劉麗麗 王健 吳巍 王海勝 閆艷春

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院，北京 100081）

1981年美國俄勒岡大學(xué)著名遺傳學(xué)家George Streisinger在《Nature》雜志上發(fā)表關(guān)于斑馬魚人工雌核發(fā)育的研究論文，標(biāo)志著斑馬魚開始進入實驗室模式生物研究領(lǐng)域，至今已有超過30年的歷史。20世紀(jì)90年代中國開始參與斑馬魚研究。近幾年，隨著斑馬魚模式生物南方中心、北方中心和國家種質(zhì)資源庫相繼成立，中國斑馬魚研究也開始進入高速發(fā)展階段。由于體積小、代時短、胚胎透明、體外發(fā)育等特點，斑馬魚在模式生物研究中的地位越來越重要。隨著顯微注射、重組體構(gòu)建以及熒光標(biāo)記等技術(shù)的快速發(fā)展，轉(zhuǎn)基因斑馬魚已經(jīng)廣泛用于脊椎動物基因表達調(diào)控、發(fā)育分化、形態(tài)發(fā)生、人類疾病、藥物篩選和環(huán)境檢測等研究領(lǐng)域。本文將就斑馬魚在轉(zhuǎn)基因動物研究中的應(yīng)用進行介紹，并對該領(lǐng)域存在的問題進行總結(jié)。

1 常見模式生物

1.1 模式生物的發(fā)展歷史

模式生物（model organism）能夠代表一類生物的基本特點，結(jié)構(gòu)相對簡單并易于進行試驗操作，因此普遍用于遺傳學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、生理學(xué)和分子細(xì)胞學(xué)等方面的研究。其普遍特點是：首先，生理特征能夠代表生物界的某一大類群；其次，試驗材料容易獲得，并易于在實驗室內(nèi)飼養(yǎng)、繁殖速度快，研究維持費用低；最后，容易進行試驗操作，特別是遺傳學(xué)分析［1］。一般認(rèn)為模式生物的應(yīng)用源于格里高·約翰·孟德爾（Gregor Johann Mendel）以豌豆為材料對遺傳學(xué)的研究。1866年孟德爾曾發(fā)表文章說他的試驗是“解決問題的唯一方法”。此后對模式生物的選擇遵循兩個方面的原則：一是該物種在系統(tǒng)進化中的地位符合研究目的，二是該物種特性適于特定研究的試驗需要［2］。在漫長的科學(xué)研究歷史中，各領(lǐng)域發(fā)展了多種模式生物，如大腸桿菌、釀酒酵母、秀麗隱桿線蟲、海膽、果蠅、擬南芥及小鼠等。模式生物的應(yīng)用大大促進了基礎(chǔ)生命科學(xué)和實驗技術(shù)的發(fā)展。為闡明模式生物的遺傳背景，促進基因組研究，人類基因組計劃（HGP）最先提出模式生物基因組計劃，并初步確定了6種模式生物：大腸桿菌、酵母、線蟲、果蠅、擬南芥和小鼠。

1.2 模式生物的各自特點及應(yīng)用領(lǐng)域

自從萊德伯格（Joshua Lederberg）應(yīng)用大腸桿菌（Escherichia coli，E. coli）進行遺傳學(xué)研究以來［3］，大腸桿菌迅速成為廣泛應(yīng)用的原核模式生物。它具有遺傳背景清楚、操作技術(shù)簡便、成本低、易于大規(guī)模培養(yǎng)等特點和優(yōu)點，而且還特別適合作為外源基因表達的宿主。因此，大腸桿菌是目前應(yīng)用最廣泛、最成功的克隆原核基因的表達體系。釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）作為最簡單的低等單細(xì)胞真核生物之一，是研究細(xì)胞周期、胚胎形態(tài)發(fā)生、染色體穩(wěn)定性和衰老的優(yōu)秀模型，哈特維爾（Leeland H. Hartwell）和納斯（P. M. Nurse）以釀酒酵母為材料，為揭示細(xì)胞周期的調(diào)控機理作出了重要貢獻。前者提出了細(xì)胞周期關(guān)卡（cell-cycle checkpoint）的概念，并確定了大量的控制細(xì)胞周期的基因（cdc），后者從粟酒酵母（S. pombe）中分離到第一個基因cdc2，并提出來相關(guān)的調(diào)控體系［4］。秀麗隱桿線蟲（Caenorhabditis elegans）結(jié)構(gòu)非常簡單，一條雌雄同體的秀麗隱桿線蟲只有不超過1 000個細(xì)胞，遵循特定的分裂模式。同時，它還具有多細(xì)胞生物的基本特征，如復(fù)雜的器官系統(tǒng)（complex organ system）、社會行為、性行為和學(xué)習(xí)行為等，為傳染性疾?。?］和多種人類疾?。?］的研究提供模型。許多生物進化的保守機制都是通過秀麗隱桿線蟲闡明的，包括程序性細(xì)胞死亡（programmed cell death）［7］、胰島素信號［8］、衰老［9］和神經(jīng)生物學(xué)（neurobiology）［10］，也使自然免疫和RNA干擾（RNAi）機制的研究取得了巨大進展［11］。20世紀(jì)70-80年代，基于對果蠅（Drosophila melanogaster）的研究工作，興起了胚胎學(xué)和分子生物學(xué)，從此果蠅成為遺傳學(xué)研究最重要的材料之一。試驗中分離鑒定到大量的果蠅突變體，促進了動物發(fā)育學(xué)和疾病的研究。擬南芥（Arabidopsis thaliana）是植物界最重要的模式生物，在研究器官發(fā)育、植物干細(xì)胞生 物 學(xué)［12］、圖 式 形 成（pattern formation）［13］、先天免疫（innate immunity）［14］、晝夜節(jié)律（circadian rhythm）［15］、各種性征的自然突變［16］以及諸多發(fā)育機制中都取得了重要的進展。由于與人類的近親關(guān)系，小鼠（Musmusculus）是人類基因組研究最主要的模式生物之一，也是哺乳動物研究領(lǐng)域最重要的模式生物，廣泛用于發(fā)育學(xué)、分子生物學(xué)、分子遺傳學(xué)、免疫學(xué)和生物醫(yī)學(xué)等研究領(lǐng)域［17］。小鼠為人類疾病的研究，包括癌癥、動脈粥樣硬化、高血壓、糖尿病、骨質(zhì)疏松和青光眼等作出巨大貢獻。同時，基因組的靶標(biāo)操作［18］、正向遺傳突變篩選［19］和體外成像技術(shù)［20］的高速發(fā)展也使小鼠成為干細(xì)胞研究的主要模式生物之一。

2 斑馬魚作為模式生物的優(yōu)越性

作為模式生物，斑馬魚（Danio rerio）不僅有脊椎生物的一般特點，而且具備諸多技術(shù)優(yōu)勢：飼養(yǎng)簡單、成本較低、繁殖力強、胚胎透明、個體較小、時代時間短、遺傳信息豐富、擁有大量實驗室突變系、可進行正向和反向遺傳分析等［21，22］。

斑馬魚個體較小，可以在較小的空間里繁殖高密度的種群，利于節(jié)省試驗成本。時代時間較短，僅3-4個月，有助于長期的遺傳學(xué)研究。實驗室條件下，斑馬魚可常年產(chǎn)卵，允許連續(xù)大規(guī)模繁殖后代。通常，雌性每周可產(chǎn)卵一次，每次產(chǎn)卵50-200枚。胚胎發(fā)育快，受精后24 h（hpf）身體成型，大部分器官96 hpf內(nèi)發(fā)育完全。斑馬魚胚胎個體小，可在微孔反應(yīng)板上培養(yǎng)；與哺乳動物胚胎在子宮內(nèi)發(fā)育的情況不同，斑馬魚是體外發(fā)育（圖 1），便于人工操作，如通過控制培養(yǎng)液直接對胚胎進行水處理（water treatment）；胚胎透明度高，且發(fā)育快速，易于觀察，適于進行顯微注射。斑馬魚全基因組測序已于2005年完成（http：//zebrafish.org/zirc/home/guide.php），豐富的遺傳信息為確定斑馬魚各種生物學(xué)參數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)值、鑒定試驗突變體提供了依據(jù)。基于實驗室研究的迅速發(fā)展，現(xiàn)已獲得多種具有不同特性的斑馬魚突變品系，能滿足不同試驗需求［23］。

圖1 斑馬魚體外受精

豐富的遺傳信息、充足的突變體材料和多種技術(shù)優(yōu)勢使斑馬魚成為脊椎生物發(fā)育學(xué)、遺傳學(xué)、生態(tài)學(xué)、基礎(chǔ)生物醫(yī)藥學(xué)、毒理學(xué)等多個領(lǐng)域的優(yōu)秀模式生物。（1）斑馬魚體外受精，胚胎透明度高，可活體觀察表型變化，進行表型篩選 。（2）高度的光學(xué)透明性也允許在保持胚胎完整的條件下，甚至活體條件下，對相關(guān)基因的時空表達模式進行觀察分析。如通過整體胚胎原位雜交技術(shù)檢測基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的表達［24］，或通過免疫組化技術(shù)檢測基因翻譯產(chǎn)物的表達，其他技術(shù)如RT-PCR、免疫共沉淀也可用于斑馬魚基因表達信息研究［25］。（3）后代數(shù)目大、胚胎體積小、發(fā)育快，允許斑馬魚用于高通量篩選，而且許多人類疾病在胚胎早期即表現(xiàn)病變性狀［26］，其在表形篩選方面的獨特優(yōu)勢使斑馬魚成為發(fā)現(xiàn)新藥的有效藥理學(xué)工具［27］。（4）斑馬魚還用于研究傳染性和遺傳性人類疾病的研究，如分歧桿菌?。?8］和神經(jīng)性疾?。?9］。（5）可利用斑馬魚進行正向遺傳篩選發(fā)現(xiàn)疾病中基因的新功能。斑馬魚是迄今為止唯一能進行大規(guī)模正向遺傳篩選的脊椎動物［30］。（6）斑馬魚也是常用的脊椎動物毒理學(xué)模型，用作生態(tài)毒理學(xué)測試物種，檢測水質(zhì)中化學(xué)物質(zhì)對魚類生存、生長和繁殖狀況的影響。但基于動物權(quán)益維護和環(huán)境保護的需要，目前斑馬魚胚胎毒理學(xué)測試僅作為備用手段用于減少或代替實時監(jiān)測 。

但實驗室養(yǎng)殖斑馬魚也有困難，該種群易發(fā)生微孢子蟲病和分枝桿菌病，這兩種難治愈且不易根除的傳染性疾?。?1］。此外，斑馬魚生物學(xué)和生態(tài)學(xué)的信息還十分有限［32］，基因組數(shù)據(jù)庫也不完善，不能滿足當(dāng)前研究的需要。目前斑馬魚的反向遺傳學(xué)手段應(yīng)用較少，使用特殊設(shè)計并合成的嗎啉代寡聚核糖核酸（morpholino）可以暫時性的抑制目的基因的表達。

3 斑馬魚轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展現(xiàn)狀

20世紀(jì)80年代，中國科學(xué)院朱作言領(lǐng)導(dǎo)的實驗室在世界上率先開展了魚類基因工程定向育種研究，建立了完整的轉(zhuǎn)基因魚理論模型和完善的試驗技術(shù)體系，為轉(zhuǎn)基因魚育種奠定了理論基礎(chǔ)［33］。30年來，斑馬魚轉(zhuǎn)基因技術(shù)的迅速發(fā)展為斑馬魚基礎(chǔ)理論研究和實際應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。目前，實驗室有幾種技術(shù)成功用于斑馬魚轉(zhuǎn)基因研究。

3.1 顯微注射技術(shù)

斑馬魚胚胎顯微注射技術(shù)是進行基因瞬時表達、過量表達、降低表達、制備轉(zhuǎn)基因斑馬魚或誘發(fā)突變的重要手段，該方法操作相對簡單、效果可靠，是斑馬魚轉(zhuǎn)基因研究的主要方法，獲得轉(zhuǎn)基因斑馬魚種系的頻率為10%-30%［34］。一般認(rèn)為，質(zhì)粒DNA注射到受精卵細(xì)胞質(zhì)后立即形成大分子量多聯(lián)體（concatemers），并可能參與基因重組［35］。但是外源基因的多聯(lián)體整合，容易為染色體內(nèi)重組提供條件，最終可能導(dǎo)致外源基因表達的改變。

3.2 GAL4/UAS系統(tǒng)和Tol2轉(zhuǎn)座子

顯微注射技術(shù)通常使用含標(biāo)記蛋白的質(zhì)粒載體（如pEGFP-N1），現(xiàn)在一些其他類型的載體也用于斑馬魚轉(zhuǎn)基因研究。GAL4/UAS轉(zhuǎn)錄激活系統(tǒng)可以同時表達兩個外源基因，以提高其在宿主細(xì)胞中表達水平［36］，并越來越多的用于斑馬魚基因調(diào)控和轉(zhuǎn)錄沉默機制的研究。通常斑馬魚中使用的Tol2轉(zhuǎn)座子去除了內(nèi)部原有的轉(zhuǎn)座酶編碼區(qū)域并用EGFP基因序列代替，注射時將其與轉(zhuǎn)座酶一起轉(zhuǎn)到斑馬魚受精卵中，轉(zhuǎn)座酶以一定幾率完整切割轉(zhuǎn)座元件，這些轉(zhuǎn)座元件隨之整合到斑馬魚基因組中。有學(xué)者將Gal4/UAS與Tol2元件聯(lián)合使用，成功實現(xiàn)了斑馬魚基因組水平上的插入表達［37］。

3.3 擬型反轉(zhuǎn)錄病毒和桿狀病毒介導(dǎo)法

擬型反轉(zhuǎn)錄病毒也已經(jīng)成功用于斑馬魚研究，它的插入效率比Tol2轉(zhuǎn)座子更高，而且與顯微注射相比，使用該方法得到的轉(zhuǎn)基因奠基者（transgenic founder）之間表達范圍的差異性比較小。盡管如此，由于逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)基因技術(shù)所需的構(gòu)建、包裝、效價評定和轉(zhuǎn)染耗時較長，因此該技術(shù)不能用于常規(guī)轉(zhuǎn)基因斑馬魚的構(gòu)建和啟動子及基因功能的分析［38］。重組桿狀病毒介導(dǎo)法是一種更新的方法。桿狀病毒可以高效地轉(zhuǎn)導(dǎo)哺乳動物細(xì)胞，Huang等［39］對桿狀病毒加以改進：使用巨細(xì)胞病毒早早期啟動子（CMV-IE），以加強型綠色熒光蛋白（EGFP）作報告基因。結(jié)果發(fā)現(xiàn)重組桿狀病毒可以將外源基因高效地導(dǎo)入已分化的魚類細(xì)胞，轉(zhuǎn)基因細(xì)胞培養(yǎng)15 d內(nèi)熒光持續(xù)較高亮度，繼續(xù)培養(yǎng)一段時間可觀察到熒光細(xì)胞的數(shù)目并未減少。

3.4 熒光標(biāo)記

圖2 轉(zhuǎn)基因斑馬魚（5 dpf，受精后5 d）在激發(fā)光下表達熒光

隨著綠色熒光蛋白（GFP）的發(fā)現(xiàn)及其晶體結(jié)構(gòu)的破解，GFP越來越多地作為報告基因用于轉(zhuǎn)基因研究。除野生型GFP外，現(xiàn)已發(fā)展了3種突變體，EGFP、GFP-S65T和RS-GFP［40］。GFP作為報告基因無需底物，現(xiàn)象明顯易于觀察，反應(yīng)更敏感，成為轉(zhuǎn)基因斑馬魚報告基因的理想選擇（圖2）。2003年，新加坡國立大學(xué)宮之遠(yuǎn)教授成功將綠色、紅色、黃色和橙色熒光蛋白與肌肉特異性mylz-2啟動子融合，成功構(gòu)建了在骨骼肌高度表達熒光蛋白的各色轉(zhuǎn)基因斑馬魚品系，日光和紫外燈下都可以肉眼觀察到轉(zhuǎn)基因斑馬魚發(fā)出熒光［41］。

4 轉(zhuǎn)基因斑馬魚的應(yīng)用前景

由于胚胎體積小、透明度高、發(fā)育快等特點，斑馬魚成為研究脊椎動物基因表達調(diào)控和發(fā)育分化、形態(tài)發(fā)生、人類疾病、藥物篩選和環(huán)境檢測等領(lǐng)域最重要的模式生物之一。

4.1 轉(zhuǎn)基因斑馬魚用于基因表達和發(fā)育調(diào)控研究

以斑馬魚為模式生物，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，科學(xué)家們對脊椎動物熱生物學(xué)進行了系統(tǒng)的研究，包括溫度對斑馬魚生長發(fā)育、繁殖和性別分化的影響，溫度對生理節(jié)律、動物行為的調(diào)節(jié)，溫度對基因表達（如熱激蛋白）的影響等。此外，對生物鐘系統(tǒng)、細(xì)胞周期、神經(jīng)發(fā)育學(xué)都有廣泛的研究。孟安明，林碩［42］利用斑馬魚GATA-2基因5'側(cè)翼調(diào)控序列和GFP基因，獲得了只在中樞神經(jīng)細(xì)胞表達GFP或在神經(jīng)細(xì)胞和表層細(xì)胞都表達GFP的轉(zhuǎn)基因斑馬魚種系，同時還進一步證實了GATA-2基因在胚胎發(fā)育中的時空表達譜。

4.2 活體形態(tài)發(fā)生和細(xì)胞遷移研究

為觀察胰外分泌腺細(xì)胞的分化、增殖和形態(tài)發(fā)生，用彈性蛋白酶A啟動子調(diào)控GFP在斑馬魚胰腺外分泌腺中特異性表達，發(fā)現(xiàn)胰腺在發(fā)育早期是一個緊密結(jié)合的實體，然后沿腸向后延伸［43］。Kawakami等［44］將GFP融合斑馬魚nanos1基因3' UTR，合成RNA后注射到幾種硬骨魚體內(nèi)，成功觀察到原生殖細(xì)胞向生殖脊遷移，但是這種方法目前并不能適用于所有硬骨魚類。

4.3 人類免疫性疾病、自體吞噬和神經(jīng)性疾病的研究

斑馬魚遺傳操作簡單，已經(jīng)成功用于多種人類疾病模型的構(gòu)建，在研究人類疾病發(fā)病機理、治療手段等方面作出了卓越貢獻。例如，通過斑馬魚啟動子表達顯性突變基因，構(gòu)建熒光重組體，瞬時過表達和反義基因敲除技術(shù)的應(yīng)用，對人類中央核性疾病、亨廷頓舞蹈癥、多谷氨酰胺疾病和老年癡呆癥等多種疾病進行了深入研究［45］。

4.4 熒光魚篩查突變體、阻斷特殊發(fā)育途徑的小分子或抑制正常發(fā)育的毒素

Wan等［43］將elaA：gfp轉(zhuǎn)入猥因子接受缺陷型斑馬魚突變體slow muscle omitted，發(fā)現(xiàn)猥因子為外分泌腺形態(tài)發(fā)生所必需，但不影響細(xì)胞分化。對該轉(zhuǎn)基因品系進行嗎菲林基因敲除和毒劑介導(dǎo)的細(xì)胞切除，發(fā)現(xiàn)胰腺外分泌腺發(fā)育依賴Islet-1基因。注射elaA啟動子驅(qū)動的白喉毒素DTA導(dǎo)致外分泌細(xì)胞選擇性消融，但內(nèi)分泌腺和其他內(nèi)胚層發(fā)育來的器官不受影響。該研究成功揭示了猥因子和白喉毒素對胰腺正常發(fā)育的重要影響?；驘晒鈽?biāo)記魚類與反求遺傳學(xué)方法聯(lián)合起來可以分析在特殊的發(fā)育途徑中已知基因的作用規(guī)律。

4.5 轉(zhuǎn)基因斑馬魚用于生態(tài)環(huán)境監(jiān)測

近年來，國內(nèi)外運用轉(zhuǎn)基因斑馬魚檢測水體環(huán)境中的重金屬毒性、環(huán)境激素、綜合毒性和有機污染物毒性等，成效顯著，日益受到關(guān)注。目前主要通過3種途徑使用轉(zhuǎn)基因斑馬魚對環(huán)境污染物進行監(jiān)測［46］。第一種方法是使用整合了大量大腸桿菌穿梭載體的轉(zhuǎn)基因斑馬魚檢測環(huán)境誘變劑，如以熒光定位的轉(zhuǎn)換來測試誘變劑的活性；第二種方法是使用受到不同環(huán)境污染物，如芳烴、重金屬或環(huán)境雌激素污染影響的啟動調(diào)控元件，利用該元件誘導(dǎo)熒光或熒光酶的表達；第三種方法是利用組織特異性表達的熒光魚篩選隨特殊發(fā)育途徑產(chǎn)生特殊作用的環(huán)境毒素。

在受熱、重金屬等壓力脅迫條件下，生物體細(xì)胞中的熱激蛋白HSP會在保護和修復(fù)途徑中發(fā)揮重要作用。Seok等［47］利用斑馬魚轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究硫酸銅對人類HSP70啟動子的特異性激活，表明斑馬魚可以作為轉(zhuǎn)基因生物傳感器檢測環(huán)境中的異生毒性物質(zhì)。紀(jì)喜文等［48］構(gòu)建了一種GFP 轉(zhuǎn)基因斑馬魚報告系統(tǒng)。利用芳香烴反應(yīng)元件AHRDtk 控制報告基因綠色熒光蛋白在斑馬魚體內(nèi)的表達，通過顯微鏡觀察轉(zhuǎn)基因斑馬魚體內(nèi)的綠色熒光表達情況，可以直觀判斷水環(huán)境中是否含有該類化學(xué)物質(zhì)。上海復(fù)旦大學(xué)的研究人員［49］經(jīng)過多年研究，成功構(gòu)建了卵黃蛋白原1（vtg1）啟動子調(diào)控綠色熒光蛋白表達的轉(zhuǎn)基因斑馬魚品系，可以簡便直觀快速地監(jiān)測環(huán)境中的雌激素類物質(zhì)，如β-雌二醇（E2）、氯化鎘（CdCl2）、玉米烯酮和雌三醇（E3）等。

5 斑馬魚轉(zhuǎn)基因技術(shù)待解決的問題

由于斑馬魚基因組為二倍體，目前鑒定到的許多同源基因，尚不能確定是真正的同源基因還是由于注釋不完整而對同一基因的不同解釋，所以斑馬魚數(shù)據(jù)庫亟待完善。斑馬魚轉(zhuǎn)基因技術(shù)最主要的問題仍然是基因轉(zhuǎn)化效率問題。目前最可靠、最普遍的方法是顯微注射，該方法對操作人員的技術(shù)水平要求很高，在操作精確的條件下，轉(zhuǎn)化率最高也僅維持在30%左右。另一個問題是嵌合體問題。由于基因整合的隨機性和多樣性，轉(zhuǎn)基因魚親本是攜帶外源基因的嵌合體，外源基因在各個性腺細(xì)胞基因組內(nèi)的整合的數(shù)量與位點不盡相同，由此導(dǎo)致子代群體在攜帶外源基因（包括數(shù)量和整合位點）上出現(xiàn)分離［33］。其他問題包括因使用其他物種的啟動子序列可能導(dǎo)致的轉(zhuǎn)基因沉默，外源基因整合位點的隨機性，外源基因整合形成多聯(lián)體等。

綜上所述，斑馬魚因具有體積小、代時短、胚胎透明、體外發(fā)育等獨特的優(yōu)勢，使之成為轉(zhuǎn)基因動物研究領(lǐng)域最重要的模式生物之一，在研究基因表達、發(fā)育調(diào)控、形態(tài)發(fā)生、細(xì)胞遷移、人類疾病、發(fā)育毒素、環(huán)境監(jiān)測、藥物篩選等領(lǐng)域作出巨大貢獻。作為新型模式生物，轉(zhuǎn)基因斑馬魚在各領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用的同時，其理論研究和操作技術(shù)都亟待發(fā)展：外源基因在斑馬魚胚胎細(xì)胞內(nèi)的重組機制尚不明確；基因轉(zhuǎn)化效率有待提高；轉(zhuǎn)基因斑馬魚體系的代系維持需要加強，同時還需要尋找更加高效靈敏的報告基因。隨著研究理論和技術(shù)手段的日趨成熟，模式生物斑馬魚研究將引起更多關(guān)注并在更多的科學(xué)研究中發(fā)揮重要作用。

致謝：感謝中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所吳乃虎研究員在本文寫作過程中給予指導(dǎo)和修正；感謝北京大學(xué)生命科學(xué)院張博實驗室在試驗研究過程中給予大力支持與幫助。

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