朱路平，向 誠，莊文婷，何 靜，李 鵬，2，李寶才*

1昆明理工大學生命科學與技術(shù)學院，昆明650500;2 澳門大學中華醫(yī)藥研究院中藥質(zhì)量研究國家重點實驗室，澳門000856

甘西鼠尾草(Salvia przewalskii Maxim)為唇形科鼠尾草屬弧隔鼠尾草亞屬植物，又名大紫丹參、紫丹參、甘肅丹參、秦紅艽，主要分布于我國甘肅西部、四川西部、云南西北部及西藏等地［1］。甘西鼠尾草在我國是廣泛使用的中草藥，民間多用其根入藥，四川作秦艽的代用品，云南作丹參代用品［2］。其具有與丹參相似的藥理活性，具有抗菌、消炎、擴冠、抗脂質(zhì)過氧化、抗血小板凝聚等作用［3，4］。研究表明甘西鼠尾草中二萜醌類化合物是產(chǎn)生這些藥理活性的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，所以進一步從甘西鼠尾草中尋找二萜活性成分，對其開發(fā)和利用提供理論依據(jù)具有重要意義。為此，筆者對云南麗江產(chǎn)甘西鼠尾草的化學成分進行了研究，初步分離出12 個化合物，分別鑒定為:丹參酮ⅡA(1)、丹參酮Ⅰ(2)、丹參內(nèi)酯(3)、隱丹參酮(4)、丹參酸甲酯(5)、間羥基苯甲醛(6)、迷迭香酚(7)、異迷迭香酚(8)、紫丹參甲素(9)、紫丹參乙素(10)、二氫丹參酮Ⅰ(11)、丹參新醌甲(12)。其中，化合物7、8 為首次從該植物中分離得到，化合物6 為首次從該屬植物中分離得到。

1 實驗部分

1.1 儀器與材料

Brucker AV-400 和DRX-500 超導核磁共振儀;API QSTAR Pulsar 質(zhì)譜儀;Agilent 1200 高效液相色譜儀;LC3000 型高效液相色譜儀(北京創(chuàng)新通恒科技有限公司);Sephadex LH-20 (20～100 μm，Pharmacia Fine Chemical Co.，Ltd.);MCI gel CHP20P(75～150 μm，Mitsubishi Chemical Co.，Ltd.);Rp-18(40～50 μm，Merk Co.，Ltd);柱層析硅膠(200～300目)、薄層層析硅膠(GF254)均為青島海洋化工廠產(chǎn)品;顯色劑:5%硫酸-乙醇溶液;柱層析溶劑均為工業(yè)級重蒸溶劑。

甘西鼠尾草藥材于2010 年8 月采自云南省麗江市，由云南省中醫(yī)中藥研究院郭世民研究員鑒定為唇形科植物甘西鼠尾草(Salvia przewalskii)。樣本現(xiàn)存于昆明理工大學生命科學與技術(shù)學院天然產(chǎn)物制藥實驗室。

1.2 提取與分離

干燥甘西鼠尾草(全草)藥材7.3 kg，粉碎后過60 目篩，用100%丙酮(每次20 L)室溫下超聲提取三次，每次2 h，提取液減壓濃縮得粗浸膏300 g。所得浸膏經(jīng)硅膠柱色譜石油醚-乙酸乙酯梯度(1∶0、9∶1、3∶1、1∶1、3∶7)洗脫，TLC 檢測合并得5 個部分Fr.1～5。Fr.2(42 g)經(jīng)硅膠柱層析，石油醚-乙酸乙酯梯度(20∶1、15∶1、10∶1、8∶1、5∶1)洗脫，石油醚-乙酸乙酯(10∶1)洗脫部分反復上硅膠柱得到化合物1(1.8 g)、化合物2(20 mg)，石油醚-乙酸乙酯(8∶1)洗脫部分反復上硅膠柱得到化合物3(10 mg);Fr.3(30 g)經(jīng)MCI 柱層析MeOH-H2O(65%、75%、85%)梯度洗脫，75%MeOH-H2O 洗脫部分反復硅膠柱色譜和Sephadex LH-20 純化得化合物4(8 g)、化合物5(26 mg);Fr.4(14 g)經(jīng)MCI 柱層析MeOHH2O(50%、70%、80%、90%)梯度洗脫，50%MeOHH2O 洗脫部分反復硅膠柱色譜得化合物6(10 mg)，70%MeOH-H2O 洗脫部分反復硅膠柱色譜和Sephadex LH-20 純化得化合物7(16 mg)、化合物8(50 mg)，80%MeOH-H2O 洗脫部分反復Sephadex LH-20純化后，利用半制備液相色譜制備得化合物9(200 mg)、化合物10(84 mg);Fr.5(20 g)經(jīng)Rp-18 反相柱層析MeOH-H2O(40%、70%、80%、90%)梯度洗脫劃分為兩個組分，組分2 經(jīng)反復硅膠柱色譜、Rp-18 反相柱層析及Sephadex LH-20 純化得化合物11(60 mg)，化合物12(124 mg)。

圖1 化合物1～12 的結(jié)構(gòu)式Fig.1 Chemical structures of compounds 1-12

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 紅色粉末(氯仿)，mp:201～202℃，ESI-MS m/z:295［M+H］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:1.80 (2H，m，H-1)，1.66 (2H，m，H-2)，3.19 (2H，m，H-3)，7.64 (1H，d，J =6.4 Hz，H-6)，7.55 (1H，d，J=6.4 Hz，H-7)，7.26 (1H，s，H-16)，2.26 (3H，s，Me-17)，1.31 (6H，s，Me-18，Me-19);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:29.8 (C-1)，19.3(C-2)，37.8 (C-3)，34.9 (C-4)，150.1 (C-5)，133.5 (C-6)，120.2 (C-7)，127.4 (C-8)，126.4 (C-9)，144.6 (C-10)，183.6 (C-11)，175.7 (C-12)，121.1(C-13)，161.7 (C-14)，120.3 (C-15)，141.2(C-16)，8.8 (C-17)，31.8 (C-18，C-19)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［5］報道基本一致，故鑒定化合物1 為丹參酮ⅡA。

化合物2 紫紅色粉末(氯仿)，ESI-MS m/z:277［M +H］+;1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:9.26(1H，d，J = 8.8 Hz，H-1)，7.56 (1H，dd，J = 7.0，8.8 Hz，H-2)，7.36 (1H，d，J = 7.0 Hz，H-3)，8.31(1H，d，J = 8.8 Hz，H-6)，7.82 (1H，d，J = 8.8 Hz，H-7)，7.28 (1H，s，H-16)，2.31 (3H，s，Me-17)，2.70 (3H，s，Me-18);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:124.7(C-1)，130.6 (C-2)，128.4 (C-3)，135.2(C-4)，133.7 (C-5)，132.8 (C-6)，118.7 (C-7)，129.7 (C-8)，123.2 (C-9)，132.9 (C-10)，183.5(C-11)，175.6 (C-12)，121.7 (C-13)，161.2 (C-14)，120.4 (C-15)，142.0 (C-16)，8.8 (C-17)，19.8 (C-18)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［6］報道基本一致，故鑒定化合物2 為丹參酮Ⅰ。

化合物3 無色針狀結(jié)晶(氯仿)，EI-MS m/z:264(［M］+，100)，263 (33)，208 (25)，184 (24)，165 (20);1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:8.34 (1H，d，J = 8.2 Hz，H-1)，7.45(1H，dd，J = 8.2，8.2 Hz，H-2)，7.35 (1H，d，J = 8.2 Hz，H-3)，7.80(1H，d，J = 8.8 Hz，H-6)，7.74 (1H，d，J = 8.8 Hz，H-7)，7.37 (1H，s，H-16)，2.36 (3H，s，Me-17)，2.63 (3H，s，Me-18);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:120.3 (C-1)，126.9 (C-2)，128.8 (C-3)，134.5(C-4)，123.5 (C-5)，120.7 (C-6)，116.6 (C-7)，110.2 (C-8)，107.9 (C-9)，133.1 (C-10)，158.6(C-11)，158.6 (C-13)，149.5 (C-14)，141.0 (C-15)，120.3 (C-16)，8.5 (C-17)，19.5 (C-18)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［6］報道基本一致，故鑒定化合物3 為丹參內(nèi)酯。

化合物4 紅色粉末(氯仿)，mp:196～197 ℃，ESI-MS m/z:297 ［M + H］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:3.15 (2H，m，H-1)，1.73 (2H，m，H-2)，1.65 (2H，m，H-3)，7.64 (1H，d，J = 8.0 Hz，H-6)，7.49 (1H，d，J = 8.0 Hz，H-7)，3.52 (1H，m，H-15)，4.84 (1H，t，J = 9.2 Hz，H-16α)，4.35(1H，dd，J = 6.0，9.2 Hz，H-16β)，1.17 (3H，s，Me-17)，1.32 (3H，s，Me-18)，1.32 (3H，s，Me-19);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:29.6 (C-1)，19.0 (C-2)，37.7 (C-3)，34.7 (C-4)，152.3 (C-5)，132.6(C-6)，122.5 (C-7)，128.3 (C-8)，126.8 (C-9)，143.7 (C-10)，184.2 (C-11)，175.6 (C-12)，118.4(C-13)，170.8 (C-14)，34.5 (C-15)，81.4 (C-16)，18.8 (C-17)，31.9 (C-18)，31.8 (C-19)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［6］報道基本一致，故鑒定化合物4 為隱丹參酮。

化合物5 紅色粉末(氯仿)，mp:174～176 ℃，ESI-MS m/z:339［M + H］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:3.24 (2H，t，J = 7.6 Hz，H-1)，1.80(2H，m，H-2)，1.74(2H，m，H-3)，7.58 (1H，d，J =8.1 Hz，H-6)，7.49 (1H，d，J = 8.1 Hz，H-7)，7.26(1H，d，J = 8.1 Hz，H-16)，2.26 (3H，s，Me-17)，1.58 (3H，s，Me-18)，3.67 (3H，s，Me-20);13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:29.0 (C-1)，19.1 (C-2)，33.9(C-3)，47.1 (C-4)，144.3 (C-5)，134.9 (C-6)，120.3 (C-7)，128.5 (C-8)，126.4 (C-9)，143.0 (C-10)，183.3 (C-11)，175.5 (C-12)，121.2 (C-13)，161.2 (C-14)，120.2 (C-15)，141.5 (C-16)，8.7(C-17)，27.5 (C-18)，177.0 (C-19)，52.5 (C-20)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［7］報道基本一致，故鑒定化合物5 為丹參酸甲酯。

化合物6 白色粉末(氯仿)，mp:103～104 ℃，ESI-MS m/z:107［M + H］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:9.86(1H，s，-CHO)，7.33～7.31 (2H，m，H-5，H-6)，7.28(1H，d，J = 1.6 Hz，H-2)，7.07(1H，dd，J = 8.4，1.6 Hz，H-4);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:141.5 (C-1)，119.0(C-2)，149.37(C-3)，126.4(C-4，C-6)，130.1 (C-5)，197.2 (-CHO)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［8］報道基本一致，故鑒定化合物6 為間羥基苯甲醛。

化合物7 白色粉末(甲醇)，mp:240.0～242℃，ESI-MS m/z:347［M+H］+;1H NMR (400 MHz，MeOD)δ:3.15 (1H，br. d，J = 14 Hz，H-1β)，1.95(1H，m，H-1α)，1.57 (1H，m，H-2β)，1.68 (1H，m，H-2α)，1.22 (1H，m，H-3β)，1.45 (1H，br. d，J =14 Hz，H-3α)，2.05 (1H，s，H-5)，4.52 (1H，d，J =3.0 Hz，H-6)，4.40 (1H，d，J = 3.0 Hz，H-7)，6.79(1H，s，H-14)，3.00 (1H，sept，J = 7.0 Hz，H-15)，1.01 (3H，d，J = 7.0 Hz，Me-16)，1.12 (3H，d，J =6.8 Hz，Me-17)，0.91 (3H，s，Me-18)，0.98 (3H，s，Me-19);13C NMR (100 MHz，MeOD)δ:27.1 (C-1)，18.9 (C-2)，37.9 (C-3)，31.6 (C-4)，55.4 (C-5)，74.7 (C-6)，78.2 (C-7)，123.5 (C-8)，127.5(C-9)，47.6 (C-10)，142.8 (C-11)，143.1 (C-12)，134.5 (C-13)，118.5 (C-14)，27.4 (C-15)，22.3(C-16)，22.7 (C-17)，21.9 (C-18)，31.8 (C-19)，178.9 (C-20)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［9］報道基本一致，故鑒定化合物7 為迷迭香酚。

化合物8 白色粉末(吡啶)，1H NMR (400 MHz，C5D5N)δ:3.15 (1H，br. d，J = 14Hz，H-1β)，1.97 (1H，m，H-1α)，1.55 (1H，m，H-2β)，1.69(1H，m，H-2α)，1.21 (1H，m，H-3β)，1.46 (1H，br. d，J = 14 Hz，H-3α)，2.15 (1H，s，H-5)，4.48(1H，d，J = 4.5 Hz，H-6)，5.12 (1H，d，J = 4.5 Hz，H-7)，6.79 (1H，s，H-14)，3.00 (1H，sept，J =7.0 Hz，H-15)，1.01 (3H，d，J = 7.0 Hz，Me-16)，1.13 (3H，d，J = 6.8 Hz，Me-17)，0.92 (3H，s，Me-18)，0.97 (3H，s，Me-19);13C NMR (100 MHz，C5D5N)δ:28.8 (C-1)，20.9 (C-2)，39.5 (C-3)，33.1 (C-4)，56.7 (C-5)，72.0 (C-6)，81.4 (C-7)，132.4 (C-8)，126.6 (C-9)，49.9 (C-10)，146.5 (C-11)，145.5 (C-12)，138.0 (C-13)，120.0 (C-14)，29.8 (C-15)，24.1 (C-16)，24.5 (C-17)，23.4 (C-18)，32.8 (C-19)，180.1 (C-20)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［10］報道基本一致，故鑒定化合物8 為異迷迭香酚。

化合物9 紅色粉末(甲醇)，mp:171～173 ℃，ESI-MS m/z:311 ［M + H］+;1H NMR (400 MHz，CD3OD)δ:3.30 (2H，d，J = 1.45 Hz，H-1)，3.09(2H，t，J = 6.2 Hz，H-2)，4.68 (2H，s，H-3)，7.73(1H，d，J = 8.1 Hz，H-6)，7.57 (1H，s，H-7)，7.51(1H，d，J = 8.1 Hz，H-15)，1.82 (2H，m，J = 6.0 Hz，Me-17)，1.31 (6H，s，Me-18，Me-19);13C NMR(100 MHz，CD3OD)δ:31.1(C-1)，20.1 (C-2)，38.9 (C-3)，35.6 (C-4)，151.6 (C-5)，134.9 (C-6)，121.5 (C-7)，128.4 (C-8)，127.6 (C-9)，145.5(C-10)，183.8 (C-11)，176.2 (C-12)，127.4 (C-13)，163.6 (C-14)，143.3 (C-15)，119.4 (C-16)，56.0 (C-17)，32.1 (C-18，C-19)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［11］報道基本一致，故鑒定化合物9 為紫丹參甲素。

化合物10 棕褐色針晶(吡啶)，mp:240～242℃，ESI-MS m/z:293［M+H］+;1H NMR (400 MHz，C5D5N)δ:9.57 (1H，d，J = 8.0 Hz，H-1)，7.75(1H，d，J = 8.8 Hz，H-2)，7.49 (1H，d，J = 6.8 Hz，H-3)，8.25 (1H，d，J = 8.4 Hz，H-6)，7.99(1H，d，J = 8.8 Hz，H-7)，7.25 (1H，s，H-16)，5.21(3H，s，Me-17)，2.51 (3H，s，Me-18);13C NMR (100 MHz，C5D5N)δ:128.4 (C-1)，132.5 (C-2)，130.3(C-3)，133.7 (C-4)，132.8 (C-5)，130.3 (C-6)，118.9 (C-7)，128.8 (C-8)，123.7 (C-9)，129.4 (C-10)，182.9 (C-11)，175.3 (C-12)，119.6 (C-13)，160.9 (C-14)，124.8 (C-15)，142.6 (C-16)，55.7(C-17)，19.4 (C-18)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［7］報道基本一致，故鑒定化合物10 為紫丹參乙素。

化合物11 紅色粉末(氯仿)，mp:215～216℃，ESI-MS m/z:279［M+H］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:9.26 (1H，d，J = 8.8 Hz，H-1)，7.56(1H，t，J = 8.8 Hz，H-2)，7.40 (1H，d，J = 8.8 Hz，H-3)，8.28 (1H，d，J = 8.8 Hz，H-6)，7.75(1H，d，J = 8.8 Hz，H-7)，3.63 (1H，m，H-15)，4.96 (1H，t，J = 9.6 Hz，H-16α)，4.44 (1H，dd，J= 6.4，9.6 Hz，H-16β)，1.39 (3H，d，J = 7.0 Hz，Me-17)，2.70 (3H，s，Me-18);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:124.9 (C-1)，130.4 (C-2)，128.8 (C-3)，134.9 (C-4)，134.7 (C-5)，131.9 (C-6)，122.2(C-7)，130.6 (C-8)，125.9 (C-9)，135.4 (C-10)，184.2 (C-11)，175.9 (C-12)，118.7 (C-13)，170.8(C-14)，34.8 (C-15)，81.5 (C-16)，18.7 (C-17)，19.9 (C-18)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［6］報道基本一致，故鑒定化合物11 為二氫丹參酮Ⅰ。

化合物12 紅色粉末(吡啶)，mp:201～203℃，ESI-MS m/z:297［M+H］+;1H NMR (400 MHz，C5D5N)δ:2.55 (3H，s，Me-18)，9.72 (1H，d，J =8.8 Hz，H-1)，8.45 (1H，d，J = 8.7 Hz，H-6)，8.30(1H，d，J = 8.7 Hz，H-7)，7.58 (1H，dd，J = 8.8 Hz，H-2)，7.37 (1H，d，J = 8.8 Hz，H-3)，1.68(3H，d，J = 7.0 Hz，Me-17)，4.17 (1H，m，H-15)，4.56 (1H，m，H-16α)，4.40 (1H，m，H-16β);13C NMR (100 MHz，C5D5N)δ:126.0 (C-1)，129.9 (C-2)，129.1 (C-3)，135.8 (C-4)，133.8 (C-5)，131.6(C-6)，122.5 (C-7)，130.8 (C-8)，125.4 (C-9)，135.4 (C-10)，185.1 (C-11)，158.5 (C-12)，122.7(C-13)，185.9 (C-14)，34.4 (C-15)，65.3 (C-16)，15.5 (C-17)，19.7 (C-18)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［5］報道基本一致，故鑒定化合物12 為丹參新醌甲。

致謝:波譜數(shù)據(jù)由中國科學院昆明植物研究所分析測試中心測定。

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