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        間作套種對(duì)山銀花產(chǎn)量與品質(zhì)的影響Δ

        2013-12-03 03:35:44張建海徐曉玉馮彬彬胡奎謝世友王海洋重慶三峽醫(yī)藥高等??茖W(xué)校重慶40410西南大學(xué)重慶400716
        中國(guó)藥房 2013年3期
        關(guān)鍵詞:草苷銀花木犀

        張建海,徐曉玉,馮彬彬,胡奎,謝世友,王海洋(1.重慶三峽醫(yī)藥高等??茖W(xué)校,重慶40410;.西南大學(xué),重慶 400716)

        間作套種(以下簡(jiǎn)稱“間種”)是指在一個(gè)生長(zhǎng)季內(nèi),在同一塊田上分行或分帶相間種植2種或2種以上生育季節(jié)相近的植物的種植方式。目前,中藥材的間種主要集中在中藥材與糧食作物、果樹(shù)等之間,而中藥材之間的間種非常少,且間種對(duì)中藥材品質(zhì)有無(wú)影響尚未見(jiàn)報(bào)道。山銀花藥源植物之一灰氈毛忍冬(Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.)含有黃酮類、揮發(fā)油、有機(jī)酸、皂苷類等多種化學(xué)成分,具有抗病原微生物、解熱、保肝利膽等作用[1-5]。本課題組以重慶秀山隘口鎮(zhèn)為實(shí)驗(yàn)基地,研究間種野菊花(Chrysanthemum indicum L.)對(duì)山銀花產(chǎn)量與品質(zhì)的影響。

        1 材料

        1.1 儀器

        LC-20 AB高效液相色譜(HPLC)儀,含SPD-20紫外檢測(cè)器、Shimpack VP-ODS(150 mm×4.6 mm,5 μm)色譜柱(日本島津公司);KQ5200 E超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);U-3010紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(日本日立公司);JA2003 N電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司);HH.SYZ1-NI電熱恒溫水浴鍋(北京市長(zhǎng)風(fēng)儀器儀表公司);SHB-ⅢS循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司);摩爾超純水機(jī)(上海摩勒科學(xué)儀器有限公司)。

        1.2 試劑

        乙腈、甲醇為色譜純,其他試劑均為分析純,水為去離子水;綠原酸、木犀草苷對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院,批號(hào)分別為110753-200413、111720-200603);灰氈毛忍冬皂苷乙、川續(xù)斷皂苷乙對(duì)照品(四川省維克奇生物科技有限公司,批號(hào)分別為wkq10397、wkq10398,純度均≥98%)。

        1.3 實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所

        重慶秀山隘口鎮(zhèn)壩芒村山銀花研究基地;西南大學(xué)藥學(xué)院中藥研究所。

        2 方法

        2.1 間種栽培方法

        在山銀花行間種植野菊花,種植密度分別為一行、兩行、四行野菊,以單種山銀花作為對(duì)照組。野菊花種植采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),以氮肥量(尿素,A)、磷肥量(磷酸二氫鈣,B)、鉀肥量(硫酸鉀,C)、種植密度(D)為考察因素。山銀花正常施肥。山銀花種植的行間距為200 cm×200 cm,野菊花種植的行間距為40 cm×40 cm,每個(gè)種植小區(qū)面積為12.5 m2,共10個(gè)種植小區(qū)(其中,1、2、3小區(qū)間種一行;4、5、6小區(qū)間種兩行;7、8、9小區(qū)間種四行;10小區(qū)作為對(duì)照)。間種模式見(jiàn)圖1。正交試驗(yàn)因素與水平見(jiàn)表1。

        圖1 間種模式圖Fig 1 Intercropping deograph

        表1 正交試驗(yàn)因素與水平Tab 1 Factors and levels of orthogonal experiment

        2.2 山銀花各期千蕾質(zhì)量測(cè)定

        分別采收各樣地山銀花青條期(花蕾長(zhǎng)0.5~3.5 cm,似米粒,綠色)、三青期(花蕾長(zhǎng)3.0~4.5 cm,唇部已膨大,微向內(nèi)彎曲,綠色)、二白期(花蕾長(zhǎng)4.0~5.0 cm,唇部明顯膨大,向內(nèi)彎曲,綠白色)、大白期(花蕾長(zhǎng)5.0~6.0 cm,唇部綠白色,含苞待放)花蕾。各樣地隨機(jī)采收5株,每株采收100 g,采收后的樣品置于40℃烘箱烘至全干,分別測(cè)其千蕾質(zhì)量,測(cè)量5次,取平均值。

        2.3 山銀花中綠原酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定

        綠原酸是山銀花花蕾中的主要有效成分,根據(jù)綠原酸的理化性質(zhì),采用筆者已研究確定的提取工藝條件和HPLC測(cè)定方法[6],以綠原酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)作為質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),對(duì)山銀花各期進(jìn)行檢測(cè)。

        2.4 山銀花中木犀草苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定

        采用本課題組確定的方法[7],以木犀草苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)為質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),對(duì)山銀花各期進(jìn)行檢測(cè)。

        2.5 山銀花中灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙的質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定

        灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙的質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定參照2010版《中國(guó)藥典》(一部)山銀花項(xiàng)下[8]方法進(jìn)行。

        3 結(jié)果與分析

        3.1 山銀花各期千蕾質(zhì)量

        將各樣地山銀花各期花蕾稱其千蕾質(zhì)量,并進(jìn)行比較,結(jié)果見(jiàn)圖2。

        圖2 各期山銀花千蕾質(zhì)量Fig 2 Weight of alabastrum of Lonicerae Flos at different stages

        山銀花的收獲期是大白期。從圖2中可以看出,間種兩行野菊花(4、5、6號(hào)地)時(shí),4個(gè)時(shí)期花蕾的千蕾質(zhì)量均顯著高于對(duì)照組(10號(hào)地),暗示干物質(zhì)的積累從青條期到大白期逐漸增大。其中,三青期到二白期干物質(zhì)積累最多,二白期到大白期干物質(zhì)積累較少。因此,從三青期到二白期是山銀花生長(zhǎng)最關(guān)鍵的時(shí)期,對(duì)山銀花品質(zhì)有利。

        3.2 山銀花各期綠原酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)

        取各樣地山銀花烘干后的干燥花蕾,按“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定綠原酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù),并對(duì)各期數(shù)據(jù)進(jìn)行比較,結(jié)果見(jiàn)圖3。

        圖3 各期綠原酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)Fig 3 Contents of chlorogenic acid at different stages

        從圖3中可以看出,間種兩行野菊花(4、5、6號(hào)地)時(shí),二白期花蕾中綠原酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均顯著高于對(duì)照組(10號(hào)地);青條期、三青期和大白期花蕾中綠原酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均高于對(duì)照組,其中青條期4、6號(hào)地,三青期和大白期4、5號(hào)地與對(duì)照品比較差異有顯著性。

        3.3 山銀花各期木犀草苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)

        取各樣地山銀花烘干后的干燥花蕾,按“2.4”項(xiàng)下方法測(cè)定木犀草苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù),并對(duì)各期數(shù)據(jù)進(jìn)行比較,結(jié)果見(jiàn)圖4。

        從圖4中可以看出,間種兩行野菊花(4、5、6號(hào)地)時(shí),4個(gè)時(shí)期花蕾中木犀草苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均高于對(duì)照組(10號(hào)地),差異有顯著性。

        圖4 各期木犀草苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)Fig 4 Contents of galuteolin at different stages

        3.4 山銀花各期灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙的質(zhì)量分?jǐn)?shù)

        取各樣地山銀花烘干后的干燥花蕾,按“2.5”項(xiàng)下方法測(cè)定灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙的質(zhì)量分?jǐn)?shù),并對(duì)各期數(shù)據(jù)進(jìn)行比較,結(jié)果分別見(jiàn)圖5、圖6。

        圖5 各期灰氈毛忍冬皂苷乙的質(zhì)量分?jǐn)?shù)Fig 5 Contents of macranthoidin B at different stages

        圖6 各期川續(xù)斷皂苷乙的質(zhì)量分?jǐn)?shù)Fig 6 Contents of dipsacoside B at different stages

        從圖5中可以看出,間種兩行野菊花(4、5、6號(hào)地)時(shí),4個(gè)時(shí)期花蕾中灰氈毛忍冬皂苷乙的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均顯著高于對(duì)照組(10號(hào)地)。從圖6中可以看出,間種兩行野菊花(4、5、6號(hào)地)時(shí),二白期和大白期花蕾中川續(xù)斷皂苷乙的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均顯著高于對(duì)照組(10號(hào)地);青條期和三青期花蕾中川續(xù)斷皂苷乙的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均高于對(duì)照組,其中4、6號(hào)地與對(duì)照品比較差異有顯著性。

        4 討論

        4.1 間種野菊花對(duì)山銀花產(chǎn)量的影響

        本試驗(yàn)結(jié)果顯示,間種野菊花對(duì)山銀花產(chǎn)量有一定影響。其中,間種兩行野菊花可以顯著增加山銀花千蕾質(zhì)量;間種一行野菊花沒(méi)有顯著影響;間種四行野菊花使山銀花千蕾質(zhì)量有下降趨勢(shì)。究其原因:第一,本試驗(yàn)選擇的是三年生或四年生的山銀花,植株相對(duì)較小、行間距較大,間種一行野菊花對(duì)山銀花產(chǎn)量影響很?。坏诙?,從栽培時(shí)間來(lái)看,野菊花一般是在三月底四月初移栽,這時(shí)植株長(zhǎng)得也比較小,到五月底六月初才逐漸進(jìn)入生長(zhǎng)旺盛期,而這個(gè)時(shí)期山銀花的花蕾已經(jīng)可以采摘,二者生長(zhǎng)時(shí)期的差異導(dǎo)致間種野菊花對(duì)山銀花產(chǎn)量沒(méi)有太大的影響;第三,兩行種植的施肥可能影響到山銀花的生長(zhǎng),使山銀花產(chǎn)量增加,四行種植由于密度較大而影響到山銀花的產(chǎn)量。對(duì)于在山銀花生長(zhǎng)旺盛期種植野菊花是否對(duì)其產(chǎn)量有影響是下一步要研究的主要內(nèi)容。

        4.2 間種野菊花對(duì)山銀花品質(zhì)的影響

        綠原酸、木犀草苷、灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙是山銀花中的主要藥效成分。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,間種野菊花對(duì)山銀花中4種主要成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)有不同程度的影響。間種兩行野菊花可顯著提高4種成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù);間種一行或四行野菊花與對(duì)照組比較差異不大,其中間種四行使4種成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)有下降趨勢(shì)。究其原因:間種兩行野菊花的行間距合適,2種藥材之間對(duì)水肥競(jìng)爭(zhēng)較??;間種一行野菊花的行間距較大,與單種條件基本相似;而間種四行野菊花由于行間距較小,較高密度間種可能使2種藥材對(duì)肥料等資源有所競(jìng)爭(zhēng),具體影響因素有待進(jìn)一步研究。上述結(jié)果表明,三年期或四年期山銀花與野菊花間種以二行野菊花為最佳。

        另外,本試驗(yàn)主要探討間種野菊花密度對(duì)山銀花產(chǎn)量與品質(zhì)的影響,對(duì)于肥料等因素的影響將另行研究。

        [1]陳雨,馮煦,賈曉東,等.灰氈毛忍冬花蕾的化學(xué)成分研究[J].中草藥,2008,39(6):823.

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        [3]時(shí)京珍,陳秀芬,宛蕾.黃褐毛忍冬和灰氈毛忍冬幾種成分對(duì)大、小鼠化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用[J].中國(guó)中藥雜志,1999,24(6):363.

        [4]李曉青,黃國(guó)勤.中藥材與農(nóng)林生物的間套作復(fù)合種植模式探析[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2008(15):267.

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        [7]王艷艷,徐曉玉,鄧君,等.HPLC法同時(shí)測(cè)定灰氈毛忍冬中綠原酸與木犀草苷的含量[J].中藥材,2009,32(11):1705.

        [8]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典:一部[S].2010年版.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010:28-29.

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