劉 志 張鐵濤 郭 強2， 吳學(xué)壯 高秀華* 楊福合2， 邢秀梅2，

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，北京 100081;2.吉林省特種經(jīng)濟動物分子生物學(xué)省部共建實驗室，長春 130112;3.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，長春 130112)

藍狐又稱北極狐(Alopex lagopus)，屬食肉目犬科動物，其皮張是高檔的制裘原料，毛色美觀，輕便柔軟，保暖性極強，被稱為“軟黃金”，是世界上重要的裘皮產(chǎn)業(yè)支柱之一。銅作為動物必需的微量元素之一，有維持鐵的正常代謝及促進骨骼發(fā)育的作用，此外，銅還作為多種金屬酶的組成成分，參與體內(nèi)的代謝，這些酶包括細胞色素氧化酶、氨基酸氧化酶、酪氨酸酶、過氧化物歧化酶、銅藍蛋白等。目前已有大量研究表明，添加高銅對幼齡動物有明顯的促生長、提高飼料利用率、改善胴體品質(zhì)的作用［1］。國內(nèi)外的研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加高銅(125～250 mg/kg)能夠促進豬和家禽的生長性能和飼料利用率［2］。Aulerich 等［3］研究表明，飼糧中短期添加銅未對水貂平均日增重和血紅蛋白濃度產(chǎn)生影響。Mc Carthy等［4］研究表明，銅含量為20 mg/kg的純合飼糧能夠滿足水貂的生長和毛皮發(fā)育。吳學(xué)壯等［5］研究表明，水貂干粉料飼糧中銅添加量為32 mg/kg(總銅含量為39 mg/kg)時，營養(yǎng)物質(zhì)消化率、氮沉積、凈蛋白質(zhì)利用率及蛋白質(zhì)生物學(xué)價值較為理想，且獲得較佳的生長性能。King［6］研究表明，飼糧中添加銅可促進家兔的生長。WHO［7］1998年曾報道，飼糧中添加8.4 mg/kg葡萄糖銅未對犬的正常生長產(chǎn)生負面影響。高銅對生長期動物有明顯的促生長作用已得到共識，但具體到藍狐銅營養(yǎng)方面的系統(tǒng)研究少見報道。本試驗就此開展研究，旨在測定飼糧銅水平對育成期藍狐生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率及氮代謝的影響，可為確定飼糧中銅的適宜水平及指導(dǎo)實際生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

五水硫酸銅(CuHO4·5H2O):純度≥99%(北京化工廠)。

1.2 試驗動物及飼糧

試驗選擇(55±5)日齡、體重相近的健康藍狐100只。鑒于藍狐目前還沒有統(tǒng)一的飼養(yǎng)標準，參照NRC(1982)［8］藍狐營養(yǎng)需要量及國內(nèi)外近年來的文獻報道［9－10］，設(shè)計出藍狐育成期的基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

試驗采用單因素完全隨機試驗設(shè)計，將100只藍狐隨機分成5組，每組20個重復(fù)(公母各占1/2)，每個重復(fù)1只。Ⅰ～Ⅴ組藍狐分別飼喂銅含量為 7.89、20.00、40.00、80.00、160.00 mg/kg的試驗飼糧。預(yù)試期7 d，正試期60 d。試驗開始前，對藍狐進行常規(guī)免疫接種。每天08:00和15:00各飼喂1次，自由飲水。試驗從2012年7月27日至2012年9月25日在農(nóng)業(yè)部長白山野生生物資源重點野外科學(xué)觀測試驗站進行。

1.4 消化代謝試驗

試驗期開始25 d后，每組分別挑選6只公狐和6只母狐進行消化代謝試驗。消化代謝試驗時間為2012年8月20日至2012年8月23日，共計4 d。采用全收糞法，使用糞尿分離的糞盤收集藍狐每日的糞尿，代謝期間飼養(yǎng)管理與日常飼養(yǎng)管理完全相同。每天收集的糞便稱重后按鮮重的5%加入10%的硫酸溶液，并加入少量甲苯防腐，保存于－20℃冰箱中備用。每日收集尿液按每100 mL加入2 mL 10%硫酸溶液，滴加4滴甲苯防腐，保存于－20℃冰箱中備用。

1.5 測定指標及方法

試驗正試期開始第1天早晨對藍狐進行空腹稱重，為試驗動物的初始體重，以后每隔15 d稱重1次，記錄藍狐的體重，并計算出藍狐的平均日增重和料重比。記錄每只藍狐每天的給料量和剩料量，計算每只藍狐的平均日采食量以及每組的平均日采食量。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

飼糧及排泄物中的干物質(zhì)含量采用65℃烘干法測定;粗蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法測定;粗脂肪含量采用索氏抽提法測定。

干物質(zhì)消化率(%)=［(干物質(zhì)采食量－

干物質(zhì)排出量)/干物質(zhì)采食量］×100;

蛋白質(zhì)消化率(%)=［(蛋白質(zhì)攝入量－

糞中蛋白質(zhì)含量)/蛋白質(zhì)攝入量］×100;

粗脂肪消化率(%)=［(脂肪攝入量－

糞中脂肪含量)/脂肪攝入量］×100;

氮沉積(g/d)=食入氮－糞氮－尿氮;

凈蛋白質(zhì)利用率(%)=(氮沉積/食入氮)×100;

蛋白質(zhì)生物學(xué)價值(%)=［氮沉積/

(食入氮－糞氮)］×100。

1.6 數(shù)據(jù)處理

結(jié)果以平均值±標準差表示，試驗數(shù)據(jù)采用SAS 9.1.3軟件進行統(tǒng)計分析，采用 one-way ANOVA進行差異顯著性檢驗，其中P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 飼糧銅水平對育成期藍狐生長性能的影響

由表2可知，對于育成期公狐，Ⅲ組的平均日增重顯著高于Ⅴ組(P＜0.05)，其他各組差異不顯著(P＞0.05)。料重比以Ⅴ組最高，顯著高于Ⅲ組(P ＜0.05)，其他各組差異不顯著(P ＞0.05)。各組間始重、末重、平均日采食量差異均不顯著(P＞0.05)。

對于育成期母狐，Ⅲ組的平均日增重顯著高于Ⅰ組(P＜0.05)，而料重比顯著低于Ⅰ組(P＜0.05)，其他各組的平均日增重與料重比差異均不顯著(P＞0.05)。各組間始重、末重、平均日采食量差異不顯著(P＞0.05)。

表2 飼糧銅水平對育成期藍狐生長性能的影響Table 2 Effects of dietary copper level on growth performance of growing blue foxes

2.2 飼糧銅水平對育成期藍狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

由表3可知，對于育成期公狐，Ⅲ、Ⅴ組干物質(zhì)采食量極顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ組(P＜0.01)，Ⅰ組的干物質(zhì)采食量顯著低于Ⅱ、Ⅳ組(P＜0.05)。Ⅲ組的干物質(zhì)消化率極顯著高于Ⅱ、Ⅴ組(P＜0.01)，顯著高于Ⅳ組(P ＜0.05)，其他各組差異不顯著(P＞0.05)，蛋白質(zhì)消化率以Ⅲ組最高，極顯著高于Ⅱ、Ⅴ組(P＜0.01)，顯著高于Ⅳ組(P＜0.05)，Ⅱ組蛋白質(zhì)消化率最低。Ⅲ組的脂肪消化率極顯著高于其他各組(P＜0.01)，Ⅰ組脂肪消化率最低，Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ組之間差異不顯著(P＞0.05)。

對于育成期母狐，各組干物質(zhì)采食量和干物質(zhì)排出量均無顯著差異(P＞0.05)，干物質(zhì)消化率以Ⅲ組最高，Ⅰ組最低，但各組之間差異不顯著(P＞0.05)。各組之間蛋白質(zhì)的消化率差異不顯著(P＞0.05)，Ⅲ組最高，Ⅰ組最低。Ⅰ組的脂肪消化率極顯著低于Ⅲ組(P＜0.01)，顯著低于Ⅳ、Ⅴ組(P＜0.05)，Ⅲ組脂肪消化率顯著高于Ⅱ、Ⅳ組(P ＜0.05)。

表3 飼糧銅水平對育成期藍狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響Table 3 Effects of dietary copper level on nutrient digestibility of growing blue foxes

2.3 飼糧銅水平對育成期藍狐氮代謝的影響

由表4可知，對于育成期公狐，各組食入氮以Ⅲ組最高，極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P＜0.01)，顯著高于Ⅳ組(P＜0.05)。Ⅲ組的糞氮極顯著低于Ⅱ組(P ＜0.01)，顯著低于Ⅰ、Ⅴ組(P ＜0.05)，Ⅱ組糞氮最高，但與Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ組差異不顯著(P＞0.05)。Ⅴ組尿氮極顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組(P＜0.01)，其他各組之間差異不顯著(P＞0.05)。Ⅴ組氮沉積極顯著低于Ⅲ組(P＜0.01)，顯著低于Ⅰ、Ⅱ組(P＜0.05)。Ⅴ組凈蛋白質(zhì)利用率最低，極顯著低于Ⅱ、Ⅲ組(P＜0.01)，其他各組之間差異不顯著(P＞0.05)。蛋白質(zhì)生物學(xué)價值以Ⅲ組最高，Ⅴ組最低，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組公狐的蛋白質(zhì)生物學(xué)價值極顯著高于Ⅴ組(P＜0.01)。

對于育成期母狐，Ⅳ組的糞氮顯著高于Ⅰ組(P＜0.05)，其他各組之間差異不顯著(P＞0.05)。各組食入氮和尿氮差異均不顯著(P＞0.05)，食入氮以Ⅴ組最高，Ⅰ組最低，尿氮以Ⅱ組最高，Ⅲ組最低。Ⅲ組的氮沉積顯著高于Ⅱ組(P＜0.05)，其他各組之間差異不顯著(P＞0.05)。Ⅱ組的凈蛋白質(zhì)利用率和蛋白質(zhì)生物學(xué)價值顯著低于Ⅲ組(P＜0.05)，其他各組間差異不顯著(P ＞0.05)。

3 討論

3.1 飼糧銅水平對育成期藍狐生長性能的影響

單胃動物銅需要量一般為 4 ～8 mg/kg［11］，大量研究表明，添加高水平的銅對幼齡動物有明顯的促生長和提高飼料利用率的作用［1］。本試驗中，飼喂銅含量為40 mg/kg飼糧的公狐和母狐均在育成期獲得最大的體重，平均日增重高于其他各組，料重比也相對較低。甘伯中［12］對安哥拉毛兔銅的研究表明，飼糧中添加100或200 mg/kg銅能顯著提高兔的平均日增重，兔的平均日增重隨飼糧銅添加水平的增加而上升，二者間相關(guān)系數(shù) r=0.90。吳學(xué)壯等［5］以 CuHO4·5H2O 為銅源，研究育成期水貂干粉配合飼糧中銅的適宜添加水平，結(jié)果表明，飼糧銅添加量32 mg/kg(總銅含量為39 mg/kg)時獲得較佳的生長性能，與本試驗的結(jié)果相較一致。在本試驗中，最高銅組并未對育成期藍狐的生長性能產(chǎn)生顯著的促進作用，推測原因可能是育成期藍狐飼糧中脂肪含量較高，而銅離子具有氧化性，高銅加速了飼糧中脂肪氧化的速度，影響了機體對飼糧中脂肪的吸收利用。樸厚坤［13］認為，體表面積和體重有直線回歸關(guān)系，因此獲得較大的體重不僅是育成期的目的，也為冬毛生長期獲得較大皮張面積奠定了基礎(chǔ)。

表4 飼糧銅水平對育成期藍狐氮代謝的影響Table 4 Effects of dietary copper level on nitrogen metabolism of growing blue foxes

3.2 飼糧銅水平對育成期藍狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

飼糧中能量水平及飼糧的適口性對藍狐采食量具有影響［8］。在本試驗中，各組動物的能量水平基本一致，試驗中選用的銅源為CuHO4·5H2O，是一種無機銅，具有金屬的澀味，添加高水平的銅可能會降低飼糧的適口性。此外，飼糧中的高銅會大大加速飼糧中油脂的氧化速度［14］，加速油脂酸敗，產(chǎn)生難聞的哈喇味，并會產(chǎn)生毒害作用。本試驗中，Ⅴ組育成期公狐和母狐的干物質(zhì)消化率均不同程度地低于Ⅲ、Ⅳ組，與前人的報道［15］相一致。程忠剛等［16］研究發(fā)現(xiàn)，高銅可提高豬血清中胃泌素的濃度，激活胃蛋白酶，促進胰酶的分泌，加強胃運動，提高消化率;Kirchgessner等［17］研究表明，體內(nèi)適宜的銅離子濃度能激活胃蛋白酶，促進蛋白質(zhì)的吸收。在本試驗中，各組藍狐的蛋白質(zhì)消化率在飼糧銅水平不高于40 mg/kg的時候，隨著銅水平的升高而有明顯的升高趨勢，與Kirchgessner等［17］研究相一致。Luo 等［18］研究表明，添加高水平的硫酸銅可顯著提高斷奶仔豬小腸脂肪酶和磷脂酶A的活性，從而提高飼糧脂肪的消化率，增加必需脂肪酸的吸收。當(dāng)銅添加量較低時，銅添加量的升高提高了藍狐消化道內(nèi)各種消化酶如胃蛋白酶、脂肪酶和磷脂酶的活性，提高了飼糧營養(yǎng)物質(zhì)利用率;當(dāng)銅含量過高時，飼糧中的營養(yǎng)物質(zhì)受到高銅的氧化作用而發(fā)生變質(zhì)，降低了藍狐對飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。本試驗中，Ⅲ組藍狐的脂肪消化率均不同程度地高于其他組，與上述研究報道一致。

3.3 飼糧銅水平對育成期藍狐氮代謝的影響

由本試驗結(jié)果可知，當(dāng)飼糧銅水平為40 mg/kg時，氮沉積、凈蛋白質(zhì)利用率和蛋白質(zhì)生物學(xué)價值均不同程度地高于其他各組。藍狐的食入氮量與干物質(zhì)采食量和蛋白質(zhì)水平有一定的相關(guān)性，從而各組藍狐的食入氮存在不同程度的差異。楊春花等［19］研究表明，蛋白質(zhì)供應(yīng)過量及氨基酸不平衡是導(dǎo)致大量尿氮排出和氮利用率變化的主要原因。Pfeiffer等［20］研究表明，攝入的蛋白質(zhì)與尿氮有很強的相關(guān)性。本試驗中，Ⅴ組公狐的食入氮顯著高于其他幾組，因此其尿氮排出量較其他各組要高。甘伯中［12］研究表明，飼喂高銅(200 mg/kg)組飼糧的毛兔氮的表觀消化率、氮表觀存留量和表觀存留率較低銅(10 mg/kg)組有極顯著的提高。吳學(xué)壯等［5］研究表明，飼糧銅添加水平在32 mg/kg時，氮沉積、凈蛋白質(zhì)利用率和蛋白質(zhì)生物學(xué)價值較理想，本文結(jié)果與其相一致。由此可知，在一定范圍內(nèi)，隨著飼糧銅水平的升高，動物對飼糧中氮的利用率也隨之提高。本試驗中，飼糧銅水平為40 mg/kg時，氮沉積、凈蛋白質(zhì)利用率和蛋白質(zhì)生物學(xué)價值較為理想。

4 結(jié)論

①育成期藍狐飼糧銅水平為40 mg/kg時能獲得較好的生長性能。

② 當(dāng)飼糧銅水平為40 mg/kg時，藍狐對飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)的利用率較高，凈蛋白質(zhì)利用率和蛋白質(zhì)生物學(xué)價值較為理想，同時可降低氮的排放。

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