎn)移研究進展［J］.ITAC 國際中醫(yī)藥腫瘤學(xué)術(shù)大會，2007：38－42.

［2］ 張建中.中醫(yī)藥在癌癥康復(fù)領(lǐng)域大有作為［J］.家庭中醫(yī)藥，2007，4：20.

［3］ 李儀奎.中藥藥理實驗方法學(xué)［M］.2版.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2006：513－515.149.

［4］ 徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學(xué)［M］.3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：1230－1231.

［5］ H.G.沃格爾，W.H.沃格爾.藥理學(xué)實驗指南—新藥發(fā)現(xiàn)和藥理學(xué)評價［M］.北京：科學(xué)出版社，2001：583.

［6］ 薛文翰，巨玉蓮.中醫(yī)扶正固本在治療惡性腫瘤中的應(yīng)用及機理探討［J］.甘肅醫(yī)藥，2011，30（10）：664－666.